غربال برخی گونههای وحشی، تودههای بومی و ارقام تجاری گوجهفرنگی با روشهای مولکولی و مرسوم در برابر Meloidogyne javanica و بررسی خاموشی ژن ۱۶D۱۰ نماتد با استفاده از فنآوریRNAi
نام نخستين پديدآور
/شلاله مصلحی
وضعیت نشر و پخش و غیره
نام ناشر، پخش کننده و غيره
: کشاورزی
تاریخ نشرو بخش و غیره
، ۱۳۹۴
یادداشتهای مربوط به نشر، بخش و غیره
متن يادداشت
چاپی
یادداشتهای مربوط به پایان نامه ها
جزئيات پايان نامه و نوع درجه آن
کارشناسی ارشد
نظم درجات
بیماریشناسی گیاهی- نماتدشناسی گیاهی
زمان اعطا مدرک
۱۳۹۴/۰۹/۳۰
کسي که مدرک را اعطا کرده
تبریز
یادداشتهای مربوط به خلاصه یا چکیده
متن يادداشت
نماتدهای گره ریشه (.(Meloidogyne spp از نظر خسارت اقتصادی به محصولات کشاورزی، مهمترین گروه نماتدهای انگل گیاهی میباشند .به منظور بررسی تنوع آللی ژن مقاومت۱.۲- Mi، ۱۶ رقم تجاری، پنج توده محلی و سه گونه وحشی گوجهفرنگی) شامل چهار رسشمار (با استفاده از سه نشانگرMi۲۳ ، PMi۳ و REX مورد بررسی قرار گرفتند .واکنش ژنوتیپها در برابر مایهزنی با جمعیتی از M. javanica نیز در شرایط گلخانهای ارزیابی گردید .در شرایط آزمایشگاهی، از بین ارقام فوق، تاثیر سه رقم حساس(Super Chief ، Rio Grande و سی اچ فلات (و سه رقم مقاوم(ES۱۰۰۲ ، Pascal و Samrudhi) بر تفریخ تخم M. javanica مقایسه شد .همچنین فعالیت آنزیم پراکسیداز در ارقامSuper Chief ، سی اچ فلات، ES۱۰۰۲ و Pascal با اسپکتروفتومتری در ۴۷۰ نانومتر با استفاده از Guaiacol بهعنوان سوبسترا ارزیابی گردید .نتایج استفاده دو نشانگر اول و دوم، هفت ژنوتیپES۱۰۰۲ ،Pascal ،Samrudhi ،Super Beita ،Nun۶۱۰۸ ،۰۴ - Ant ۹۳و گونه وحشی با رسشمار LA۰۱۱۱ را بهعنوان مقاوم هتروزیگوت (Mi/mi) و سایر ژنوتیپها را بهعنوان حساس (mi/mi) مشخص نمود .نتایج حاصل از نشانگر REX نیز با وجود برخی نوسانها، تا حدودی نتایج دو نشانگر دیگر را تایید کرد .نتایج آزمایش گلخانهای نیز، با نتایج مولکولی همخوانی داشت و تجزیه خوشهای ژنوتیپها، با در نظر گرفتن صفات مربوط به تکثیر نماتد در ریشه گیاهان، هفت رقم مذکور را در یک گروه اصلی و ارقام حساس را در گروه دیگر قرار داد .از نظر تاثیر در تفریخ تخم، ارقام مقاوم و حساس تفاوتی با هم نداشتند، اما تراوههای ریشه گوجهفرنگی در مقایسه با آب خالص سبب تفریخ درصد بالاتری از تخمها گردید .مایهزنی گیاهان با نماتد در مقایسه با حالت بدون نماتد، باعث افزایش فعالیت آنزیم پراکسیداز در تمام ارقام شد .در ارقام مقاوم از روز دوم پس از مایهزنی، فعالیت آنزیم افزایش یافت و بیشترین فعالیت در روز پنجم ثبت گردید .اما در رقم حساس Super Chief از فعالیت آنزیم بعد از روز دوم کاسته شده و در رقم سی اچ فلات کاهش فعالیت آنزیم از روز مایهزنی به بعد مشاهده شد .برای انجام آزمونهای مربوط به خاموشی ژن ۱۶D۱۰ نماتد گره ریشه با روشRNAi ، قطعه ژن موردنظر در دو جهت سنس و آنتیسنی در داخل پلازمید pFGC۵۹۴۱ همسانهسازی گردید و ورود موفق قطعات سنس و آنتیسنس به داخل پلازمید با روشهای مختلف تایید و پلازمید نوترکیب، به باکتری Agrobacterium tumefaciens انتقال یافت .در آزمون شناورسازی بهمنظور بررسی مقدماتی کارآیی سازه RANi ایجاد شده، امکان خاموشی ژن ۱۶D۱۰ در نماتد گره ریشه و تاثیر آن در میزان آلودگی رقم حساس گوجهفرنگی) سی اچ فلات (تایید گردید .گیاهان مایهزنی شده با نماتدهایی که در آنها خاموشی ژن مذکور القا شده بود، از نظر صفات مربوط به تکثیر نماتد در ریشه گیاه در مقایسه با شاهد، آلودگی کمتری بروز دادند
متن يادداشت
04, Samrudhi, Nun 6108, Pascal and LA0111 accession) are heterozygot resistant (Mi/mi) and the others susceptible (mi/mi) genotypes. Despite of an ignorable difference, the REX marker resulted in the same pattern as seen with the two markers. In greenhouse experiments, the seven genotypes were less affected by the nematode while the rest figured as susceptible. So, the genotypes were clustered into a main group consisting of seven resistant genotypes and another group formed the susceptible ones. Concerning the effect on egg hatching of M. javanica, it was found that tomato root exudates were more effective compared to water, but no difference was realized between susceptible and resistant cultivars. Results of the enzyme assay, showed an increase in peroxidase activity in inoculated plants compared to controls. In resistant cultivars, the activity increased from second day after inoculation with the nematode and showed the maximum activity on fifth day. The activity of peroxidase in susceptible Super Chief cultivar revealed a decline from the second day onwards. In CH Falat cultivar a uniform reduction in the activity was recorded after inoculation. Regarding the silencing of nematode 16D10 parasitism gene via RNAi technique, the fragment of the gene was cloned in two sense and antisense directions into pFGC5941 vector. The recombinant plasmid was transformed into Agrobacterium tumefaiens. The soaking method was used to study on the efficiency of the RNAi construct, its impact on silencing of the 16D10 gene and the status of infection of the susceptible cultivar (CH Falat) against M. javanica. The plants treated with the nematodes that received the construct through the soaking method showed less infection indexed compared to controls. So, the gene silencing was confirmed-1.2 gene, 16 commercial cultivars, five landraces and for accessions of three wild species of tomatoes were screened using Mi23, PMi3 and REX markers. In addition, response of the genotypes was evaluated against a population of Meloidogyne javanica under greenhouse conditions. The impacts of three susceptible (Super Chief, Rio Grande and CH Falat) and three resistant (ES1002, Pascal and Samrudhi) cultivars were studied on egg hatching of the nematode. The effects of nematode infection on peroxidase activity of four cultivars including Super Chief, CH Falat, ES1002 and Pascal were also assayed using spectrophotometer at 470 nm and Guaiacol as substrate of the enzyme. The results of Mi23 and PMi3 markers, showed that the seven genotypes (ES1002, Super Beita, Ant 93-parasitic nematodes. For detection of allelic diversity of Mi-knot nematodes (Meloidogyne spp.) are the most economically important group of plant-Root
نام شخص به منزله سر شناسه - (مسئولیت معنوی درجه اول )