بررسی حضور و برآورد میزانAS lncRNA - BACE۱در پلاسمای خون افراد مبتلا به بیماری آلزایمر
عنوان اصلي به زبان ديگر
scrutiny toward the existence and level of BACE۱-AS lncRNA in blood serum samples of people with Alzheimers disease A
نام نخستين پديدآور
/سیده ناهید فتوحی بناب
وضعیت نشر و پخش و غیره
نام ناشر، پخش کننده و غيره
: علوم طبیعی
تاریخ نشرو بخش و غیره
، ۱۳۹۶
نام توليد کننده
، میرزائی
مشخصات ظاهری
نام خاص و کميت اثر
۸۹ص
یادداشتهای مربوط به نشر، بخش و غیره
متن يادداشت
چاپی - الکترونیکی
یادداشتهای مربوط به پایان نامه ها
جزئيات پايان نامه و نوع درجه آن
کارشناسی ارشد
نظم درجات
زیست شناسی گرایش ژنتیک
زمان اعطا مدرک
۱۳۹۶/۰۶/۱۹
کسي که مدرک را اعطا کرده
تبریز
یادداشتهای مربوط به خلاصه یا چکیده
متن يادداشت
زمینه و اهداف :استفاده از عاملصهای تشخیصی جهت تشخیص شروع بیماریصهای زوال عقلی به خصوص آلزایمر و همچنین میزان پیشرفت بیماری برای رفع مشکلات سنجشصهای کلینیکی و ارائهصی درمان متناسب با آن تبدیل به یک نیاز اساسی شده است .تغییر در میزان پروتئین BACE۱ از مهم ترین عوامل ایجادصکنندهصی آلزایمر میصباشد که توسطAS - BACE۱به شدت کنترل میصشود .میزان هر دوی این فاکتورها در مایع مغزی-نخاعی بیماران آلزایمری افزایش قابل توجهی دارد که نتیجهصی آن اختلال در عملکرد نواحی به خصوصی از مغز شده و بیماری را در پی دارد .از نسبت این افزایش به عنوان عامل تشخیص برای شناسایی بیماری آلزایمر میصتوان استفاده نمود .با توجه به اینکه اکثر پروتئینصها و RNA ها از طریق بستهصهای وزیکولی به سمت مایعات بدن حرکت میصکنند، این احتمال وجود دارد کهAS - BACE۱نیز وارد خون شده باشند .این مطالعه با هدف آشکارسازی وجود یا عدم وجودAS lncRNA - BACS۱در سرم خون افراد مبتلا به بیماری آلزایمر انجام گرفته است .همچنین با تایید وجود آن در سرم ، میزان آن در افراد بیمار با افراد غیرصمبتلا به آلزایمر مقایسه و برآورد شد .مواد و روشصها :بدین منظور نمونهصهای خونی ۴۵ بیمار مبتلا و ۳۶ فرد غیرمبتلا جمعصآوری و از آنها RNA تام استخراج گردید .پلاسمای نمونهصهای خونی بیماران جداسازی وRNA ی پلاسما با محلول استخراج TRIzol استخراج گردید .در قسمت دوم کار، با استفاده از محلول استخراج مخصوص اگزوزوم(Exoqiuck) ، اگزوزومصها از نمونهصهای پلاسما تخلیص شد با تایید استخراج اگزوزومصها با SEM و DLS ، RNA آنها استخراج شد .جهت سنتز cDNA ازRNA ی نمونهصهای پلاسمایی و اگزوزومی از کیت سنتز TaKaRa مورد استفاده قرار گرفت .با cDNAs های موجود، پرایمرهای ژنAS - BACE۱و ژن) U۶ کنترل داخلی (به لحاظ برنامهصی دمایی و اطمینان از صحت کارکرد پرایمرها بررسی و تنظیم گردید .بیان ژنAS - BACE۱را به لحاظ کمی با استفاده ازTime - Qantitative Realارزیابی نمودیم .نتیجه :حضور رونوشتAS - BACE۱را در نمونهصهای پلاسما و اگزوزومی مورد شناسایی قرار گرفت .آنالیز سطح بیان رونوشتAS - BACE۱بین گروه بیمار و گروه کنترل در نمونهصهای پلاسمایی و نمونهصهای اگزوزومی استخراج شده از پلاسمای انسانی تغییری نشان نداد .تغییر بیان بین زیرگروه آلزایمریAD) - (Fullو کنترل(p <۰.۰۰۰۱) ، زیرگروه آلزایمریAD) - (Fullو پیشص-آلزایمریAD) (p <۰.۰۰۰۱) - (Preو زیرگروه پیشص-آلزایمریAD) - (Preو گروه کنترل (p <۰.۰۰۰۱) معنیصدار میصباشد .سطح رونوشتAS - BACE۱بین زیرگروه آلزایمریAD) - (Fullو کنترل افزایش نشان میصدهد .میزان بیانAS - BACE۱در زیرگروه آلزایمریAD) - (Fullنسبت به پیشص-آلزایمریAD) - (Preافزایش دارد .اما سطح بیان در زیرگروه پیشص-آلزایمریAD) - (Preدر مقایسه با گروه کنترل کاهش دارد .با آنالیز سطح رونوشتAS - BACE۱در نمونهصهای اگزوزومی مشخص گردید که بیان این ژن بین زیرگروه آلزایمریAD) - (Fullو کنترل، زیرگروه آلزایمریAD) - (Fullو پیشص-آلزایمریAD)- (Pre، زیرگروه پیشص-آلزایمریAD) - (Preو گروه کنترل معنی دار نمیصباشد .بررسی نشانگر زیستیAS - BACE۱در نمونهصهای پلاسمای انسانی حاکی از حساسیت ۹۸ و اختصاصیت ۱۰۰ این ژن در زیرگروه آلزایمریAD) - (Fullو کنترل میصباشد .همچنین این نشانگر زیستی بین زیرگروه آلزایمریAD) - (Fullو پیشص-آلزایمریAD) - (Preحساسیت ۹۹ و اختصاصیت ۱۰۰ نشان میصدهند .بین زیرگروه پیشص-آلزایمریAD) - (Preو کنترل حساسیت ۶۸ و اختصاصیت ۱۰۰ میصباشد .استدلالAS -: BACE۱یک نشانگر زیستی با قابلیت تفکیک بالای افراد آلزایمری از گروه کنترل، آلزایمری از گروه پیشص-آلزایمری و گروه پیشص-آلزایمری از گروه کنترل میصباشد
متن يادداشت
