مقایسه پاسخهای فیزیولوژیکی و ترکیبات شیمیایی فراسیون آسای سیاه ( به سالیسیلیک اسید در کشت گلخانهای و درون شیشهای) Ballota nigra L
Comparison of physiological and phytochemical responses in black horehound (Ballota nigra L) to salicylic acid in greenhouse and in vitro culture
/سارا بهرامی
: کشاورزی
، ۱۳۹۸
، میرزائی
۸۱ص
چاپی - الکترونیکی
کارشناسی ارشد
باغبانی
۱۳۹۸/۱۱/۲۰
تبریز
فراسیون آسای سیاه گیاهی پایا از خانواده نعناعیان بوده و به عنوان یک گیاه دارویی مرسوم در کشورهای اروپایی و خاورمیانه شناخته و تجاری سازی شده است .امروزه به طور عمده از این گیاه در طب سنتی برای درمان بیماریهای عصبی، قلبی عروقی و التهابات مجاری تنفسی استفاده میشود .تکثیر و بهره برداری از پتانسیل بالقوه گیاهان دارویی از اهداف فنآوریهای نوین از جمله بیوتکنولوژی و کشت بافت میباشد .تلاشهای زیادی برای تحریک سلولها با استفاده از روشهایی مانند بهینه سازی محیط کشت) از نظر مواد غذایی، فیتوهورمونها و پیش ماده(، انتخاب لاین سلولی، شرایط کشت و اخیرا مهندسی متابولیکی انجام شده است .تاکنون تحقیقی در زمینهی اثر یک الیسیتور بر کیفیت و کمیت عصاره این گیاه انجام نشده است .بنابراین در این تحقیق، تأثیر تیمارهای سالیسیلیک اسید) صفر،۱۰۰ ،۲۰۰ و ۴۰۰ میکرو مولار (بر روی دانهالهای این گیاه در شرایط کشت گلخانهای و درون شیشهای مورد بررسی قرار گرفت .به منظور انجام آزمایش در شرایط گلخانهای، نشاءهای فراسیون آسای سیاه در مرحله چهار برگی به گلدانهای حاوی ۳ کیلوگرم خاک انتقال داده شدند .بعد از انتقال نشاءها، در مرحله ۸ تا ۱۰ برگی گیاه، تیمارهای سالیسیلیک اسید به صورت محلول پاشی در سه نوبت و به فواصل هفت روز بر روی گیاهان اعمال شدند .یک هفته بعد از آخرین محلول پاشی، شاخصهای رشدی اندازه گیری شده و اندام هوایی گیاهان به منظور تهیه عصاره برداشته شدند .برای انجام آزمایش در شرایط کشت بافت، بذور بعد از استریل کامل، در شیشههای حاوی محیط کشت MS کاشته شدند .بعد از گذشت شش هفته، دانهالهای رشد یافته از محیط کشت خارج شده و بعد از حذف ریشهها، اندامهای هوایی در محیط کشت MS حاوی تیمارهای سالیسیلیک اسید و هورمون کشت شدند .چهار هفته بعد از انتقال گیاهان به محیط کشت جدید، نمونههای گیاهی به منظور تهیه عصاره برداشت شدند .عصارههای تهیه شده برای شناسایی و آنالیز به دستگاه GC/MS تزریق شده و روند افزایشی ترکیبات شیمیایی عصاره هگزانی گیاه فراسیون آسای سیاه در دو شرایط رشدی درون شیشهای و گلخانهای مورد ارزیابی قرار گرفتند .بر اساس نتایج تیمارهای مختلف سالیسیلیک اسید در گیاهان پرورش یافته در شرایط گلخانهای تأثیر بسزایی بر روی صفات مورفولوژیکی و فیزیولوژیکی این گیاهان داشتند .به طوری که منجر به افزایش وزن تر و خشک ریشه، ارتفاع گیاه، تعداد برگ، سطح برگ، غلظت کلروفیل، تعداد شاخه جانبی شدند .در حالی که وزن تر و خشک اندام هوایی، طول ریشه، تعداد گره در شاخساره در گیاهان تحت تیمار نسبت به شاهد کاهش یافتند .در گیاهان پرورش یافته در شرایط درون شیشهای نیز در صفت تعداد برگ در گیاهان تحت تیمار نسبت به شاهد افزایش مشاهده شد در حالی که سایر صفات در مقایسه با شاهد کاهش چشمگیری یافتند .بر طبق نتایج در صفات فیزیولوژیکی مورد بررسی در گیاهان پرورش یافته در شرایط گلخانهای، فعالیتهای غیر آنزیمی گیاه افزایش قابل توجهی از خود نشان دادند به طوری که مقدار ظرفیت آنتی اکسیدان کل، فنل و فلاونوئید کل تولید شده در گیاهان تحت تیمار نسبت به شاهد افزایش چشمگیری از خود نشان دادند .همچنین در بررسی فعالیتهای آنزیمی گیاهان گلخانهای نیز مشاهدات نشان داند که، غلظتهای مختلف سالیسیلیک اسید اعمال شده بر روی این گیاه منجر به افزایش فعالیتهای آنزیمهای کاتالاز و آسکوربات پراکسیداز در این گیاه شد .علاوه بر این، در بررسیهای صورت گرفته بر روی فعالیتهای غیرآنزیمی و آنزیمی گیاهان پرورش یافته در شرایط آزمایشگاهی، مشاهدات نشان داد که ظرفیت آنتیاکسیدانی کل و میزان فنل کل و فلاونوئید کل در گیاهان تحت تیمار افزایش چشمگیری یافتند .همچنین فعالیت آنزیمهای آسکوربات پراکسیداز و کاتالاز نسبت به شاهد به طور قابل توجهی افزایش یافت
