عنوان

Evaluation of the gene expression alterations of the alpha-1 and alpha-2 subunits of GABAA receptors in the basolateral amygdala following both thermal pain and innate fear induction in the male rats

شماره

T29081

زبان متن نوشتاري يا گفتاري و مانند آن

انگلیسی

عنوان اصلي

Evaluation of the gene expression alterations of the alpha-1 and alpha-2 subunits of GABAA receptors in the basolateral amygdala following both thermal pain and innate fear induction in the male rats

نام عام مواد

Dissertation

نام نخستين پديدآور

Ali Raheem Ali Aloraifi

نام ناشر، پخش کننده و غيره

Natural Sciences

تاریخ نشرو بخش و غیره

1402

نام خاص و کميت اثر

141p.

ساير جزييات

cd

جزئيات پايان نامه و نوع درجه آن

M.S.

نظم درجات

Animal Biology-physiology

زمان اعطا مدرک

1402/05/04

متن يادداشت

The amygdala complex is a limbic structure that plays a key role in the production of emotional-affective dimensions of pain response and pain modulation. The central nucleus (CeA) of amygdala receives its excitatory afferents from the lateral-basolateral (LA-BLA) amygdala network. Also, the BLA nucleus has massive neural connections with dorsomedial and ventromedial hypothalamic (DMH/VMH) nuclei. During innate fear induction, the BLA is activated by DMH/VMH projections. On the other hand, the BLA receives orexinergic inputs from the lateral hypothalamus (LH). It is well shown that the release of orexin A leads to synthesis of the endocannabinoids like 2-AG through the orexin type 1 receptor (Orx1R) activation. Then, 2-AG can retrogradely activate the cannabinoid receptor type 1 (Cb1R) in the presynaptic neuron. The activation of the Cb1Rs inhibits the GABA release from the GABAergic interneurons of the BLA and increases the excitatory transmission of LA-BLA network. Both the Orx1R and Cb1R are found in the BLA and involved in the nociception. Therefore, the current study investigated the effect of intra-BLA injection of orexin A on the gene expression alteration of the α1- and α2-subunits of the GABAA receptors following innate fear and thermal pain induction by the tail flick and the hot plate tests. Research Method: In this study, 91 tissue samples of the BLA divided into thirteen groups (n = 7) were used for evaluation of the gene expression alteration of the α1- and α2-subunits of the GABAA receptors. The tissue samples of the BLA were immediately collected following behavioral tests. The gene expression variations of the α1- and the α2-subunits of the GABAA receptors of the BLA were evaluated by quantified real time-PCR technique (qRT-PCR) following innate fear induction. The gene ΔCT of every tissue sample is calculated by subtraction of the corresponding gene Ct and the GAPDH gene Ct (as housekeeping gene). The basal expression level of genes relative to the housekeeping gene calculated by 2-ΔCT. Statistical analysis of data will be performed using one-way and two-way analysis of variance (One way and Two-Way ANOVA) and post-Tukey test using prism software and charting with Excel software.Results: The results of the present study indicated that inducing innate fear by intra-DMH/VMH injection of bicuculline increases the gene expression level of the α1 and α2 subunits of the GABAA receptor within the BLA. Intra-BLA administration of orexin A and AM251 (a strong and selective Cb1 receptor antagonist) significantly decreased the gene expression level of the α1 and α2 subunits of the GABAA receptor following innate fear-induced analgesia. Also, pretreatment of the BLA with AM251 and co-administration of SB334867 and AM251 reduced the gene expression level of the α1 and α2 subunits of the GABAA receptor following innate fear-induced analgesia Conclusion: We concluded that the endocannabinoid system and its crosstalk with the orexinergic system decrease the expression level of the α1 and α2 subunits of the GABAA receptor gene. Namely, the crosstalk of these systems is involved in counteracting the innate fear-induced analgesia by upregulating of the α1 and α2 subunits’ expression.

