ارزیابی الگوی نواری برخی آنزیمصهای آنتیصاکسیدان در رازیانه تحت تیمار تنش اسمزی و تیمار خارجی با اسید جاسمونیک
First Statement of Responsibility
/گلاله عجمی
.PUBLICATION, DISTRIBUTION, ETC
Name of Publisher, Distributor, etc.
: کشاورزی
Date of Publication, Distribution, etc.
، ۱۳۹۶
Name of Manufacturer
، افشاری
NOTES PERTAINING TO PUBLICATION, DISTRIBUTION, ETC.
Text of Note
چاپی
DISSERTATION (THESIS) NOTE
Dissertation or thesis details and type of degree
کارشناسی ارشد
Discipline of degree
بیوتکنولوژی کشاورزی
Date of degree
۱۳۹۶/۰۶/۱۵
Body granting the degree
تبریز
SUMMARY OR ABSTRACT
Text of Note
رازیانه از مهمترین و پرمصرفصترین گیاهان دارویی میصباشد، این گیاه بومی نواحی مدیترانه است و در اکثر نقاط جهان کشت می-شود .امروزه به دلیل اثرات ثانویه داروهای شیمیایی، تقاضای جهانی برای گیاهان دارویی افزایش یافته است .در این پژوهش سه اکوتیپ رازیانه با منشأ ایران، ترکیه و آلمان با استفاده از آزمایش فاکتوریل در قالب طرح پایه کاملا تصادفی در پنج تکراردر شرایط گلدانی در مزرعه مورد مطالعه قرار گرفت .سه فاکتوراکوتیپ، تنش اسمزی ایجاد شده با پلیصاتیلنصگلیکول و تیمار با اسید جاسمونیک بر روی بوتهصهای رازیانه مطالعه گردید .الگوی نواری سه آنزیم سوپراکسیددیسموتاز(SOD)، پراکسیداز (POX)و کاتالاز (CAT) در بافت سبز گیاه بالغ پس از اعمال دو فاکتور تنش اسمزی و تیمار با اسیدجاسمونیک در دو نوبت یعنی ۲۴ ساعت و یک هفته مورد بررسی قرار گرفت .فاکتور تنش اسمزی حاصل از پلیصاتیلنصگلیکول۶۰۰۰) - (PEGشامل دو سطح صفر و۶۶/۰ - مگاپاسکال و فاکتور دیگر شامل تیمار با دو سطح صفر و ۲/۰ میلیصمولار اسیدجاسمونیک بود .علاوه بر بررسی الگوی ایزوزیمی، برخی صفات مورفولوژیکی در سه اکوتیپ رازیانه اندازهصگیری شد .صفات مورفولوژیک مورد اندازهصگیری عبارت بودند از :زمان گلدهی، قطر ساقه، تعداد ساقه در بوته و ارتفاع بوته .بررسی فعالیت ایزوزیمصهای بافت سبز رازیانه با انجام الکتروفورز در ژل-های پلی آکریلامید ۸ انجام گرفت .فعالیت آنزیمی نوارهای حاصل با استفاده از نرمصافزار MCID پس از تصویربرداری از ژلصهای رنگصآمیزیصشده به صورت کمی در آمد و تجزیه آماری دادهصها نشان داد که ۲۴ ساعت پس از اعمال تیمارها فعالیت POX۱ و POX۲ در اکوتیپ رازیانه با منشاء آلمان به شکل معنی داری از اکوتیپصهای دیگر بیشتر است و تنش اسمزی موجب گردید که فعالیت POX۱ به شکل معنی داری افزایش یابد ولی فعالیت CAT کاهش پیدا کند و فعالیت POX۲ بدون تغییر بماند .فعالیت دو ایزوزیم پراکسیداز در شرایط تنش تحت تاثیر اسید جاسمونیک قرار گرفت و کاهش پیدا کرد در حالی که در شرایط نرمال فعالیت آنها به شکل معنیصدار بیشتر بود .بررسی فعالیت ایزوزیمصهای SOD بعد از ۲۴ ساعت در اکوتیپ خروسلری نشان داد که فقط SOD۳ تحت تاثیراسید جاسمونیک و SOD۲ برای اثر متقابل تنش اسمزی اسید جاسمونیک تغییر فعالیت نشان داده بطوری که تیمار با اسیدجاسمونیک در شرایط بدون تنش موجب کاهش و در شرایط اسمزی موجب افزایش معنیصدار فعالیت SOD۲ و SOD۳ شد .بررسی فعالیت شش ایزوزیم آنتیصاکسیدان پس از یک هفته اعمال تیمارها نشان داد بین اکوتیپ های رازیانه در دو ایزوزیم SOD۲ و POX۱ اختلاف معنیصدار وجود دارد تنش اسمزی برای SOD۲ ،SOD۳ و POX۲ اثر معنیصدار داشت با اسیدجاسمونیک فقط در دو ایزوزیم SOD اثر معنیصدار گذاشت .با وجود این اثر اسیدجاسمونیکص در دو شرایط نرمال و تنش برای برخی ایزوزیمصهای SOD و POX یکسان نبود .هیچکدام از تیمارها یا اثر متقابل آنها در فعالیت CAT اثر معنیصدار نگذاشتند .این میصتواند حاکی از این واقعیت باشد که آنزیم CAT پس از یک هفته آبیاری نرمال و رفع تنش فعالیت عادی خود را بازیابی کرده است .در بررسی صفات مرفولوژیکی نتایج حاکی از این بود که اختلاف سه اکوتیپ رازیانه از لحاظ ارتفاع بوته و زمان گلدهی معنیصدار بود در حالی که از لحاظ قطر ساقه و تعداد ساقه در بوته بین اکوتیپصها اختلاف معنی داری مشاهده نشد .اثر تنش اسمزی در کلی صفات فوق بجز قطر ساقه معنیصدار بدست آمد .در حالی که اثر اسیدجاسمونیک فقط در زمان گلدهی معنیصدار گردید
Text of Note
