تاثیر افزودن آنتی اکسیدانصهای گلوتاتیون احیا شده و سوپراکسید دیسموتاز بر فرآیند انجماد-یخصگشائی منی گاو هلشتاین
/رستگار الفتی کرجی
: کشاورزی
۱۲۰ص
چاپی
بصورت زیرنویس
کارشناسی ارشد
علوم دامی - فیزیولوژی دام
۱۳۹۱/۰۶/۲۵
تبریز
فرآیند انجماد منی با افزایش سطح انواع اکسیژن فعال نقش تعیین کنندهصای بر روی اندامکصهای) غشاء سلولی، میتوکندریصها و DNA) سلولی اسپرم دارد .غشاء اسپرم پستانداران سرشار از اسیدهای چرب غیر اشباع است که نسبت به آسیب به وجود آمده توسط انواع اکسین فعال (ROS) در نتیجه پراکسیداسیون چربیصها بسیار حساس میصباشد .استفاده از آنتیصاکسیدان مناسب در رقیقصکنندهصهای منی میصتواند سطح ROS را کاهش دهد .هدف از این تحقیق تعیین تاثیر غلظتصهای مختلف گلوتاتیون احیا شده (GSH) و سوپراکسید دیسموتاز (SOD) به عنوان تیمارهای تنها و یا سطوح ترکیبی آنها(GSH SOD)در رقیقصکننده انجماد بر روی کیفیت اسپرم یخصگشائی شدهص گاو نر بود .در این مطالعه ۴ راس گاو نر سالم۵ - ۴ ساله به کار گرفته شد .مجموع ۲۰ انزال (۵ انزال برای هر گاو نر (جمعصآوری و در هر تکرار مخلوط شد .نمونهصهای منی در رقیقصکننده پایه تریس- زرده تخم مرغ رقیق شدند .تیمارهای این مطالعه در سه آزمایش اعمال شدند ۱) GSH (mM ۵ : و۵/۷) ، ۲) SOD (IU/ml ۱۰۰ و ۱۵۰) و۳) GSH ) SOD IU/ml mM) ۱۰۰ ۵ ، ۱۰۰ ۵/۷ ، ۱۵۰ ۵ و ۱۵۰ ۵/۷) و یک رقیق کنده بدون افزودنی) شاهد (برای تمام آزمایشات .سپس نمونهصهای منی درطی ۲ ساعت تا ۵ Cسرد شده و در پایوتصهای ml ۵/۰فرانسوی منجمد شدند .تحرکصکل و تحرکصپیشرونده توسط آنالیزگر کامپیوتری منی(CASA) ، درصد زندهصمانی توسط رنگصآمیزی ائوزین- نیگروزین و نرخ پاسخ مثبت به تست تورم در محیط هیپواسموزی (HOST) در ساعت صفر و ۲ انکوباسیون پس از یخصگشائی نمونهصها مورد ارزیابی قرار گرفتند .تستصهای بیوشیمیایی تعیین سطح مالونال دیصآلدئید(MDA) ، فعالیت آندژنوسی آنزیمصهای SOD و گلوتاتیون پراکسیداز، در زمان اولیه پس از یخصگشائی نمونهصها مورد سنجش قرار گرفتند .نتایج تمام آزمایشات ما در مطالعه حاضر نشان داد که افزودن آنتیصاکسیدانصهایGSH ، SOD وGSH SODبویژه GSH (mM ۵) وGSH ) SODIU/ml mM ۱۰۰ ۵و۱۰۰ ۵/۷)به رقیقصکننده تریس- زرده تخم مرغ، کیفیت منی گاو را پس از یخصگشائی بهبود میصبخشد
Semen cryopreservation process with increased reactive oxygen species levels (ROS) plays a decisive role on the sperm cellular organelles (cell membrane, mitochondria and DNA). Mammalian spermatozoa membranes are rich in polyunsaturated fatty acids and are very sensitive to the damage caused by ROS resulted from lipid peroxidation. Use of appropriate antioxidants in semen extenders can reduce ROS levels. The purpose of the present study was to determine the effect of different concentrations of reduced glutathione (GSH) and superoxide dismutase (SOD) as single treatments and/or combined of them (GSHegg yolk based extender. The study treatments were applied in 3 expremennts: 1) GSH (5 and 7.5 mM), 2) SOD (100 and 150 IU/ ml) and 3) GSH-5 years old were used in this study. A sum of 20 ejaculates (5 ejaculates per bull) was collected and then pooled in each repetition. Semen samples were diluted in a Tris- SOD) in freezing extenders on the sperm quality of frozenthawed bull semen. Four healthy Holstein bulls, with 4SOD (mMIU/ml) (5100; 5150; 7.5100 and 5 egg yolk extenders with GSH, SOD and GSH-Nigrosine staining, and positive response rate to hypoosmotic swelling test (HOST) were evaluated at zero and 2 h of incubation after thawing samples. Biochemical tests including Malonaldialdehyde (MDA) level, the endogenously activity of SOD and glutathione peroxides (GPX) enzymes were detected at the initial time after thawing samples. The results of all tests in the present study demonstrated that supplementation of Tris-C during 2 hours and then they were frozen in 0.5 ml French straws. Total and progressive motility were evaluated by computer assisted semen analysis (CASA); viability percentage was measured with Eosine150) and an extender without additive (control). Subsequently, The semen samples were cooled to 5SOD antioxidants, particularly GSH (5 mM) and GSHSOD (5100 and 7.5 thaw bull semen quality-1), my improve the post-100 mM/ IU ml