بررسی ارتباط بین بیان ژن های مرتبط با استرس اکسید اتیوبا ورم پستان در گاوهای شیری
/پدرام زنگی بند
: دامپزشکی
، ۱۳۹۵
، راشدی
چاپی
کارشناسی ارشد
دکتری حرفه ای
۱۳۹۵/۰۷/۱۹
تبریز
ورم پستان یکی از بیماری های مهم در گاوهای شیری به شمار می آید .هر ساله بیماری ورم پستان و یا اثرات منفی ناشی از آن ضررهای اقتصادی زیادی را سبب می شوند .مسیر پاسخ های آنتی اکسیدانی یکی از راههای مناسب برای شناسایی عوامل خطر در ورم پستان و به دنبال آن کاستن عوامل خطرزا می باشد .در این میان ژن های سوپراکسید دیسموتاز و گلوتاتیون پراکسیداز نقش مهی را در خنثی کردن عوامل استرس اکسیداتیو که منجر به آسیب به بافت غده ی پستانی می گردند دارند .هدف مطالعه حاضر بررسی بیان ژن های SOD و GPX در شیر گاوهای مبتلا به ورم پستان بالینی در مقایسه با گاوهای سالم بوده است .برای این منظور نمونههای شیر از شصت گاو اخذ و کشت باکتریایی انجام شد .پس از بررسی متداول میکروسکوپ نوری به دنبال ثبوت نمونههای شیر و رنگآمیزی گرم و سایر تستهای تشخیصی لازم، استخراج RNA ، و سپس ساخت cDNA از نمونه های شیر صورت گرفت .در نهایت ارزیابی میزان بیان نسبی ژن های SOD و GPX در شیر گاوهای سالم و بیمار توسط Real Time PCRانجام شد .نتایج حاصل از این بررسی نشان داد که میزان SOD در شیر گاوهای دچار ورم پستان نسبت به شیرگاوهای سالم کاهش داشته است و همچنین این کاهش در شیر گاوهایی که با عامل ورم پستانی استافیلوکوکوس آرئوس آلوده شده بودند نسبت به شیر گاوهایی که با عامل اشیریشیا کلای آلوده شده بودند، بیشتر بود .از طرفی میزان میزان GPx درشیر در گاوهای مبتلا به ورم پستان نسبت به شیر گاوهای سالم افزایش داشته است .همچنین این افزایش بیان ژن در گاوهای دچار ورم پستان با عامل استافیلوکوکوس آرئوس کمتر از گاوهای دچار ورم پستان با عامل اشیریشیاکلی می باشد .همچنین میتوان به این نتیجه رسید که آنزیم گلوتاتیون پراکسیداز نقش پررنگ تری را نسبت به آنزیم سوپراکسید دیسموتاز در مبارزه با روند اکسیداتیو در ورم پستان ایفا می کند
Mastitis is one of the important diseases in dairy cows. Mastitis or its negative effects reduced in high economic losses each year. Anti oxidants response pathway is effeicent way to detect the risk factors and consequently to reduce these risk factors . Among of these factors, superoxide dismutase and glutatiune peroxidase genes play an important role in oxidative stress reduction that may damage mammary glands. The aim of this study evaluate the releative expression of SOD and GPX genes in milk of mastitis compared to the milk of healthy cattle. For this purpose, milk sampling of 60 dairy cattle and their bacterial culture were performed. After common light microscopy evaluation, milk samples fixation and gram staining and bacterial cultures, RNAs from milk samples were extracted and cDNAs were synthetized. At last, SOD and GPX mRNA expression was evaluated by Real Time PCR. The results indicated that mastitis caused by Staphylococcus aureus and Escherichia coli lead to down-regulation of SOD gene in milk. The SOD down regulation in milks contaminated with staphylococcus aureus is more than milks contaminated with E coli. On other hand, GPX mRNA expression in mastitis milk lead to up regulation in comprasion to healthy milks. The up regulation GPX in milk contaminated with staphylococcus areus is less than milks contaminated with E coli. It can be concluded that glutatiune peroxidase has an important role in antioxidant pathway compared to superoxide dismutase in dealing with oxidative stress in mastitis