۲۰۱۵۱پ
per
بررسی اثر عصاره تام گیاه Euphorbia gypsicola در سرطان پستان القا شده توسط DMBA) ۷ و ۱۲دی متیل بنزوآنتراسن) در رت‌های ماده
Investigating the effect of total extract of Euphorbia gypsicola in breast cancer induced by DMBA (۷, ۱۲-Dimethylbenz ]a[ anthracene) in femal rats
/مینا رمضانی
: علوم طبیعی
، ۱۳۹۷
، راشدی
۶۵ص
چاپی - الکترونیکی
کارشناسی ارشد
زیست شناسی گرایش فیزیولوژی جانوری
۱۳۹۷/۰۶/۱۹
تبریز
مقدمه :القا تومور در مدلهای حیوانی یکی از روش‌صهای رایج برای مطالعه سرطان است .از پر کاربردترین روشهای القا سرطان پستان در رت استفاده از نوعی ماده شیمیایی به نام ۷ و ۱۲ دی متیل بنزوآنتراسن DMBA می‌باشد .به دنبال تزریقDMBA ، سیتوکروم اکسیداز P۴۵۰ آن را به اپوکسیدهای جهش‌صزای واسطه متابولیزه کرده و اداکتهای DNA را تشکیل می‌صدهد که با تغییر به سمت بدخیمی همراه هستند .به دلیل مقاومت سلولهای سرطانی به شیمی درمانی، محققین در تلاش‌صاند تا با استفاده از گیاهان دارویی به عنوان مکمل داروصهای شیمی درمانی میزان استفاده از داروصهای شیمی درمانی و در نتیجه عوارض ناشی از آنها را کاهش دهند .به همین منظور مطالعه حاضر در نظر دارد با تزریق مستقیم ماده کارسینوژن DMBA به غدد پستانی رت‌صهای ماده مدل سرطان پستان ایجاده کرده و بر اولین بار اثرات عصاره گیاه Euphorbia gypsicola را به عنوان گیاه بومی ایران بر روی مدل تجربی سرطان پستان القا شده توسط DMBA نشان دهد .مواد و روش‌صها :جهت بررسی اثرات عصاره تام گیاهE. gypsicola ، تست MTT بر روی رده سلولیMCF - ۷انجام گرفت .القای آپاپتوز در رده سلولیMCF - ۷تیمار شده با عصاره با استفاده از رنگ‌صآمیزی PI توسط فلوسایتومتری و میکروسکوپ فلورسنس مورد بررسی قرار گرفت .القای سرطان پستان با تزریق ۱ میلی گرم DMBA در ۱/۰میلی لیتر روغن کنجد حل شده داخل بافت پستانی گروه یک بار تزریق انجام پذیرفت و به غدد پستانی رت‌صهای گروه چند بار تزریق این میزان از ماده کارسینوژن به مدت ۴ هفته تزریق گردید .جهت بررسی‌های پاتولوژیکی رت‌صهای سرطانی کالبد شکافی شده و تومورها و بافت‌صهای کبد و کلیه در شرایط استریل خارج شده و در فرمالین ۱۰ قرار داده شدند و به دنبال آن رنگ‌صآمیزی هماتوکسیلین /ائوزین صورت گرفت .پس از پایان دوره‌صی تیمار با عصاره، سنجش‌صهای بیوشیمیایی ALT ،AST، کراتینین و اوره رت‌صها بر روی نمونه خون‌ص انجام گردید .نتایج :نتایج بررسی اثر عصاره تام گیاه E.gypsicola نشان داد میزانIC۵۰ بعد از تیمار رده‌صی سلولیMCF - ۷با دوز افزایشی عصاره به مدت ۷۲ ساعت برابر با ۴۸/۵ نانوگرم بر میلی‌صلیتر بود .تیمار سلولهایMCF - ۷با ۴۸/۵ نانوگرم بر میلی لیتر از عصاره تام گیاه مذکور، القای آپاپتوز را در این رده‌صی صسلولی تایید کرد .نتایج هیستوپاتولوژیکی مطالعه حاضر نشان داد که DMBA باعث القایی سرطان پستان در رت‌صها می‌صشود .با این وجود، تیمار رت‌صهای سرطانی با عصاره تام بر اندازه و رشد تومورها هیچ تاثیری نداشته به همین دلیل نتایج حاصل از مشاهدات ماکروسکوپی و هیستوپاتولوژیکی بین دو گروه یک بار تزریق تیمار شده با عصاره و گروه شاهد تفاوتی نشان نداد .نتایج حاصل از سنجش‌صهای بیوشیمیایی ALT ، AST،کراتینین و اوره نیز در بین تمامی گروه‌صها اختلاف معنی‌صداری را نشان نداد .بحث و نتیجه گیری :تمام داده‌صهای حاصل از این پژوهش، القای توموردر غدد پستانی رت‌صهای ماده با تزریق داخل پستانی DMBA با روش یک بار تزریق و چند بار تزریق و اثرات ضدسرطانی و آپاپتوزی عصاره تام گیاه E. gypsicola بر روی رده سلول‌صهای سرطانیMCF - ۷را اثبات می‌صکند .این عصاره با دوز مناسب و زمان تیمار صحیح) مراحل اولیه تشخیص تومورها قبل از بزرگتر شدن (می‌صتواند یک کمک درمان جهت درمان سرطان پستان باشد
