بررسی فسفولیپیدها و تریگلیسریدهای شبپرهی هندیPlodia interpunctella (Hubner, [۱۸۱۳]) (Lep., Pyralidae) در رژیمهای غذایی متفاوت
bner, [۱۸۱۳]) (Lepidoptera, Pyralidae) on Different DietsیEvaluation of Phospholipids and Triglycerides in Indian Mealmoth, Plodia interpunctella (H
/پگاه سلطانی
: کشاورزی
، ۱۳۹۷
، میرزائی
۷۶ص
چاپی - الکترونیکی
کارشناسی ارشد
گیاهپزشکی - حشره شناسی کشاورزی
۱۳۹۷/۱۱/۱۷
تبریز
شبپرهی هندی Plodia interpunctella Hubner, ۱۸۱۳ (Lep., Pyralidae) آفت شایع محصولات انباری خصوصا خشکبار و آجیل در سراسر جهان و همچنین ایران میباشد .انواع مختلف چربی در بدن حشرات نقش مهمی در نشوونمای این موجودات دارد .برخی چربیها شامل فسفولیپیدها و تریگلیسریدها در تمام مراحل زندگی حشرات شامل تخم، لارو، شفیره، مرحلهی دیاپوز و حشرهی کامل حضور فعال داشته و نقش اساسی در متابولیسم، رشد و تولید مثل آنصها ایفا میصکند .شناخت ویژگیصهای این چربیها و همچنین کمیت و کیفیت آنها در دورهصهای مختلف رشدی و نقش آنصها در حشرات اولین گام در مطالعات بیوشیمیایی و فیزیولوژیکی میصباشد تا بتوان گامصهای مؤثرتر بعدی در امر کنترل آفات با استفاده از ترکیباتی که فعالیت این چربیها را برهم میزنند برداشته شود .در این پژوهش سعی خواهد شد با اعمال چهار رژیم غذایی متفاوت، شامل رژیم غذای مصنوعی، پسته، کشمش و گردو، تاثیر رژیم غذایی بر روی فعالیت لیپیدها در لاروهای سن پنجم شبپرهی هندی بررسی شود .میتوان گفت که تقریبا اکثر چربیها به عنوان اشکال ذخیرهی انرژی در موجودات زنده میباشند که مشتقاتی از اسیدهای چرب هستند .اسیدهای چرب ترکیبات هیدروکربنی هستند که اکسیداسیون سلولی آنها به شدت انرژیزا است و تولید CO۲ و H۲O میکند .در بررسی حاضر اقدام به مطالعه و تعیین فسفولیپیدها و تریگلیسریدهای تشکیل دهندهی چربی کل بدن لاروهای سن پنجم گردید .جهت استخراج چربی کل بدن، طبق روش Dyer & Bligh عمل شد .برای پرورش حشرهی شبپرهی هندی و هم سن سازی لاروها، حشرات کامل جمعآوری شده و در ظروف استوانهای برای جفتگیری و تخمریزی رهاسازی شدند .جمعآوری تخمها ۲۴ ساعت بعد انجام گرفت و تخمها به ظروف پرورش انتقال داده شدند .لاروهای سن پنج از ظروف پرورش به طور کاملا تصادفی انتخاب گردید و در داخل میکروتیوبها به فریزر منتقل شدند ۱۰ .عدد لارو سن آخر) پنج (از هر دو جنس نر و ماده در مخلوط کلروفرم-متانول (۲:۱) به وسیلهی دستگاه هموژنایزر له شدند .به یک میلیلیتر از نمونهی بافت له شده ۷۵/۳ میلیلیتر از محلول کلروفرم /متانول (۲:۱) اضافه شد .سانتریفیوژ نمونهها با سرعت ۳۰۰۰ دور در دقیقه به مدت ۵ دقیقه انجام گرفت .به مایع رویی ۲۵/۱ میلیلیتر کلروفرم و همچنین ۲۵/۱ میلیلیتر آب مقطر اضافه گردید .مجددا نمونهها به مدت ۵ دقیقه در ۱۰۰۰ دور سانتریفیوژ شدند .فاز زیرین برای استخراج چربی کل و تعیین اسیدهای چرب در مجاورت گاز ازت قرار داده شد تا تغلیظ صورت گیرد .نمونهی تبخیر شده با استفاده از لولهی موئینه بر روی صفحات TLC به صورت خطی انتقال داده شده و عمل لکهگذاری انجام گرفت .صفحهی TLC لکهگذاری شده، درون تانک TLC حاوی حلال اسید استیک /دی اتیل اتر /هگزان با نسبت ۹۰:۱۰:۳ با ارتفاع کم به مدت ۷۰ دقیقه قرار داده شدند .پس از حرکت چربیها بر روی صفحهی TLC با بلور ید رنگآمیزی صورت گرفت .محل قرارگیری فسفولیپیدها و تری گلیسریدها با تیغهی فلزی خراش داده شدند ۲ .میلیلیتر از محلول بنزن /متانول (۴:۱) حاوی استاندارد همچنین مقدار ۲/۰ میلیلیتر استیل کلراید به سیلیکاژل خراش داده شده اضافه گردید .نمونهها در بن ماری جوش به مدت یک ساعت، جهت تبدیل اسیدهای چرب استری شده با گلیسرول به استرهای متیل قرار داده شد .برای خنثیسازی محیط، ۵ میلیلیتر کربنات پتاسیم ۶ به لوله اضافه و به مدت یک دقیقه با ۱۰۰۰ دور سانتریفیوژ شد .فاز رویی بنزن که حاوی لیپیدها میباشد توسط پیپت پاستور جدا شده و داخل ویالهای شیشهای کوچک انتقال یافت و آماده تزریق به دستگاه GLC گردید .بررسی آماری مقادیر کمی و کیفی اسیدهای چرب نمونههای آزمایش شده) هم در بخش فسفولیپید و هم در بخش تریگلیسرید (نشان داد که در بین اسیدهای چرب موجود در گروه فسفولیپید، اولئیک اسید (C۱۸: ۰۱) دارای بیشترین مقدار اسید چرب با میانگین۸۶/۳۶ ۴۱/۱بود .در بین اسیدهای چرب این اسید چرب در لاروهای سن پنجم در هر چهار رژیم غذایی بیشترین درصد را داشت و درصد آن در کشمش بیشتر از سایر رژیمهای غذایی بود .