تاثیر غلظت و منبع کربوهیدرات بر تولید درون شیشهای آنتوسیانین در سیب ماکامیک
/فاطمه زاهد زاده
تبریز : دانشگاه تبریز ، دانشکده کشاورزی
۸۵ص
چاپی
کارشناسی ارشد
علوم باغبانی
۱۳۹۱/۰۶/۰۱
تبریز : دانشگاه تبریز ، دانشکده کشاورزی
کشت سلولهای گیاهی درون شیشهای یک روش ایدهآل برای تولید مقادیر زیاد چندین متابولیت ثانویهی مهم به صورت تجارتی است .سیب ماکامیک یکی از سیبهای وحشی بومی آسیای مرکزی و سیبری میباشد که توانایی تولید آنتوسیانین را در بیشتر بافت-های خود داراست و این ترکیبات مانند فلاونوئیدها و پلیفنولها دارای فعالیت آنتیاکسیدانی هستند .آنتوسیانینها باعث کاهش سطوح تریگلیسیرید و اسیدهای چرب آزاد شده و بازدارندهی تومورهای سرطانی میباشند و برای سلامتی انسان مفید هستند .تولید آنتوسیانین به دلیل تغییرات فصلی و تجزیه رنگدانهها محدود شده است .این موارد باعث شده است که تحقیقاتی در زمینه بهینه سازی فرایندهای استخراج و تولید آنتوسیانین انجام گردد .در این پژوهش به منظور تعیین بهترین منبع کربوهیدرات و بهینه کردن غلظتهای مختلف ساکارز، گلوکز، فروکتوز، مالتوز، مانیتول، جهت تولید درونشیشهای آنتوسیانین از سیب ماکامیک، ابتدا از ریز نمونههای برگ گیاهچههای درون شیشهای جهت تولید کالوس استفاده گردید و پس از بدست آوردن کالوس به مقدار مورد نیاز، تیمارها در قالب طرح کاملا تصادفی با چهار تکرار و چهار نمونه در هر تکرار اعمال گردید .نتایج نشان داد که از میان غلظتهای مختلف مانیتول جهت تولید آنتوسیانین، غلظت ۳ درصد آن به همراه ساکارز ۳ درصد بیشترین تاثیر را داشت .با افزایش غلظت مانیتول بیشتر از ۳ درصد، بر اساس منحنی رگرسیون میزان تولید آنتوسیانین روند کاهشی داشت .با افزایش غلظت مانیتول، میزان شاخص رشد کالوس و وزن تر کالوس کاهش و وزن خشک کالوس افزایش یافت .همچنین بین تیمارهای ساکارز بیشترین میزان تولید آنتوسیانین و کمترین میزان شاخص رشد در غلظت ۶ درصد مشاهده گردید .تیمارهای گلوکز، فروکتوز و مالتوز تاثیر ضعیفتری بر تولید آنتوسیانین داشتند .در نهایت، از میان غلظتها و منابع کربوهیدرات مورد استفاده در این پژوهش بیشترین میزان تولید آنتوسیانین در مانیتول۲ ، ۳ و ۴ درصد+ ساکارز ۳درصد و ساکارز ۶ درصد مشاهده گردید .در کل، بر اساس نتایج حاصل از این آزمایش، برای تولید آنتوسیانین درونشیشهای از کشت کالوس درون شیشهای سیب ماکامیک استفاده توام از مانیتول و ساکارز مفید به نظر می رسد
In vitro culture of plant cells is an ideal method for commercial production of large amounts of several important secondary metabolites. Makamik apple is a wild apple native to Central Asia and Siberia that can produce anthocyanin in various organs and contains compounds such as flavonoids and polyphenols which have antioxidant activity. Anthocyanins diminish levels of blood triglycerides and free fatty acids and so are being considered as inhibitors of cancerous tumors and are useful for human health. Production of anthocyanin pigments is limited due to their degradation and seasonal variation. All these have suggested the extraction and production methods to be improved. The aim of this study was to determine the best source and optimum concentration of carbohydrates including sucrose, glucose, fructose, maltose and mannitol to produce anthocyanin in in vitro grown Makamik apple. In this way, explants from in vitro plantlets were used to produce callus. After obtaining sufficient amount of callus, treatments were performed in a completely randomized design each being replicated 4 times and 4 samples taken from each replicate. The results showed that the mannitol concentration of 3 plus 3 sucrose was the most effective carbohydrate treatment for anthocyanin production. Increasing mannitol concentration to more than 3 resulted in reduced anthocyanin production. With increasing of mannitol concentration, callus growth index and callus fresh weight decreased, while callus dry weight increased. The highest anthocyanin production and the lowest callus growth index were observed in 6 among used sucrose concentrations. Glucose, fructose and maltose had weaker effects on anthocyanin content. In conclusion, among all treatments performed in this study, the highest anthocyanin production resulted from mannitol 2, 3 and 4 + sucrose 3 as well as sucrose 6 . Furthermore, based on our results, in order to produce anthocyanin from in vitro callus cultures of Makamik apple using mannitol in combination with sucrose appears to be useful