Aim of Research: Tumor induction in animal models is one of the common ways to study cancer. The most commonly used methods for inducing breast cancer in rats is the use of a chemical called 7-12 dimethylbenz[a]anthracene (DMBA). The early steps in tumorigenesis involve AhR-dependent up-regulation of cytochrome P450 enzymes, which metabolize DMBA into a mutagenic epoxide intermediate that readily forms DNA adducts. These adducts are associated with DNA mutations and malignant transformation. Resistance to therapies, including chemotherapy, is a major barrier in cancer management. Therefore, there is a crucial need to produce new adjuvants that augment the efficacy of chemotherapeutic drugs to overcome chemoresistance.the aims of present study to inject directly carcinogen (DMBA) into the mammary gland of rats to induce breast cancer model. For the first time, demonstrate the effects of Euphorbia gypsicola extract as endemic species on the experimental model of breast cancer induced by the DMBA. Research Method: Cytotoxic activity of total extract of E. gypsicola was determined by the MTT assay at various concentrations ranging from 10 to 200.00 ng/mL in MCF-7 cells. Cell morphology was assessed by fluorescence microscopy. Apoptosis and cell-cycle distribution were determined PI staining and flow cytometry. The rats of single group injection were treated with DMBA (1 mg in 0.1 ml sesame oil) by intramammillary injection (32-gauge needle) under the nipple region of 3rd, 2rd mammary gland on both the sides for one time. For Histopathological examinations, animals were sacrificed by minimal anesthetic dose of ketamine. All tumors and kidney and livers were removed and fixed in 10 formalin, then stained with hematoxyline and eosin (H&E). After the end of the treatment period, the levels of Alanine Aminotransferase (ALT), Aspartate Aminotransferase (AST) were determined from serum. Findings: Euphorbia gypsicola exhibited significant inhibition of the survival of MCF-7 cells and the half inhibitory concentration (IC50) values was 5.48 ng/mL at 72 h. E. gypsicol -treated cells apoptosis induction. Histopathological examinations of present study revealed that breast cancer was induced by DMBA in rats. However, treatment of cancerous rats with total extract had no effect on the size and growth of tumors. Therefore, the results of macroscopic and histopathologic observations between the two groups did not show any difference. The results of biochemical assays ALT, AST, creatinine and urea did not indicat any significant difference among all groups. Discussion and Conclusion: all data obtained from this study prove induction tumor in mammary gland of rat by single and multi injection of DMBA methods and anticancer and apoptotic effects of E. gypsicola on MCF-7 cells. This extract with appropriate dosage and correct treatment time (early stages of tumor detection before enlargement) can be a good alternative to chemotherapy drugs for the treatment of breast cancer
Investigating the effect of total extract of Euphorbia gypsicola in breast cancer induced by DMBA (۷, ۱۲-Dimethylbenz ]a[ anthracene) in femal rats
رمضانی، مینا
RamezaniFirst, Mina
شیخ زاده، فرزام، استاد راهنما
مهدوی، مجید، استاد راهنما
دسترنج، مینا، استاد مشاور
سیاه و سفید
نمایه‌سازی قبلی
