بررسی تاثیر ترکیب آکریل آمید بر فرایند پیری القا شده با H۲O۲ در رده سلولی فیبروبلاستی۳T۳ - NIH
نام نخستين پديدآور
/الهه مهدی زاده
وضعیت نشر و پخش و غیره
نام ناشر، پخش کننده و غيره
: علوم طبیعی
تاریخ نشرو بخش و غیره
، ۱۳۹۵
نام توليد کننده
، افشاری
یادداشتهای مربوط به نشر، بخش و غیره
متن يادداشت
چاپی
یادداشتهای مربوط به پایان نامه ها
جزئيات پايان نامه و نوع درجه آن
کارشناسی ارشد
نظم درجات
علوم جانوری
زمان اعطا مدرک
۱۳۹۵/۱۱/۲۰
کسي که مدرک را اعطا کرده
تبریز
یادداشتهای مربوط به خلاصه یا چکیده
متن يادداشت
پیری سلولی ناشی از گونه های فعال اکسیژن تولید شده توسط هیدروژن پراکسید، به طور بالقوه می تواند پیری زودرس در سلول های فیبروبلاست جنینی موش (NIH۳T۳) در محیط کشت سلولی در تحقیقات پیری القا کند .آکریل آمید به عنوان یک ماده شیمیایی و متابولیت آن گلایسید آمید باعث سمیت سلولی و آسیب به DNA و پروتئین در بدن می شوند .مطالعه حاضر به بررسی اثر اکریل آمید بر سمیت سلولی در غلظت های مختلف(۵ ،۲، ۱و ۱۰میلی مولار (می پردازد .سلول های فوق در محیط کشت سلولی کشت داده شده و تحت تاثیر غلظت های مذکور و) ۶۰۰) H۲O۲ Mقرار گرفتند .بعد از ۲۴ ساعت انکوباسیون سلول های زنده به وسیله تست MTT اندازه گیری شدند، سپس سطح فعالیت بتاگالاکتوزیداز مرتبط با پیری در سلول های NIH۳T۳ به وسیله روش الایزا، تشخیص داده شد .آپاپتوز و استرس اکسیداتیو در سلول ها به ترتیب توسط فلوسایتومتری و اندازه گیری کاسپاز ۳و ۹، تست مالون دی آلدئید، ظرفیت تام آنتی اکسیدانی، سطح گروه های تیول و سطح گونه های فعال اکسیژن ارزیابی شده است .ترکیب آکریل آمید باعث کاهش میزان حیات سلولی به صورت وابسته به غلظت شد .سلول ها در گروه شاهد بیش ترین میزان زنده بودن را نشان دادند .میزان سلول های زنده در گروه تحت تیمار با آکریل آمید در غلظت ۱۰ میلی مولار به طور قابل توجهی کاهش یافت .میزان فعالیت بتاگالاکتوزیداز مرتبط با پیری به طور قابل توجهی درگروه H۲O۲ و آکریل آمید در غلظت ۱۰ میلی مولار افزایش یافت .(۰۰۱/۰> P) نتایج نشان داده شده افزایش قابل توجهی در مارکرهای استرس اکسیداتیو مانند گونه های فعال اکسیژن (ROS) و پراکسیداسیون لیپیدی (LPO) و کاهش در ظرفیت آنتی اکسیدانی تام و گروه های تیول در سلول های۳T۳ - NIHتحت تیمار با غلظت ۱۰ میلی مولار آکریل آمید و H۲O۲ به مدت ۲۴ ساعت مشاهده شده است .( ۰۰۱/۰> P) همچنین، میزان آپاپتوز سلول ها توسط روش فلوسایتومتری نشان داد که آکریل آمید در غلظت ۱۰ میلی مولار و H۲O۲ در غلظت ۶۰۰ میکرومولار میزان سلول های آپاپتوز شده را افزایش داده اند .فعالیت کاسپاز ۳ و ۹ نیز در غلظت ۱۰ میلی مولار و H۲O۲ افزایش قابل توجهی داشت) به ترتیب ۰۱/۰>P و .( ۰۰۱/۰>P پیری سلولی در شرایط آزمایشگاهی می تواند به عنوان یک مدل مفید برای توضیح مکانیسم های مولکولی پیری موجود در نظر گرفته شود .نتایج مطالعه ما نشان داد که قرار گرفتن در معرض آکریل آمید، پیری سلولی را در سلول های جنینی فیبروبلاستی افزایش می دهد که ممکن است افزایش استرس اکسیداتیو و آسیب های سلولی نقش مهمی در سمیت ناشی از آکریل آمید ایفا کرده است
متن يادداشت
Cellular senescence induced by reactive oxygen species (ROS) production as H2O2 can potentially contribute to premature senescence of NIH/3T3 fibroblasts in cell culture for aging research. Acrylamide as a chemical and its metabolite glycidamide causes cell toxicity and damage to DNA and proteins in the body. The current study was designed to investigate the effect of acrylamide on cell cytotoxicity in various concentrations (1, 2, 5 and 10 mM .( NIH/3T3 fibroblasts were cultured and treated with indicated concentrations of acrylamide and 600 M H2O2. After 24 hours incubation, the viability of the cells evaluated by MTT assay, then the level (SA- gal) activity was assessed in NIH/3T3 cells. Apoptosis and oxidative stress in the cells, assessed by flow cytometry and caspase 3 and 9, malondialdehyde test, total antioxidant capacity, levels of thiol groups and reactive oxygen species respectively. Acrylamide compound caused a decrease in cell viability in a dose-dependent manner. Cells in the control group were shown maximum viability. The rate of live cells in the group which was treated by acrylamide in 10 mM has significantly declined and level senescence-associated beta-galactosidase activity was increased significantly in H2O2 and acrylamide in 10 mM concentration (p < 0.001). The results illustrated a considerable increase in oxidative stress markers such as reactive oxygen species (ROS) and lipid peroxidation (LPO) and a decline in total antioxidant capacity and thiol groups of NIH-3T3 which were treated by 10 mM acrylamide and H2O2 for 24 h (p < 0.001). Also, cell apoptosis investigation by flow cytometry showed that acrylamide in a concentration of 10 mM and H2O2 increased the rate of apoptotic cells. caspase 3 and 9 activity cells. Caspase 3 and 9 activity also had a significant increase in the concentration of 10 mM and H2O2 (respectively P<0/01 and P<0/001). The results of the present study clearly revealed that exposure to acrylamide could induce senescence in embryonic fibroblast that might attribute to the increased oxidative stress and cellular damage. Cellular senescence in vitro has been regarded as a useful model for explaining molecular mechanisms that underlie organismal aging
نام شخص به منزله سر شناسه - (مسئولیت معنوی درجه اول )