بررسی اثر جایگزینی۴۵۱ - miRبر میزان مهاجرت سلولی در سلولهای سرطان پستان در شرایط آزمایشگاهی
The effect of miR-۴۵۱ replacement on cellular migration of breast cancer cells in vitro
/حامد عزتی
: دامپزشکی
، ۱۳۹۸
، راشدی
۱۵۷ص
چاپی - الکترونیکی
دکتری
دامپزشکی
۱۳۹۸/۰۶/۱۳
تبریز
تومورهای پستانی متداول ترین نوع تومور۵۰ - (۸۰درصد (در سگهای ماده میباشند .معمولا بیش از ۵۰ درصد این تومورها رفتار بدخیمی از خود بروز میدهند ولی تا به امروز یک درمان سیستمیک موثر برای سگهای مبتلا به تومور غدههای پستانی ارائه نشده استmiRNA .ها مولکولهای RNA کوچک۲۱ - ۲۵نوکلئوتیدی هستند که با اتصال به mRNA هدف در تنظیم بیان ژن نقش اساسی دارند .در این مطالعه، اثر۴۵۱ - microRNAبر میزان مهاجرت سلولهای سرطان پستان بررسی میشود که در صورت مشاهده اثر مهاری بر میزان مهاجرت، میتوان این miRNA را به عنوان یک درمان بالقوه برای سرطان پستان سگ در نظر گرفت .برای انجام این پژوهش، ابتدا سل لاین سرطان پستان بدخیم۲۳۱) -MB- (MDAدر محیط کشت RPMI حاوی FBS ۱۰ درصد در دمای ۳۷ درجه سلسیوس و میزان CO۲ ۵ درصد کشت داده شد .سپس۴۵۱ - miRبه داخل سلول ترانسفکت گردید و بعد از گذشت زمان لازم میزان بیان۴۵۱- miR، ژنهایMMP۹ ، Vimentin، Rock۱ وMyc- cبه وسیلهPCR - qRTاندازهگیری شد .همچنین، اثر سایتوتوکسیک جایگزینی۴۵۱ - miRدر سلولهای سرطانی توسط تکنیک MTT مورد بررسی قرار گرفت .میزان مهاجرت سلولهای سرطانی بعد از ترانسفکت۴۵۱ - miRبوسیله آزمایش Wound healing assay بررسی گرفت .یافته های این مطالعه نشان داد که بیان۵p -۴۵۱- miRدر سلولهای سرطان پستان کاهش میصیابد و بازگردانی۵p -۴۵۱- miRدر رده سلولی۲۳۱ -MB- MDAمیصتواند سبب کاهش مهاجرت و متاستاز سلولصها شود .همچنین، بازگردانی۵p -۴۵۱- miRمیتواند منجر به کاهش سطح بیان mRNA ژنهایMMP۹ ، Vimentin، Rock۱ وMyc - cگردد .نتایج حاضر نشان داد که۵p -۴۵۱- miRمیصتواند به عنوان یک miRNA ضد-متاستازی در سرطان پستان عمل کرده و نقش مهمی در کنترل مهاجرت و متاستاز در سرطان پستان داشته باشد لذا ممکن است با انجام تستصهای تکمیلی در آینده به عنوان یک هدف درمانی بالقوه در درمان سرطان پستان پیشنهاد شده و مورد استفاده قرار گیرد
Mammary tumors are the most common type of tumors (50-80 ) in bitches, with more than 50 of these tumors showing malignant behavior. Up to date, there is no effective treatment system for mammary gland tumors in female dogs. miRNAs are small non-coding RNA molecules (containing between 21-25 nucleotides) that play a crucial role in regulating gene expression by binding to the target mRNA. In this study, we investigated the effect of microRNA-451 on the growth and metastasis of breast cancer cells. For this purpose, firstly, the malignant breast cancer cell line (MDA-MB-231) was cultured in RPMI medium containing 10 FCS at 37C and 5 CO2. Subsequently, miR-451 was transfected to the cells. Afterward, the expression of miR-451, MMP9, Vimentin, ROCK1, and c-Myc genes was measured by qRT-PCR. Additionally, the growth and proliferation rate of cancer cells were evaluated by MTT assay. The migration of cancer cells after miR-451 transfection was assessed by wound healing assay. The findings of this study demonstrated that miR-451-5p expression was reduced in breast cancer cells and restoration of miR-451-5p in MDA-MB-231 cell line inhibited cell migration and metastasis. Interestingly, miR-451-5p overexpression decreased the expression levels of MMP9, Vimentin, Rock1, and c-Myc. The present results suggest that miR-451-5p plays an essential role in controlling migration and metastasis of breast cancer cells and could act as an anti-metastatic miRNA in breast cancer; therefore, it seems that miR-451 restoration may constitute an effective novel therapeutic strategy for the treatment of breast cancer in the future
The effect of miR-۴۵۱ replacement on cellular migration of breast cancer cells in vitro