Introduction: The use of diagnostic agents to diagnose the onset of brain degeneracy, especially Alzheimer's disease, as well as the rate of progression of the disease to address the problems of clinical measurements and the provision of appropriate therapeutic treatment has become an essential requirement. The change in BACE1 transcript level is one of the most important causes of Alzheimer's disease, which is strongly controlled by BACE1-AS. Both of these factors have a significant increase in the cerebrospinal fluid of Alzheimer's patients, resulting in disturbances in the function of areas of the brain and causing disease. This increase can be used as a diagnostic factor for the detection of Alzheimer's disease. Due to the fact that most proteins and RNAs transfer through vesicle packs towards body fluids, it is possible that BACE1-AS also enters the bloodstream. The aim of this study was to detect the presence or absence of BACS1-AS lncRNA in blood serum of people with Alzheimer's disease. Also, with its confirmation in serum, it was compared in patients with non-Alzheimer's patients. Methods: For this purpose, blood samples were collected from 45 patients and 36 non-addicted patients. Total RNA was extracted. Plasma of blood samples were isolated and plasma RNA was extracted with TRIzol extraction solution. In the second part of the work, exosomes were purified from the plasma samples using Exoqiuck extraction solution. The exosome extraction was confirmed with SEM and DLS. Then, the RNAs of exosomes were isolated. To synthesize cDNA from the RNA of plasma and exosomal samples, the TaKaRa synthesis kits were used. With existing cDNAs, the primers of the BACE1-AS gene and the U6 gene (internal control) were evaluated in terms of temperature and assure the correct functioning of the primers. BACE1-AS gene expression was evaluated quantitatively using Qantiative Real-Time. Result: The presence of the BACE1-AS transcript was confirmed in plasma and exosomal specimens. BACE1-AS transcript expression level did not change between patient and control groups of plasma samples and exosomal samples extracted from human plasma. The expression level of BACE1-AS between Alzheimer's subgroup (Full-AD) and control (p <0.0001), Alzheimer subset (Full-AD) and pre-AD (p <0.0001) and Alzheimer subset (Pre-AD) ) And the control group (p <0.0001) was significant. The level of BACE1-AS transcript increases between Alzheimer's sub-group (Full-AD) and control. The expression level of BACE1-AS in the Alzheimer's subgroup (Full-AD) is higher than the pre-AD pre-Alzheimer's. However, the level of expression in the pre-AD subgroup is lower than that of the control group. By analyzing BACE1-AS transcriptase in exosomal samples, it was determined that expression of this gene between Alzheimer's subgroup (Full-AD) and control, Alzheimer's subset (Full-AD) and Pre-Alzheimer's (Pre-AD) subgroups - Alzheimer's (Pre-AD) and control group are not significant. The biomarker potency of BACE1-AS in human plasma samples showed a 98 sensitivity and 100 specificity of this gene in the Alzheimer's subtype (Full-AD) and control. Also, the biomarker potency of this gene indicates a sensitivity of 99 and a 100 specificity between the Alzheimer's subtype (Full-AD) and Alzheimer's pre-AD (Pre-AD). BACE1-AS shows the sensitivity is 68 and the specificity is 100 Between the pre-Alzheimer (pre-AD) subset and control. Discussion: BACE1-AS is a proper biomarker to differentiate Alzheimer's disease from the control group, Alzheimer's from the pre-Alzheimer group and the pre-Alzheimer's group from the control group
عنوان اصلی به زبان دیگر
عنوان اصلي به زبان ديگر
scrutiny toward the existence and level of BACE۱-AS lncRNA in blood serum samples of people with Alzheimers disease A
نام شخص به منزله سر شناسه - (مسئولیت معنوی درجه اول )