تعیین میزان آلودگی به بابزیا بیژمینا در گاو به روش PCR در منطقه ارومیه
سامان دلیر
دامپزشکی
۱۳۹۸
۶۰ص.
سی دی
کارشناسی ارشد
انگل شناسی گرايش دامپزشکی
۱۳۹۸/۱۱/۲۰
بابزیوزیس يکي از بيماريهاي تک ياخته خوني در گاو بوده که سبب مرگ و مير بالا میشود. در طي اين بررسي در فصل گرما از 100 راس گاوهای مبتلا به بيماري بابزيوز و همچنين به ظاهر سالم ، خونگيري از وريد مارژينال حيوان انجام شده و از نمونه هاي خوني اسمير تهيه شده و با استفاده از روش گيمسا رنگ آميزي شد و در زير ميکروسکپ نوري در 100 شان ميکروسکپي موجود در هر لام به مشاهده و تشخيص انگل پرداخته شد. سپس استخراج DNA از خون انجام يافته سپس کيفيت آن براساس جداسازي و الکتروفورز آن بر روي ژل آگاروز 1% مورد ارزیابی قرار گرفت و برای به دست آوردن دمای Anneling Time در PCR از روش گرادیانت(Gradient) استفاده شد که در نتیجه آن دمای 56 درجه سانتیگراد مناسبترین دما برای PCR حاصل شد . سپس از يک زوج پرايمر اختصاصي بابزیا بيژمينا که از ژن هدف s rRNA18 طراحي شده است برای PCR استفاده شده و پس از PCR یازده نمونه مثبت از بابزیا بیژمینا مشهود گردید که نشان می¬دهد %11 گاوهای اطراف ارومیه به این تک یاخته آلوده¬اند. نتایج این بررسی نشان دهنده کارایی بالای روش مولکولی نسبت به روش معمولی رنگ آمیزی برای تشخیص بابزیا میباشد. همچنین نتایج این بررسی حاکی از میزان نسبتا پایین آلودگی به بابزیا در گاوان منطقه می باشد.
AbstractBovine babesiosis caused by Babesia bigemina is a tick-borne disease of great importance in tropical and subtropical regions of the world. The diagnosis of babesiosis is usually carried out by blood smear staining technique, which is not sufficiently sensitive to detect the piroplasms in the carrier animals. The aim of this study was comparison of efficacy of routine microscopic and PCR methods for diagnosing of theileriosis. In this study a total of 100 blood samples were collected from cattle in Urmia district in summer 2019. Samples were detected by Giemsa staining and microscopic observation. Also samples were detected by PCR method based on using the specific primers planed 18srRNA gene. In microscopic method any positive sample is not seen. However, the PCR detected 11 samples (11 %) positive for Babesia bigemina. Our study suggests that the PCR based screening is more sensitive and accurate method for diagnosis of bovine babesiosis and infestation rate to babesiosis in cattle of Urmia district is low.
Survey on bovin babesiosis in Urmia by using blood smear and comparision with PCR