استفاده از سیستمCRISPR_Cas ۹ برای ایجاد برش در بالادست ژن گاما-گلوبین به منظور ایجاد سلول مدلK۵۶۲ با GFP جایگزین گاما-گلوبین
نام عام مواد
[پایاننامه]
عنوان اصلي به زبان ديگر
Use of CRISPR_Cas9 system for cutting upstream Gamma-globin gene to create a model of K562 cells by GFP Gamma-globin gene instead
وضعیت نشر و پخش و غیره
نام ناشر، پخش کننده و غيره
علوم بهزیستی و توانبخشی University of Social Welfare and Rehabilitation Sciences
تاریخ نشرو بخش و غیره
، ۱۳۹۵
مشخصات ظاهری
نام خاص و کميت اثر
ه،۹۳ص.
یادداشتهای مربوط به نشر، بخش و غیره
متن يادداشت
چاپی
یادداشتهای مربوط به پایان نامه ها
جزئيات پايان نامه و نوع درجه آن
کارشناسی ارشد
نظم درجات
ژنتیک Genetics
زمان اعطا مدرک
۱۳۹۵/۰۴/۲۷
کسي که مدرک را اعطا کرده
علوم بهزیستی و توانبخشی University of Social Welfare and Rehabilitation Sciences
یادداشتهای مربوط به خلاصه یا چکیده
متن يادداشت
در دهه گذشته یک پیشرفت بزرگی در زمینه مهندسی ژنتیک هدفمند به وجود آمد .تکنولوژی هایی از قبیل ZFNs و TALENs طراحی شدند که برای تعدیل ژنوم در مدلهای ارگانیسمی متفاوتی از زبرافیش تا پستانداران به کار رفتند .اخیرا با کشف سیستم کریسپر نوع دو که به طور کلی یک مکانیسم دفاعی در برابر ویروسها و DNA بیگانه در باکتری استرپتوکوکوس پیوژنز میباشد ،یک ابزار دیگری برای مهندسی ژنتیک هدفمند فراهم شد .مزیت این سیستم استفاده از RNA های کوچک یا همان guide RNA و ایجاد شکست در توالی های خاصی از DNA میباشد .همانند دیگر روش های نوکلئازی مانند ZFNs وTALENs،Cas ۹ میتواند باعث ایجاد شکست در توالی های خاصی از DNA هدف در لکوس خاص مورد نظر در ژنوم پستانداران و تحریک ویرایش ژنوم از طریق NHEJ یا HDRشودCas .۹ چندین مزیت بالقوه نسبت به ZFNs وTALENs ، از جمله سهولت در سفارش آماده سازی، بازدهی و راندمان بالاتر و توانایی برای تسهیل ویرایش ژنومی چندگانه، دارد .برای knockin کردن راههای متفاوتی وجود دارد که به دلیل مزیتهایCas ۹ CRISPR نسبت به سایر تکنیک های ویرایش ژنوم این مطالعه انجام شد.هدف از این مطالعه بررسی عملکرد و استفاده از سیستمCas ۹ CRISPR برای knockin کردن GFP در رده سلولیK ۵۶۲ میباشد.نتایج حاصل از این مطالعه نشان دهندهی عملکرد سیستمCas ۹ CRISPR میباشد.اطلاعات ما همچنین روش PAGE را به عنوان یک ابزار مفید برای نشان دادن جهشهای ایندل ایجاد شده با استفاده از سیستمCas ۹ CRISPR معرفی مینماید .و پیشنهاد میکند که با جایگزین کردن GFP از طریق نوترکیبی همولوگ با واسطه سیستمCRISPR_Cas ۹ به ژن گاماگلوبین در سلولK ۵۶۲ میتوان یک سلول مدل بدست آورد، که این سلول مدل، برای غربالگری با بازدهی بالا، برای ترکیبات القاکننده گاما گلوبین استفاده میشود .کلمات کلیدی :ژن گاماگلوبین ،Cas ۹ CRISPR ، knockin GFP ، رده سلولیK ۵۶۲
متن يادداشت
In the past decade, there was a major advance in the field of targeted genetic engineering. Technologies were designed to modify the genome into different organism models from mammals to Zebrafish such as ZFNs and TALENs. Most recently, a tool was provided for targeted genetic engineering by the discovery of two crisper system that generally is a defense mechanism against viruses and alien DNA in Streptococcus pyogenes bacteria. The advantage of this system, using the guide RNA and make breaks in specific sequences of DNA. Like other methods, such as nucleases ZFNs and TALENs, Cas9 can cause break in specific sequences of DNA from target specific locus in mammalian genomes and genome editing stimulation by the NHEJ or HDR. Cas9 has several potential advantages compared to the ZFNs and TALENs, including ease of preparation in order, efficiency, high-throughput and ability to facilitate multiple editing genomic. There are different ways to knockin. This study was conducted because Cas9- CRISPR advantages over other techniques genome editing. The aim of this study is evaluated the function and application of systems Cas9- CRISPR, to knockin GFP in K562 cell line. The results of this study show Cas9- CRISPR system function. According to our information, PAGE is useful tool for showing mutations indel that created by Cas9- CRISPR system. And suggests that by replacing GFP to gamma globin gene in K562 cells via homologous recombination with CRISPR_Cas9 system, can be derived model cell. This model cell can be used for high efficiency screening gamma globin inducer compounds. Keywords: Gamma globin gene, CRISPR_Cas9 system, knockin GFP, K562 cell line
خط فهرستنویسی و خط اصلی شناسه
ba
عنوان اصلی به زبان دیگر
عنوان اصلي به زبان ديگر
Use of CRISPR_Cas9 system for cutting upstream Gamma-globin gene to create a model of K562 cells by GFP Gamma-globin gene instead
موضوع (اسم عام یاعبارت اسمی عام)
موضوع مستند نشده
Gamma globin gene
مقوله موضوعی
متن عنصر شناسه ای مقوله موضوعی
ژن گاماگلوبین
متن عنصر شناسه ای مقوله موضوعی
Gamma globin gene
نام شخص به منزله سر شناسه - (مسئولیت معنوی درجه اول )