کمترین مقدار اسید چرب در فسفولیپیدها به پالمیتولئیک اسید (C۱۶: ۰۱) با میانگین۶۱/۱ ۱۷/۱تعلق داشت .این اسید چرب در تمام نمونههای لارو سن پنجم در تمام چهار رژیم غذایی کمترین مقدار را داشت .همچنین مقدار آن در گردو کمتر از سایر رژیمهای غذایی بود .بین اسیدهای چرب مختلف در فسفولیپیدها در رژیمهای غذایی آزمایش شده، میریستیک اسید(C۱۴: ۰۰) ، پالمیتیک اسید(C۱۶: ۰۰) ، لینولنیک اسید (C۱۸: ۰۳) و استئاریک اسید (C۱۸: ۰۰) تفاوت معنیداری نداشتند .اما لینولئیک اسید(C۱۸: ۰۲) ، اولئیک اسید (C۱۸: ۰۱) و پالمیتولئیک اسید (C۱۶: ۰۱) دارای تفاوت معنیداری بودند .در بین اسیدهای چرب موجود در گروه تریگلیسیرید، اولئیک اسید (C۱۸: ۰۱) دارای بیشترین مقدار اسید چرب با میانگین۶۹/۳۴ ۳۵/۲بود .کمترین مقدار اسید چرب در تریگلیسیرید به لینولنیک اسید (C۱۸: ۰۳) با میانگین۰/۲ ۸۶/۶۳اختصاص یافت .بین اسیدهای چرب مختلف در تریگلیسیرید در رژیمهای غذایی آزمایش شده، لینولئیک اسید(C۱۸: ۰۲) ، لینولنیک اسید(C۱۸: ۰۳) ، پالمیتیک اسید(C۱۶: ۰۰) ، پالمیتولئیک اسید (C۱۶: ۰۱) و استئاریک اسید (C۱۸: ۰۰) تفاوت معنیدار داشتند .اما میریستیک اسید (C۱۴: ۰۰) و اولئیک اسید (C۱۸: ۰۱) تفاوت معنیداری نداشتند
bner, ۱۸۱۳) is an important stored pest that causes serious problems in storage products especially nuts and dried fruit. Several fats are in insect's body which plays an important role on their developmental stages. Some fats like phospholipids and triglycerides are active in whole life stages including egg, larvae, pupa, diapause stage and adult and play an important role on insect metabolisms. Glycogen and triglyceride are the natural forms of storing energy in the main fat cells of insect's body. Metabolism of fats is essential for growth and reproduction as well as producing required energy of diapause. Fats that typically are storing forms of energy in animals are derived from fatty acids. Fatty acids are hydrocarbon compounds which their cell oxidation (CO۲, H۲O) severely produce energy. In this research we studied and also determined the fatty acids that constitutive of phospholipids and triglycerides by gas-liquid chromatography method. Four diets including pistachio, walnut, raisin and artificial food were investigated in this study. Between the available fatty acids in phospholipids group, Oleic acid (C۱۸:۰۱) had the highest fatty acid value with ۳۶.۸۶۱.۴۱ average. This fatty acid in fifth instar larvae's at all four diets was highest and its value in raisin is highest than other diets. The lowest value of fatty acids in phospholipids was allocated to Palmitoleic acid (C۱۶:۰۱) with ۳.۶۱۱.۱۷ average. This fatty acid had lowest value in all samples of fifth instar larvae's at all four diets. Although its value in walnut is lowest than other diets. Between different fatty acids in phospholipids in tested diets, Myristic acid (C۱۴:۰۰), Palmitic acid (C۱۶:۰۰), Linolenic acid (C۱۸:۰۳) and Stearic acid (C۱۸:۰۰) had no significant difference. But Linoleic acid (C۱۸:۰۲), Oleic acid (C۱۸:۰۱) and Palmitoleic acid (C۱۶:۰۱) had a significant difference. Between the available fatty acids in triglycerides group, Oleic acid (C۱۸:۰۱) had the highest fatty acid value with ۳۴.۶۹۲.۳۵ average. The lowest value of fatty acids in triglycerides was allocated to Linolenic acid (C۱۸:۰۳) with ۲.۶۳۰.۸۶ average. Between different fatty acids in triglycerides in tested diets, Linoleic acid (C۱۸:۰۲), Linolenic acid (C۱۸:۰۳), Palmitic acid (C۱۶:۰۰), Palmitoleic acid (C۱۶:۰۱) and Stearic acid (C۱۸:۰۰) had a significant difference. But Myristic acid (C۱۴:۰۰) and Oleic acid (C۱۸:۰۱) had no significant differenceیIndian mealmoth (Plodia interpunctella H
bner, [۱۸۱۳]) (Lepidoptera, Pyralidae) on Different DietsیEvaluation of Phospholipids and Triglycerides in Indian Mealmoth, Plodia interpunctella (H