۱۹۶۵۷پ
per
تأثیر تروگزروتین بر شاخص‌های عددی استریولوژیک، بیان ایمونوهیستوشیمیایی آپوپتوز و کاسپاس ۳ و بیان ژن آنزیم گلوکوکیناز در کبد موش‌های صحرایی نر بالغ هایپرگلایسمی شده با استرپتوزوتوسین
The effects of troxerutin on the stereological numeric indexes, immunohistochemichal expression of apoptosis and caspase ۳ and glucokinase (GK) gene expression of the liver in streptozotocin-induced hyperglycemic adult male rats
/آزاده نوچال آبادی
: دامپزشکی
، ۱۳۹۷
، میرزائی
۱۰۲ص
چاپی - الکترونیکی
کارشناسی ارشد
دامپزشکی
۱۳۹۷/۰۶/۲۰
تبریز
هایپرگلایسمی با افزایش رادیکال‌صهای هیدروکسیل و پراکسیداسیون لیپید به سبب اختلال در سیستم دفاعی آنتی اکسیدان آنزیمی و غیرآنزیمی منجر به استرس اکسیداتیو در بافت کبد شده و متعاقب آن باعث ایجاد تغییرات ساختاری، افزایش القاء آپوپتوز می-شود .گلوکوکیناز آنزیمی است که باعث تسهیل فسفوریلاسیون گلوکز و تبدیل آن به گلوکز۶ -فسفات شده و از این طریق در مصرف گلوکز در بافت کبد نقش کلیدی بر عهده دارد .تروگزروتین(TXR) ، یک بیوفلاونوئید طبیعی با ویژگی‌های بیولوژیک بسیار مانند خواص آنتی‌صاکسیدانی، ضدالتهابی و ضد دیابتی می‌صباشد .علی‌صرغم وجود این اطلاعات پراکنده، هنوز مطالعه‌صای جهت بررسی تأثیر تروگزروتین بر تعداد سلول‌صهای کبدی، القاء آپوپتوز و کاسپاس ۳ و بیان ژن آنزیم گلوکوکیناز در کبد افراد مبتلا به هایپرگلایسمی وجود ندارد لذا مطالعه حاضر با هدف بررسی اثر تروگزروتین بر شاخص‌صهای عددی استریولوژیک، بیان ایمونوهیستوشیمیایی آپوپتوز و کاسپاس ۳ و بیان ژن آنزیم گلوکوکیناز در کبد موش‌صهای صحرایی نر بالغ هایپرگلایسمی شده با استرپتوزوتوسین صورت گرفت .در تحقیق حاضر ۵۰ سر موش صحرایی نر بالغ با سن ۸ هفته به طور تصادفی به ۵ گروه ۱۰ تایی شامل گروه کنترل، شم، دیابتی، دیابتی دریافت کننده انسولین و گروه دیابتی دریافت کننده تروگزروتین تقسیم شدند .القاء هایپرگلایسمی با تزریق درون صفاقی استرپتوزوتوسین به میزان mg/Kg ۵۵ صورت گرفت .گروه‌صهای دیابتی تحت تیمار به ترتیب انسولین(NPH ۶ - ۴واحد (را یک بار در روز و تروگزروتین را به میزان mg/Kg۱۵۰ یک بار در روز به صورت گاواژ به مدت ۴ هفته دریافت کردند .قند خون حیوانات در روزهای صفر، ۳ و پس از آن به صورت هفتگی تا پایان دوره با گلوکومتر دیچیتال اندازه گیری شد .در پایان دوره حیوانات آسان کشی شده و پس از تشریح نمونه‌صهایی از بافت کبد جهت مطالعات بافت شناسی، استریولوژیک و ایمونوهیستوشیمی در فرمالین بافر ۱۰ درصد و بخشی نیز جهت بررسی بیان ژن با تکنیکtime PCR- Realدر محلول RNA later قرار داده شدند .مطالعات استریولوژیک با تکنیک اپتیکال دایسکتور و مطالعات ایمونو هیستوشیمی جهت تعین شاخص آپوپتوزی با تست TUNEL و ردیابی کاسپاس ۳ انجام شد .در نهایت تمامی داده‌صها با استفاده از نرم افزار SPSS نسخه ۲۲ و آزمون آنالیز واریانس یک طرفه و پس-آزمون توکی در گروه‌صهای مختلف مورد مقایسه قرار گرفت .نتایج مطالعه حاضر نشان داد که القاء دیابت علاوه بر ایجاد تغییرات ساختاری در بافت کبد باعث کاهش تعداد سلول‌صهای کبدی، افزایش تعداد سلول‌صهای دو هسته‌صای، افزایش شاخص آپوپتوز، افزایش بیان کاسپاس ۳ و کاهش بیان گلوکوکیناز در بافت کبد شده است (>(۰۰۱/۰P اما درمان با تروگزروتین در بسیاری از موارد مشابه با اثر انسولین باعث مهار این تغییرات شد و تنها در بیان ژن گلوکوکیناز اثر افزایشی بیشتری نسبت به انسولین داشته است .(>(۰۰۱/۰P بر اساس نتایج بدست آمده از تحقیق حاضر می‌صتوان گفت که تروگزروتین می‌صتواند به طور قابل قبولی از ضایعات کبدی ناشی از دیابت نوع یک جلوگیری کرده و با مهار وقوع آپوپتوز و افزایش بیان ژن آنزیم گلوکوکیناز ساختار بافتی کبد را در بیماران دیابتی بهبود بخشد، بنابراین تروگزروتین می‌صتواند به عنوان یک استراتژی درمانی مناسب جهت بهبود عملکرد کبد در افراد دیابتی مورد توجه قرار گیرد .