jasmonic acid interaction, so that the treatment with jasmonic acid in normal conditions reduced and in osmotic conditions caused significant increases in SOD2 and SOD3 activity. Analysis of the activity of six antioxidant isozymes after one week of treatment displayed that there was a significant difference between fennel ecotypes in two SOD2 and POX1 isozymes. Study of SOD isozymes activity after 24 hours in the khoroslary ecotype showed that only SOD3 under the influence of Jasmonic acid was significantly changed, and SOD2 activity was changed significant for interaction of osmotic stress by jasmonic acid , so that the treatment with jasmonic acid in control conditions decreased and in osmotic stress conditions significantly increase SOD2 and SOD3 activities. Analysis of the activity of six antioxidant isozymes after one week of treatment showed that there is a significant difference between fennel ecotypes in two SOD2 and POX1 isozymes. Osmotic stress for SOD2, SOD3 and POX2 with jasomonic acid was significant only in two SOD isozymes. However, the effect of jasmonic acid in two normal and stress conditions were not the same for some SOD and POX isozymes. None of the treatments or their interaction in the CAT activity did not show a significant effect. This could be indicative of the fact that the CAT enzyme has recovered its normal activity after a normal irrigation period. In the study of morphological traits, results showed that the differences between the three fennel ecotypes were significant in plant height and flowering time characters, while there were no significant differences between stem diameter and number of stems per plant between ecotypes. The effect of osmotic stress in all traits except stem diameter was significant. While the effect of jasmonic acid was significant only at flowering time Fennel is one of the most important and most widely used medicinal plants. It is native to the Mediterranean and is cultivated in most parts of the world. Due to the secondary effects of chemical drugs, global demand for medicinal plants has increased. In this study, three fennel ecotypes with origin of Iran, Turkey and Germany were studied using a factorial experiment with completely randomized design and five replications of potted conditions in the field. Two type of factors, osmotic stress induced by polyethylene glycol and treatment with jasmonic acid on three fennel ecotypes were studied. The banding pattern of superoxide dismutase (SOD), peroxidase (POX) and catalase (CAT) enzymes in adult green tissue was investigated after applying two factors of osmotic stress and jasmonic acid in two time, 24 hours and one week after treatment. The osmotic stress included by PEG-6000 had two levels (0 and -0.68 Mpa), and another factor included two levels of 0 and 0.2 mM of jasmonic acid. In addition, some morphological traits were also measured in three fennel ecotypes. The stem diameter, number of stems per plant and plant height characteristics were measured at the flowering stage. The ensymatic activity of green tissues was investigated by electrophoresis in 8 polyacrylamide gels. The enzymatic activity was estimated quantitatively by using MCID software. Statistical analysis of the data showed that, 24 hours after applying of treatments, the activity of POX1 and POX2 in the German ecotypes showed significantly greater differences than other ecotypes, and osmotic stress caused increasing of the POX1 activity significantly, but CAT activity decreasd and POX2 activity remained unchanged. The activity of two isozyme peroxidase under stress condition was affected by jasmine acid and decreased significantly while in normal conditions, their activity was significantly higher. Study of SOD isozymes activity after 24 hours in the khorosolary ecotype showed that only SOD3 under the effect of jasmonic acid and SOD2 showed a change in activity for osmotic stress