انتخاب قطعه پپتیدی دارای تمایل به پروتئین های هیدروفیل با روش نمایش فاژی به منظور استفاده در خالص سازی پروتئین ها
General Material Designation
[پایان نامه]
First Statement of Responsibility
محسن دانایی فر
.PUBLICATION, DISTRIBUTION, ETC
Name of Publisher, Distributor, etc.
دانشگاه علوم پزشکی تهران، دانشکده پزشکی
Date of Publication, Distribution, etc.
۱۴۰۱
PHYSICAL DESCRIPTION
Specific Material Designation and Extent of Item
۱۶۰ص.
DISSERTATION (THESIS) NOTE
Dissertation or thesis details and type of degree
دکتری تخصصی(PHD)
Discipline of degree
زیست فناوری پزشکی
Date of degree
۱۴۰۱/۰۱/۳۱
SUMMARY OR ABSTRACT
Text of Note
در زمینه تولید پروتئین های نوترکیب، فرآیندهای پائین دستی، علی الخصوص خالص سازی پروتئین نقش بسیار مهمی را ایفا می کنند و می توان این مرحله را پرهزینه ترین مرحله تولید پروتئین¬های نوترکیب بشمار آورد. یکی از راهکارهای خالص¬سازی پروتئین های نوترکیب، استفاده از کروماتوگرافی تمایلی است که مبتنی بر استفاده از قطعه تمایلی متصل به پروتئین و لیگاند آن بر روی بستر ستون کروماتوگرافی می¬باشد. مدول اتصالی به کربوهیدرات 64 در سال 2011 کشف گردیده و نشان داده شد که این مدول بصورت کارآمدی به طیف وسیعی از مواد سلولزی اتصال پیدا می¬کند. در مطالعه حاضر خالص¬سازی پروتئین با استفاده از کرایوژل مونولیت سلولز به عنوان بستر اتصالی انجام پذیرفت. داربست پلی آکریلامید به همراه ذرات نانوکریستالین سلولزی که در آن محبوس شدند ساختار اصلی مونولیت را تشکیل داده و از پروتئین PD1 به عنوان پروتئین مدل استفاده شد. ستون مونولیت ساخته شده ساختاری منفذدار داشته که قطر منافذ بصورت متوسط 30 میکرومتر بوده است. حداکثر ظرفیت جذب ستون مونولیت ساخته شده 497 میکروگرم به ازای هر گرم از ستون بود. کاست ژنی CBM64-Intein-PD1 سنتز و در باکتری اشیرشیاکولی کلون شد. توالی اینتئین به منظور القای خودبرشی در کاست گنجانده شد تا پس از اتصال مدول اتصالی به کربوهیدرات، مکانیسم را فعال کرده و پروتئین مدل PD1 از سازه متصل به سلولز جدا شده و جمع آوری گردد. بازده این روش خالص¬سازی 84 درصد بود که در مقایسه با 89 درصد خالص سازی با تگ هیستیدینی، مقدار کمتری را نمایش می¬دهد.