Hyperglycemia induces oxidative stress due to impairment of enzymatic and non-enzymatic antioxidant defence system by incrasing of hidroxyle radicals and lipid peroxidation and increases induction of apoptosis. Glucokinase (GK) is an enzyme which facilitates the phosphorylation of glucose and converts it to glucose 6-phosphate and thus plays a key role in glucose utilization in the liver. Troxerutin is a natural bioflavonoid with many biological properties such as antioxidant, anti-inflammatory and anti-diabetic properties. Despite the dispersion of this information, there is still no study to investigate the effect of troxerutin on the number of hepatocytes, apoptosis index and caspase 3 and GK gen expression in the liver of diabetic patients. Thus, this study was conducted to evaluate the effect of troxerutin on the stereological numeric indexes, immunohistochemichal expression of apoptosis and caspase 3 and GK gene expression of the liver in streptozotocin-induced hyperglycemic adult male rats. In this study, 50 adult male wistar rats with 6-8 weeks old were divided into 5 groups (n: 10) including control, troxerutin, diabetes, diabetes+troxerutin and diabetes+insulin. Diabetes induced by 55 mg/kg streptozotocin via IP injection. Diabetes+insulin groups received 4-6 U insulin NPH, one time per day and troxerutin and diabetes+troxerutin groups received 150 mg/kg troxerutin via oral gavage for 4 weeks. Blood glucose level was measured by digital glucometer during experimental period. At the end of experiments, animals were uthenized and after dissection, their liver were removed and fixed in buffered formalin 10 and part of it located in RNA later solution for Real-time PCR analysis of GK gen expression. Stereological studies were performed by optical dissector technique and evaluation of apoptotic index and caspase 3 expression were studied by immunohistological technique and TUNEL test. Finally, data were analysed by SPSS software ver.22 and ANOVA test and Tukey's post hoc. The results of this study were shown that diabet induction caused structural alteration in liver tissue and also decrease number of hepatocytes, increase binucleated hepatocytes, apoptosis index and caspase 3 expression and reduced GK gen expression in the liver tissue (P<0.001). The administration of troxerutin not only can inhibit and improve these changes similar to insulin bu also can incrase GK gen expression more than insulin (P<0.001). Based or results,it can be concluded that troxrutin can significantly restrain and improve liver side effect of type 1 diabetes by inhibiton of apoptosis and caspase 3 expresstion of hepatocyte and increasing of GK gen expression in liver tissue. Thus, troxrutin can be considered as a trauputic strategy for improvement of structure and function of liver in diabetic patients
The effects of troxerutin on the stereological numeric indexes, immunohistochemichal expression of apoptosis and caspase ۳ and glucokinase (GK) gene expression of the liver in streptozotocin-induced hyperglycemic adult male rats
نوچال آبادی، آزاده
Nochalabadi, Azadeh
حمیدیان، غلامرضا، استاد راهنما
فیروزامندی، معصومه، استاد مشاور
کیهان منش، رعنا، استاد مشاور
سیاه و سفید
نمایه‌سازی قبلی