Black horehound is a perennial plant of the mint family and is known and commercialized as a common medicinal plant in European and Middle Eastern countries. Today, the plant is mainly used in traditional medicine to treat neurological, cardiovascular, and respiratory tract infections. Propagation and exploitation of the potential of medicinal plants is one of the goals of new technologies such as biotechnology and tissue culture. Many attempts have been made to stimulate cells using methods such as optimizing the culture medium (in terms of nutrients, phytohormones and precursors), cell line selection, culture conditions, and more recently metabolic engineering. So far, no research has been done on the effect of an elixir on the quality and quantity of the plant's extract. Therefore, in this study, the effect of salicylic acid treatments (zero, 100, 200 and 400 M) on the seeds of this plant in greenhouse conditions and inside the glass was investigated. In order to conduct experiments in greenhouse conditions, four-leaf black fermentation seedlings were transferred to pots containing 3 kg of soil. After transplanting the seedlings, in the 8 to 10 leaf stage of the plant, salicylic acid treatments were applied as a foliar application three times at intervals of seven days on the plants. One week after the last foliar application, growth indicators were measured and the aerial parts of the plants were removed for preparation. For experiments in tissue culture conditions, the seeds were implanted in jars containing MS culture medium after complete sterilization. After six weeks, the grown seeds were removed from the culture medium, and after removing the roots, the aerial parts in the MS culture medium were treated with salicylic acid and culture hormones. Four weeks after the plants were transferred to the new culture medium, plant samples were taken to prepare the extract. The extracts were injected into the GC / MS machine for identification and analysis, and the increasing chemical composition of the hexagonal extract of the black fermentation plant was assessed under two growing conditions inside glass and greenhouse. According to the results of various treatments, salicylic acid in plants grown in greenhouse conditions had a significant effect on the morphological and physiological characteristics of these plants. So that led to increased wet and dry root weight, plant height, number of leaves, leaf area, chlorophyll concentration, number of lateral branches. While the wet and dry weight of the aerial limbs, root length, and the number of nodes in the shoots in deciduous plants decreased compared to the control. In plants grown in glass conditions, the number of leaves in treated plants was increased compared to the control, while other traits decreased significantly compared to the control. According to the results of physiological traits studied in plants grown in greenhouse conditions, non-enzymatic activities of the plant showed a significant increase so that the amount of total antioxidant capacity, phenol and total flavonoids produced in treated plants increased compared to the control. They showed remarkable self. Also, in the study of enzymatic activities of greenhouse plants, observations show that different concentrations of salicylic acid applied to this plant led to an increase in the activity of catalase and ascorbate peroxidase enzymes in this plant. In addition, in studies of the non-enzymatic and enzymatic activities of plants grown in the laboratory, observations showed that the total antioxidant capacity and total phenol and flavonoid levels in treated plants increased significantly. Also, the activity of ascorbate peroxidase and catalase enzymes increased significantly compared to the control
Comparison of physiological and phytochemical responses in black horehound (Ballota nigra L) to salicylic acid in greenhouse and in vitro culture