تشخیص سرولوژیک کیست هیداتیک گوسفندی با استفاده از آنتی ژنهای پروتواسکولکس و مایع کیست
/پیام صادقی
: دامپزشکی
، بهمن ۹۳
چاپی
کارشناسی ارشد
انگلشناسی
۱۳۹۳/۱۱/۲۵
تبریز
بیماری کیست هیداتیک یکی از مهمترین زئونوزهای انگلی است که در مناطق مختلف دنیا از جمله ایـران شـیوع دارد .استفاده از روش های سرولوژیکی که بتواند بـا حساسـیت و ویژگـی بـالایـی در تشـخیص هیداتیـدوز بکـار رود ارزشـمندمی باشد .از این رو در این پژوهش ، آنتی ژن مایع کیست و آنتی ژن پروتو اسکولکس بعنوان دو آنتی ژن اختصاصی انگـل، تخلـیص شـده وسپس با تستهای ایمونو بلاتینگ با سرم گوسفندان هیداتیدوزی و غیر هیداتیدوزی مورد ارزیابی قرار گرفته است تا حساسیت این دوآنتی ژن با این روش معرفی گردد .در این بررسی در روشPAGE - SDSآنتی ژن خام مایع کیست به چندین باند با وزن مولکولی از ۲۵ تا ۸۵ کیلو دالتون و آنتی ژن استخراج شده از پروتواسکولکس به دو باند پروتئینی مشخص با وزن مولکولی حدود ۵۰ و ۲۲ کیلو دالتون شکسته شد .به منظور تعیین ارزش هریک از آنتی زنها جهت تشخیص کیست هیداتیک گوسفندی آزمایش وسترن بلات انجام شد .در این آزمایش آنتی ژن خام مایع کیست هیداتیک در واکنش با سرم گوسفندان آلوده به کیست هیداتیک باندهای متعدد از حدود ۲۰ تا ۴۰ کیلو دالتون و آنتی ژن استخراج شده از پروتواسکولکس دو باند مشخص حدود ۲۵ و ۲۶ کیلو دالتون تشکیل داد .و هیچ یک از آنتی زنهای نامبرده با سرم منفی) سرم گوسفندان غیر آلوده به کیست هیداتیک (واکنش مثبت کاذب ندادند
Hydatidosis, a disease caused by the cestod helminth echinococcus granulosus, is one of the most important parasitic zoonosis in man and a variety of animals. Sensitive and reliable serologic methods are necessary to confirm the diagnosis. In this study, Hydatid fluid crude antigen and Protoscolex antigens were purified as two specific parasitic antigens and evaluated by Immunoblotting used on the serum of hydatidosis patients and control group in order to identify the most sensitive and specific subunits. In the SDS-PAGE, Cyst fluid ingredients was broken down into several bands of 25 to 85 kDa molecular weights and The PSC Ag was also broken down into 2 bands with molecular weights of 50 and 22 KDa. The immunoblotting (western blotting) test was performed in order to determine the diagnostic value of each of the Antigens in the cyst fluid and PSC Ag of hydatid cyst in diagnosis of hydatidosis.Crude antigens of cyst fluid had positive reactin in various bands of 20 to 40 kDa with positive sera samples (serum of sheeps with hydatid cyst) and PSC Ag had positive reactin in two bands of 25 and 26 kDa with positive sera samples. Niether cyst fluid Ags nor PSC Ag had no false positive reactions with the control sera samples.