عنوان

انتقال ژن ‮‭codA‬ به گیاه کلزا جهت مقاومت به تنش شوری

شماره

‭۱۱۶۲۳پ‬

زبان متن نوشتاري يا گفتاري و مانند آن

per

عنوان اصلي

انتقال ژن ‮‭codA‬ به گیاه کلزا جهت مقاومت به تنش شوری

نام نخستين پديدآور

/سعید مهدوی اقدم

نام ناشر، پخش کننده و غيره

: دانشکده کشاورزی

نام خاص و کميت اثر

‮‭۱۰۷‬ص‬

متن يادداشت

چاپی

جزئيات پايان نامه و نوع درجه آن

کارشناسی ارشد

نظم درجات

در رشته بیوتکنولوژی کشاورزی

زمان اعطا مدرک

‮‭۱۳۹۲/۰۶/۲۵‬

کسي که مدرک را اعطا کرده

تبریز

متن يادداشت

کلزا به خاطر داشتن سطوح پایین اسید چرب‌صهای اشباع از گیاهان روغنی مهم محسوب می‌صشود .تنش شوری یکی از عوامل محدود کننده در رسیدن گیاهان به حداکثر پتانسیل ژنتیکی خود می‌صباشد .با توجه به افزایش جمعیت جهان و نیاز روز افزون به غذا، استفاده از گیاهان تراریخته متحمل به تنش‌صها یکی از راهبردهای موثر در این زمینه می-باشد .افزایش محتوی سلولی برخی از ترکیبات اسمز نگهدار از طریق مهندسی ژنتیک موجب بهبود تحمل گیاهان به تنش‌صهای غیرزیستی از جمله شوری شده است .از مهمترین این ترکیبات اسمزنگهدار گلایسین بتائین می‌صباشد که آنزیم کولین اکسیداز ‮‭(codA)‬ با تبدیل کولین به گلایسین بتائین از آنزیم‌صهای مهم در این مسیر می‌صباشد .هدف از این طرح انتقال ژن کولین اکسیداز به گیاه کلزا رقم ‮‭Orient‬ برای افزایش تحمل آن به شوری می‌صباشد .از ژن ‮‭codA‬ تحت کنترل پیشبر ‮‭۳۵S‬ همسانه سازی گردیده بود استفاده گردید .پلاسمید دوگانه حاوی ژن پس از تکثیر و تایید نهایی در باکتری ‮‭E.coli‬ به آگروباکتریوم نژاد ‮‭GV۳۱۰۱‬ منتقل گردید .پس از آنالیز مولکولی باکتری‌صهای تراریخته برای حضور پلاسمید در آن از طریق‮‭PCR‬ ، از آن‌صها برای تراریخته کردن کلزا استفاده شد .در این طرح برای انتقال ژن، دو ریزنمونه کوتیلدون و هیپوکوتیل گیاه به همراه غلظت‌صهای ‮‭۴/۰‬ و ‮‭۶/۰‬ آگروباکتریوم در حضور نیترات نقره به میزان ‮‭۵‬ میلی‌صگرم در لیتر در مورد مطالعه قرار گرفت .نتایج حاصل، نشان داد که استفاده از ریزنمونه هیپوکوتیل برای تراریختی کلزا در این آزمایش بهتر از کوتیلدون بود .بیشترین میزان تراریختی با استفاده از ریزنمونه هیپوکوتیل ‮‭۲۰‬ درصد بدست آمد .شاخساره‌صهای تراریخته برای ریشه‌صزایی به محیط ریشه‌صزایی منتقل شدند .گیاهان تراریخته احتمالی شده در حضور ماده گزینشگر موفق به القا و گسترش ریشه شدند در حالی که گیاهان غیرتراریخته نکروزه شده و از بین رفتند .از کل گیاهان باززا شده تعداد ‮‭۴۰‬ گیاه تولید ساقه و در نهایت تعداد ‮‭۳۴‬ گیاه تولید ریشه کردند .گیاهان ریشه دار شده پس از استقرار در گلخانه با استفاده از آغازگرهای اختصاصی برای ژن ‮‭nptII‬ مورد ارزیابی قرار گرفتند .نتایج حاصل نشان داد که تعداد ‮‭۲۱‬ گیاه سازواره ژنی را دریافت کرده اند .گیاهان برای گلدهی تحت مراقبت های ویژه قرار گرفتند و پس از بذردهی، بذور نسل اول آنها جمع آوری گردید

متن يادداشت

transgenic plants became necrotic and died. More than 40 putative transgenic plant were regenerated, but 34 of the produce roots. After hardening of plants in greenhouse, there analyzed for presence of transgene using nptII primers. The results showed that 21 of were PCR positive. The seed of plants harvested for next generation analysis-Canola with low levels of saturated fatty acids is an important oil plant. Salinity is one of the factors in restricting plants to reach their maximum genetic potential. Given the increase in world population and the increasing need for food, the use of stress tolerant transgenic plants in the field is one of the most effective strategies. Increase the cellular content of osmotic compounds through genetic engineering and improved the tolerance of plants to abiotic stresses such as salinity. The most important of these compounds is glycine betaine. Choline oxidase enzyme by converting choline to glycine betaine, is the key enzymes in this pathway. The purpose of this project is transformation of canola with codA gene for salt tolerance. In this study the codA gene under the control of 35S promoter was implied. After proliferation and final confirmation of plasmid containing gene in E.coli, it transferred to Agrobacterium GV3101 strain. After the molecular analysis of transgenic bacteria for the presence of the plasmid by PCR, it was used for transformation of canola. In this project the effect of cotyledon and hypocotyl explants with 0/4 and 0/6 ODs of agrobacterium investigated for genetic transformation of canola. The results showed that use of hypocotyl explants was better than the cotyledons. The highest transgenic plants were produced by using hypocotyl explants that was 20 . Transgenic shoots were transferred to rooting medium for rooting. Transgenic plants in the presence of the selection agent and developed roots while the non

مستند نام اشخاص تاييد نشده

مهدوی اقدم، سعید

مستند نام اشخاص تاييد نشده

دورانی علیایی، ابراهیم، استاد راهنما

مستند نام اشخاص تاييد نشده

ولیزاده، مصطفی، استاد مشاور

يادداشت عمومي

سیاه و سفید

وضعیت فهرست نویسی

نمایه‌سازی قبلی