اثر تنظیم کنندههای رشدی و ترکیبات آلی بر کالوس زایی و باززایی گندم(.(Triticum aestivum L ، با استفاده از جنینص بالغ
First Statement of Responsibility
/سید مهدی اسحاقی
.PUBLICATION, DISTRIBUTION, ETC
Name of Publisher, Distributor, etc.
: کشاورزی
Date of Publication, Distribution, etc.
، ۱۳۹۵
Name of Manufacturer
، راشدی
NOTES PERTAINING TO PUBLICATION, DISTRIBUTION, ETC.
Text of Note
چاپی
DISSERTATION (THESIS) NOTE
Dissertation or thesis details and type of degree
کارشناسی ارشد
Discipline of degree
بیوتکنولوژی کشاورزی
Date of degree
۱۳۹۵/۰۶/۰۷
Body granting the degree
تبریز
SUMMARY OR ABSTRACT
Text of Note
در سالصهای اخیر تولید گندم به دلیل تشدید تنشصهای زنده و غیر زنده متعدد کاهش یافته است .از این رو تولید ارقام گندم سازگار به تنشصهای متعدد زنده و غیر زنده یک ضرورت در اصلاح گندم میصباشد .مهندسی ژنتیک یک ابزار قدرتمندی است که در بهبود محصول و مطالعات بیولوژی مولکولی غلات مثل گندم، برنج و ذرت به طور گسترده استفاده میصشود .با این حال انتقال ژن به گندم در مقایسه با برنج و ذرت به خاطر پایین بودن میزان باززایی آن چندان پیشرفتی نداشته است .در اکثر روشصهای تراریختی استفاده از کشت بافت برای باززایی گیاهان تراریخته امری ضروری میصباشد .برای بررسی اثر تنظیم کنندهصهای رشدی و ترکیبات آلی بر کالوسصزایی و باززایی گندم، بذر چهار رقم از ارقام زراعی گندم شامل افلاک، گنبد، گاسگوژن و پیشگام که قبلا گزینش شده اند ضدعفونی سطحی شد و سپس جنین بالغ آنها در هود استریل توسط اسکالپل جداسازی شدند و در محیط کشت پایه MS تکمیل شده با ۳۰ ساکارز و ۵/۷ میلیصگرم در لیتر آگار و با تیمارهای مختلفD- ۲,۴،NAA ، دیکامبا، ترکیب۲,۴ - Dبا NAA و ترکیب۲,۴ - Dبا دیکامبا برای القای کالوس قرار داده شدند .پس از شش هفته درصد کالوسصزایی، وزن تر کالوسصهای تولید شده و کیفیت کالوسصها برای هر کدام از ارقام مورد ارزیابی قرار گرفت .برای باززایی از محیط کشت MS تکمیل شده با تیمارهای مختلف تیدیازورون، BAP، ترکیب تیدیازورون با BAP و بدون تنطیم کنندهصهای رشد گیاهی استفاده شد .در آزمایش دیگر با استفاده از سه رقم برتر حاصل از آزمایشات فوق اثر عصاره مخمر، کازئین هیدرولیز شده و تریپتون در بهبود کالوسصزایی و باززایی گندم مورد ارزیابی قرار گرفت .برای هر کدام از آزمایشات کالوسصزایی و باززایی از سه پتری دیش هر کدام با هشت ریزنمونه به عنوان تکرار استفاده شد و در طرحصهای آزمایشی در قالب طرح کاملا تصادفی پیاده و آنالیز شد .نتایج بدست آمده با استفاده از نرمصافزار MSTAS مورد آنالیز قرار گرفت و مقایسات میانگین با آزمون دانکن انجام شد .با توجه به نتایج دادهصها، رقم پیشگام بیشترین میزان کالوسصزایی را در بین ارقام گندم را داشت و تنظیم کننده رشدی دیکامبا بیشترین تاثیر را در کالوسصزایی گندم داشت .با توجه به نتایج تجزیه واریانس دادهصهای باززایی در بین تنظیم کنندهصهای رشد باززایی تفاوت معنیصداری در باززایی وجود نداشت .به منظور بهبود کالوسصزایی و باززایی جنینصهای رسیده گندم از ترکیبات آلی استفاده شد و با توجه به نتایج مشخص شد که کازئین هیرولیز شده بیشترین تاثیر را در کالوسصزایی گندم داشت و تریپتون نیز بیشترین تاثیر را در میزان شاخهصزایی را داشت
Text of Note
Wheat production has reduced in recent years due to biotic and abiotic stresses. Hence breeding wheat to resistance for various abiotic and biotic stresses is a essential strategy. Genetic engineering is a widely-applied powerful tool to molecular improve of cereals such as wheat, rice and corn. Most plant transformation methods, based on tissue culture and reliable regeneration protocol. Aim of this project was investigation of effect of plant growth regulatory and organic material on wheat regeneration. Seeds of four cultivars of wheat including Aflak, Gonbad, Kaskogen, and Pishgam Were superficially sterilized, then the mature embryos were isolated by scalpel in a sterile hood, and placed in MS mediums supplemented with 30 sucrose and 7.5 mg per liter agar and with different combination of 2,4-D, NAA and Dicamba in factorial experiment based on completly randomized design with three repeats. After six weeks, callus induction percentage, fresh weight of calli and their quality were evaluated for each treatment. MS mediums supplemented with different treatments of Thidiazuron and BAP, were tested for regeneration. In another experiment, three superior cultivars from the firest experiment were used to evaluate the effect of Yeast extract, Casein Hydrolyzate, and Tryptone in improvement of callus induction and regeneration of wheat. The data were analyzed using MSTATC and mean comparisons were performed using Duncan's multiple range test. According to the results, Pishgam had the highest callus induction, and Dicamba had the greatest effect on wheat callus induction. According to the results there were no significant differences among regeneration treatments Organic compounds were used in order to improve callus induction and regeneration of mature wheat embryos, and the results showed that 3 g/l Hydrolyzed Casein had the greatest effect on wheat callus induction and 5 g/l Tryptone had the highest effect on shoot regeneration