متن يادداشت

تشکیلات آمیگدال یک ساختار لیمبیک است که نقش کلیدی در تولید ابعاد هیجانی-عاطفی پاسخ درد و تعدیل درد ایفا می‌کند. هسته مرکزی (CeA) آمیگدال آوران‌های تحریکی خود را از شبکه آمیگدال جانبی- آمیگدال قاعده‌ای-جانبی (LA-BLA) دریافت می‌کند. همچنین، BLA دارای ارتباطات عصبی زیادی با نواحی هیپوتالاموس پشتی-میانی/هیپوتالاموس شکمی-میانی (DMH/VMH) است. در طی القای ترس ذاتی، BLA توسط استطاله‌های DMH/VMH فعال می‌شود. از سوی دیگر، BLA ورودی‌های اورکسینرژیک را از هیپوتالاموس جانبی (LH) دریافت می‌کند. به خوبی نشان داده شده است که رهایش اورکسین A از طریق فعال‌سازی گیرنده اورکسین نوع 1 (Orx1R) به ساخت اندوکانابینوئیدهایی مانند 2-AG منجر می‌شود. سپس، 2-AG می‌تواند به طور پس‌گرد گیرنده کانابینوئیدی نوع 1 (Cb1R) را در نورون پیش‌سیناپسی فعال کند. فعال شدن Cb1R از آزاد شدن GABA از اینترنورون‌های گابائرژیک BLA جلوگیری می‌کند و انتقال تحریکی شبکه LA-BLA را افزایش می دهد. هر دو گیرنده Orx1R و Cb1R در BLA یافت شده و در رک درد نقش دارند. بنابراین، مطالعه حاضر اثر تزریق اورکسین A به داخل BLA را بر تغییر بیان ژن زیرواحدهایα1 و α2 گیرنده‌های GABAAبه دنبال القای ترس ذاتی و درد حرارتی با آزمون‌های پس‌کشیدن دم و صفحه داغ بررسی کرده است.روش تحقیق: در این مطالعه، 91 نمونه بافتی BLA که به سیزده گروه (n=7) تقسیم شده بودند، برای ارزیابی تغییر بیان ژن زیرواحدهایα1 و α2 گیرنده‌های GABAAاستفاده شدند. نمونه‌های بافتی BLA بلافاصله پس از انجام آزمون‌های رفتاری جمع‌آوری شدند. به دنبال القای ترس ذاتی، تغییرات بیان ژن‌های زیرواحدهایα1 و α2 گیرنده‌های GABAAموجود در BLA با استفاده از تکنیکReal Time-PCR کمی شده (qRT-PCR) ارزیابی شدند. ΔCT ژن در هر نمونه بافتی با تفریق Ct ژن GAPDH (به عنوان ژن کنترل داخلی) از Ct ژن مورد مطالعه محاسبه شد. سطح پایه‌ای بیان ژن‌ها نسبت به ژن کنترل داخلی براساس فرمول 2-ΔCT محاسبه شد. آنالیز آماری داده‌ها با استفاده از آنالیز واریانس یک‌طرفه و دوطرفه (One way and Two-Way ANOVA) و آزمون متعاقب توکی با استفاده از نرم‌افزار پریسم و ترسیم نمودارها با نرم‌افزار Excel انجام شد.یافته‌ها: نتایج مطالعه حاضر نشان داد که القای ترس ذاتی با تزریق بیکوکولین به داخل DMH/VMH، سطح بیان ژن زیرواحدهایα1 و α2 گیرنده‌های GABAAموجود در BLA را افزایش می‌دهد. تجویز اورکسین A و AM251(آنتاگونیست قوی و انتخابی گیرنده Cb1) به داخل BLA سطح بیان ژن زیرواحدهایα1 و α2 گیرنده‌های GABAAرا به دنبال بی‌دردی ناشی از ترس ذاتی کاهش داد. همچنین، پیش‌تیمار BLA با AM251 و تجویز هم‌زمان SB334867 و AM251 سطح بیان ژن زیرواحدهایα1 و α2 گیرنده‌های GABAAرا به دنبال بی‌دردی ناشی از ترس ذاتی کاهش داد نتیجه‌گیری: ما به این نتیجه رسیدیم که سیستم اندوکانابینوئید و تداخل آن با سیستم اورکسینرژیک، سطح بیان ژن زیرواحدهایα1 و α2 گیرنده‌های GABAAرا کاهش می‌دهد. بدین معنی که تداخل این سیستم‌ها با تنظیم افزایشی بیان ژن زیرواحدهایα1 و α2 گیرنده‌های GABAAدر خنثی کردن بی‌دردی ناشی از ترس ذاتی درگیر می‌باشد.

عنوان گونه گون

ارزیابی تغییرات بیان ژن زیرواحدهای آلفا-1 و آلفا-2 گیرنده‌های GABAA در آمیگدال قاعده‌ای-جانبی به دنبال القای درد حرارتی و ترس ذاتی در رت‌های نر

اصطلاح موضوعی

Basolateral nucleus of the amygdala, α1-subunit of the GABAA receptors, α2-subunit of the GABAA receptors, Thermal pain, Innate fear, Gene expression

اصطلاح موضوعی

آمیگدال قاعده‌ای-جانبی، زیرواحد α1 گیرنده‌های GABAA، زیرواحد α2 گیرنده‌های GABAA، درد حرارتی، ترس ذاتی، بیان ژن

عنصر شناسه اي

Raheem Ali Aloraifi,

ساير عناصر نام

Ali

کد نقش

Producer

عنصر شناسه اي

Khakpay,

عنصر شناسه اي

Banan Khojasteh,

عنصر شناسه اي

Shanehbandi,

عنصر شناسه اي

Alsalou,

ساير عناصر نام

Roghaieh

ساير عناصر نام

Seyed Mehdi

ساير عناصر نام

Dariush

ساير عناصر نام

Mahmood

کد نقش

Thesis advisor

کد نقش

Thesis advisor

کد نقش

Consulting advisor

کد نقش

Consulting advisor

عنصر شناسه اي

Tabriz

کشور

ایران

سازمان

Central Library of Tabriz University

تاريخ عمليات

20230920

شماره بازیابی

ارشد پایاننامه QL351.R3 1402

نام الکترونيکي

Ali Raheem Ali Aloraifi

ارتباط براي تسهيلات دسترسي

عبادی

فرمت انتشار

e

نوع ماده

TL

کد کاربرگه

276903

سطح دسترسي

a

تكميل شده

Y