عنوان
پدید آورنده
موضوع
رده
کتابخانه
محل استقرار
شماره کتابشناسی ملی
شماره
۹۶۷۱۵پ
زبان اثر
زبان متن نوشتاري يا گفتاري و مانند آن
فارسی
زبان اثر اصلي
فارسی
عنوان و نام پديدآور
عنوان اصلي
بهینه سازی و رسانش نانو ذرات کیتوزان_ pDNA به سلول های یوکاریوت HEK۲۹۳T با استفاده از روش الکترواسپری و بررسی کارایی انتقال آن
نام عام مواد
[پایان نامه]
نام نخستين پديدآور
فرزانه سعیدی لندی
وضعیت نشر و پخش و غیره
نام ناشر، پخش کننده و غيره
دانشگاه علوم پزشكي تهران دانشكده پزشكي
تاریخ نشرو بخش و غیره
۱۳۹۹
مشخصات ظاهری
نام خاص و کميت اثر
۹۰ص.
ساير جزييات
جدول نمودار
مواد همراه اثر
سي دي
یادداشتهای مربوط به پایان نامه ها
جزئيات پايان نامه و نوع درجه آن
کارشناسی ارشد
نظم درجات
نانو فناوری پزشکی
امتياز متن
۱۸/۸۵
یادداشتهای مربوط به خلاصه یا چکیده
متن يادداشت
ژن درمانی روش درمانی نوین و جایگزینی برای درمان¬های قدیمی برای بیماری¬های ژنتیکی و سرطان است. در روند انتقال ژن به سلول به حاملی با کمترین سمیت و ایمنی¬زایی با بیشترین کارایی انتقال ژن نیاز است. حامل¬ها به دو نوع ویروسی وغیرویرسی تقسیم می¬شوند. معایبی چون احتمال ایجاد سرطان و ایمنی¬زایی حامل¬های ویروسی استفاده از آن¬ها را محدود کرده است. امروزه تلاش برای افزایش کارایی انتقال حامل¬های غیرویروسی است. این دسته حامل¬ها طیف وسیعی از جمله لیپیدهای کاتیونی، پلیمرهای کاتیونی، دندریمرها و نانوذرات را شامل می¬شود. پلیمرهای کاتیونی مانند کیتوزان به دلیل زیست سازگاری، سمیت بسیار پایین، ظرفیت بالای بارگذاری DNA، رهایش آهسته بسیار مورد توجه هستند. برای افزایش کارایی انتقال حامل کیتوزان راهکارهایی مانند کاهش اندازه آن به اندازه نانومتری پیشنهاد می¬شود.در مطالعه انجام شده از کیتوزان با وزن مولکولی kDa 100 به عنوان حاملی برای انتقال pDNA با وزن مولکولی bp 4700 استفاده شد، همچنین از روش الکترواسپری که یک روش نوین تهیه نانوذرات است به منظور تهیه نانوحامل و انتقال همزمان آن به درون سلول¬های یوکاریوت HEK293T استفاده شد. پژوهش حاضر در سه بخش تهیه pDNA و بررسی آن، تهیه نانوذرات حامل و تعیین ویژگی¬های آن¬ها و تهیه و انتقال نانوذرات به سلول و بررسی اثر برخی پارامترها بر انتقال ژن انجام شد. مرحله اول کشت باکتری و استخراج pDNA و بررسی کیفیت پلاسمید استخراج شده با روش ژل الکتروفورز و نانودراپ بود. سپس نانوذرات کیتوزان-pDNA با روش الکترواسپری تهیه شدند، پارامترهای دستگاهی الکترواسپری مانند جریان مایع ml/h 1، ولتاژ منبع kv 5/5، فاصله نازل تا جمع کننده cm 6 و ثابت در نظر گرفته شد. نانوذرات تهیه شده در سه غلظت طبق طراحی نرم افزار Box-Behnken تهیه شدند، قطر هیدرودینامیک نانوذرات به ترتیب در غلظت¬های pDNA، μg/ml 100 ،55 ،10 حدود nm 240 ،188 ،110 تعیین شد. لازم به ذکر است که در تمام غلظت¬ها N/P ثابت و حدود 5 در نظر گرفته شد. میزان EE نانوذرات حامل با سه بار تکرار حدود 85% و پتانسیل زتای آن¬ها حدود mv 25+ بود. محلول پلیمری با غلظت¬های ذکر شده بر روی سلول¬های کاشته شده در پلیت الکترواسپری شد، در این مرحله هم نانوذرات تهیه می-شدند و هم با اثر میدان الکتریکی ایجاد شده در روند الکترواسپری نانوذرات به داخل سلول منتقل می-شدند. با استفاده از نرم افزار پارامترهای موثر مانند غلظت حامل کیتوزان-pDNA، مدت زمان الکترواسپری بر سلول و مدت زمان انکوباسیون سلول¬ها پس از انتقال ژن بر روند انتقال ژن به روش الکترواسپری بررسی شدند. نمونه بهینه¬ای که بر طبق طراحی نرم افزار Box-Behnken با غلظت pDNA، μg/ml 86/52 مدت زمان الکترواسپری min 06/32 مدت زمان انکوباسیون سلولی پس از انتقال ژن day 09/4 محاسبه شد. پس انجام فرایند انتقال ژن با شرایط نمونه بهینه به روش الکترواسپری سلول¬ها با میکروسکوپ فلورسنس و به روش فلوسیتومتری بررسی شدند. درصد سلول¬های GFP مثبت پس از شمارش سلولی حدود 04/3 ± 05/41% به دست آمد. نتیجه حاصل شده با نتیجه پیش بینی شده توسط نرم افزار قابل انطباق است و در مقایسه با انتقال ژن به روش معمول کلسیم فسفات که حدود 4/2 ± 1/31% کارایی داشت نتیجه بهتری به دست آمد.
موضوع (اسم عام یاعبارت اسمی عام)
موضوع مستند نشده
انتقال ژن
موضوع مستند نشده
نانوذرات
موضوع مستند نشده
کیتوزان-pDNA
موضوع مستند نشده
الکترواسپری
نام شخص به منزله سر شناسه - (مسئولیت معنوی درجه اول )
کد نقش
، پديدآور
مستند نام اشخاص تاييد نشده
سعیدی لندی، فرزانه
نام شخص - ( مسئولیت معنوی درجه دوم )
کد نقش
، استاد راهنما
کد نقش
، استاد راهنما
کد نقش
، استاد مشاور
مستند نام اشخاص تاييد نشده
امانی، امیر
مستند نام اشخاص تاييد نشده
نگاهداری، بابک
مستند نام اشخاص تاييد نشده
فریدی مجیدی، رضا
شناسه افزوده (تنالگان)
عنصر شناسه اي
دانشگاه علوم پزشکی تهران دانشکده پزشکی
مبدا اصلی
کشور
ایران
سازمان
دانشگاه علوم پزشکی تهران دانشکده پزشکی
تاريخ عمليات
20221218
شماره دستیابی
شماره بازیابی
۲۱۳۵ف
داده هایی که از فرمت مبدا برگردانیده نشده است
شماره فيلد فرمت مبدا
دانشگاه علوم پزشکی تهران کتابخانه دانشکده پزشکی
وضعیت انتشار
فرمت انتشار
p
اطلاعات رکورد کتابشناسی
نوع ماده
TF
کد کاربرگه
92029
اطلاعات دسترسی رکورد
سطح دسترسي
a
تكميل شده
Y
