بررسی اثر سرکوب بیان Nanogو داروی شیمی درمانی Cisplatin بر سلول های غیر کوچک سرطان ریه
نام نخستين پديدآور
بصیرا نجف زاده
وضعیت نشر و پخش و غیره
نام ناشر، پخش کننده و غيره
علوم طبیعی
تاریخ نشرو بخش و غیره
۱۴۰۰
مشخصات ظاهری
نام خاص و کميت اثر
۷۸ص.
مواد همراه اثر
سی دی
یادداشتهای مربوط به پایان نامه ها
جزئيات پايان نامه و نوع درجه آن
کارشناسی ارشد
نظم درجات
زیست شناسی سلولی و مولکولی
زمان اعطا مدرک
۱۴۰۰/۰۶/۲۸
یادداشتهای مربوط به خلاصه یا چکیده
متن يادداشت
سرطان ریه از دو گروه اصلی سرطان سلول¬های غیر¬کوچک ریه و سرطان سلول¬های کوچک ریه تشکیل شده است. سرطان سلول¬های غیر¬کوچک ریه یکی از مهم¬ترین علل مرگ و میر ناشی از سرطان در جهان است. در داخل توده تومور جمعیت کوچکی از سلول¬ها وجود دارد که سلول¬های بنیادی سرطان نامیده می¬شوند. فاکتور رونویسی Nanog بیان بالایی در سلول¬های بنیادی سرطان دارد و به عنوان مارکر داخلی این سلول¬ها شناخته شده است. فاکتور رونویسی Nanog نقش اساسی در ایجاد توانایی تکثیر، خود تجدید شوندگی، مهاجرت، متاستازی، و مقاومت در برابر درمان سلول¬های سرطانی ریه را دارد. تحقیقات ثابت کرده¬اند که استفاده از Nanog siRNA به تنهایی و یا درمان ترکیبی آن با داروی شیمی درمانی Cisplatin اثر مثبت و امیدوارکننده¬ای در درمان سرطان داشته¬اند. در این مطالعه میزان تاثیر ترکیبی Nanog siRNAو داروی Cisplatin بر زنده¬مانی و حساسیت سلول-های A549 توسط تست MTT سنجیده شد و میزان اثر سرکوبگری این ترکیب درمانی بر روی ژن Nanog با استفاده از تکنیک qRT-PCR بررسی شد. برای بررسی میزان مهاجرت سلول¬ها از wound healing assay و برای سنجش تاثیر siRNA Nanog و داروی Cisplatin بر روی ویژگی¬های بنیادی سلول¬های سرطانی تست colony formation به کار برده شد. از آنجایی که سرکوب Nanog باعث القای آپوپتوز می¬شود؛ از طریق رنگ آمیزی Annexin V-FITC/PI و DAPI میزان آپوپتوز القا شده و توقف چرخه سلولی به روش فلوسایتومتری اندازه¬گیری شد. در آخر، میزان بیان برخی از ژن¬های درگیر در بنیادی بودن سلول¬های بنیادی سرطانی و ژن¬های مرتبط با مقاومت دارویی توسط تکنیک qRT-PCR بررسی شد.با انتقال Nanog siRNA به درون سلول¬های A549 میزان بیان Nanog کاهش یافته است علاوه بر آن، سرکوب Nanog توسط siRNA به همراه داروی Cisplatin منجر به کاهش رشد، مهاجرت، متاستازی و مقاومت دارویی و باعث افزایش میزان آپوپتوز و توقف چرخه رشد سلولی در فاز Sub-G1 در سلول¬های A549 شده است. همچنین، میزان بیان mRNA ژن¬های دخیل در ویژگی بنیادی سلول¬های A549 مثل CD44 و Sox-2 و میزان بیان mRNA ژن¬های c‐Myc و PD-L1 که در ایجاد مقاومت دارویی Cisplatin نقش دارند، نیز کاهش یافته¬اند.پس به طور خلاصه، نتایج این مطالعه نشان می¬دهد که سرکوب فاکتور رونویسی Nanog باعث کاهش توانایی مهاجرت و متاستازی سلول¬های A549 می¬شود که این سرکوب زمانی که با اثر داروی Cisplatin ترکیب می¬شود تاثیر بیشتری در القای آپوپتوز، مهار قدرت متاستازی و مقاومتی دارویی دارد که نشان می¬دهد این روش ترکیب درمانی می¬تواند یک روش جذاب درمانی سرطان ریه باشد.
متن يادداشت
Abstract:Lung cancer falls into two major groups, non-small cell lung carcinoma and small cell lung carcinoma. Non-small cell lung carcinoma is one of the leading cause of cancer-associated death in the world. There is a small population of cells within the tumor bulk called Cancer Stem Cells. Nanog transcription factor has high level in Cancer Stem Cells and it is known as an inner marker of these cells. Nanog has a crucial role in the proliferation, self-renewal, migration, metastasis, and chemoresistance of cancerous lung cells. Researches have indicated that siRNA usage individually or in combination with Cisplatin has a promising outcome in cancer therapy. To examine the effect of Nanog siRNA and Cisplatin in combination on A549 cells’ cytotoxicity and chemosensitivity, MTT assay has been conducted and to measure the inhibition effect of this combination therapy qRT-PCR technique has been carried out. Furthermore, via wound healing assay and colony formation investigation of Nanog siRNA and Cisplatin on A549 cell’s migration and stemness features has done. Since Nanog knockdown induces apoptosis, through Annexin V-FITC/PI and DAPI assay apoptosis rate and cell cycle arrest have conducted and measured via flow cytometry technique. Finally, the expression of stemness- and chemoresistance-associated genes were evaluated via qRT-PCR technique. Nanog expression in A549 cells has been reduced through Nanog siRNA transfection. Its inhibition via siRNA/Cisplatin has decreased cells’ proliferation, migration, metastasis, and chemoresistance ability and has elevated apoptosis rate and cell cycle arrest in sub-G1 phase in A549 cells. In addition, mRNA level of stemness-related genes, CD44 and Sox-2, and chemoresistance-related genes, c-Myc and PD-L1, have been reduced. In summary, the results of this study revealed that Nanog knockdown leads to reduction of A549 cell’s migration and metastasis ability and when combined with Cisplatin effect induces apoptosis and inhibits migration and chemoresistance ability which indicates Nanog knockdown in combination with Cisplatin is a promising lung cancer therapy approach.
عنوانهای گونه گون دیگر
عنوان گونه گون
Investigation of the Effect of Nanog Knockdown on Non-Small Cell Lung Cancer and Chemotherapy by Cisplatin
نام شخص به منزله سر شناسه - (مسئولیت معنوی درجه اول )