عنوان

مطالعه تاثیر رزوراترول و کرستین بر روی ساختار و عملکرد آنزیم کاتالاز کبد گاوی به روش تئوری و تجربی

شماره

‭۱۷۴۴۲پ‬

زبان متن نوشتاري يا گفتاري و مانند آن

per

عنوان اصلي

مطالعه تاثیر رزوراترول و کرستین بر روی ساختار و عملکرد آنزیم کاتالاز کبد گاوی به روش تئوری و تجربی

نام نخستين پديدآور

/سمانه رشتبری خروانق

نام ناشر، پخش کننده و غيره

: علوم طبیعی

تاریخ نشرو بخش و غیره

، ‮‭۱۳۹۶‬

نام توليد کننده

، افشاری

متن يادداشت

چاپی

جزئيات پايان نامه و نوع درجه آن

کارشناسی ارشد

نظم درجات

علوم جانوری

زمان اعطا مدرک

‮‭۱۳۹۶/۰۴/۲۴‬

کسي که مدرک را اعطا کرده

تبریز

متن يادداشت

کاتالاز ‮‭(H۲O۲:H۲O۲‬ اکسیدوردوکتاز،( ‮‭EC ۱.۱۱.۱.۶‬ ، به عنوان یکی از اجزای اصلی سیستم دفاع آنتی اکسیدانی بدن، یک آنزیم فعال می‌صباشد که در همه‌صی موجودات زنده وجود دارد .این آنزیم بافت‌صهای انسانی و حیوانی را در مقابل اثرات سمی پراکسید هیدروژن و استرس اکسیداتیو محافظت می‌صکند .نقص در کاتالاز باعث بیماری‌صهای مختلف از جمله دیابت، سرطان، بیماری‌صهای قلبی-عروقی و ... می‌صشود .یک آنزیم چهار زیرواحدی می‌صباشد که هر زیر واحد، خود دارای چهار دومین آلفا هلیکس‮‭C‬ -ترمینال، بشکه‌صی بتا، دومین بسته‌صبندی کننده و بازوی نازک‮‭N‬ -ترمینال می‌صباشد .به هر زیر واحد یک مولکول) ‮‭NADPH‬ به عنوان کوفاکتور (متصل می‌صشود .گروه هم به عنوان گروه پروستتیک در جایگاه فعال آنزیم وجود دارد .رزوراترول، به عنوان یک ترکیب طبیعی پلی فنول، به خانواده‌صی استیلبنوئیدها تعلق دارد و توسط گیاهان در پاسخ به زخم، آلودگی با حشرات، حمله‌صی پاتوژن‌صها و رو به رو شدن با اشعه‌صی ماوراءبنفش تولید می‌صشود .کرستین یک ترکیب طبیعی پلی فنول، از خانواده‌صی فلاونوئیدها می‌صباشد که به عنوان متابولیت ثانویه توسط گیاهان مختلف تولید می‌صشود .این ترکیبات به فراوانی در انواع میوه‌صها و سبزیجات وجود دارند و جزئی از رژیم غذایی انسان را شامل می‌صشوند .هدف از کار پژوهشی حاضر، بررسی تاثیر ترکیبات رزوراترول و کرستین بر روی ساختار و فعالیت آنزیم کاتالاز کبد گاوی، به عنوان مدل آنزیم‌صهای آنتی اکسیدان، می‌صباشد .فعالیت آنزیم کاتالاز، با استفاده از دستگاه اسپکتروفوتومتر و کاهش جذب در طول موج ‮‭۲۴۰‬ نانومتر مورد سنجش قرار گرفت .سپس فعالیت آنزیم در حضور رزوراترول و کرستین سنجش شد و مقادیر ‮‭Km‬ و ‮‭Vm‬ تعیین شدند و با پارامترهای سینتیکی آنزیم تیمار نشده مورد مقایسه قرار گرفتند و نوع مهار تخمین زده شد .با استفاده از اسپکتروسکوپی جذب مرئی-فرابنفش‮‭vis)- (UV‬، فلورسانس، فلورسانس هم زمان و دورنگ نمایی دورانی‮‭(CD)‬ ، تغییرات ساختاری آنزیم در حضور غلظت‌صهای مختلف رزوراترول و کرستین بررسی شد .با داکینگ مولکولی، بهترین محل اتصال ترکیبات به آنزیم پیش بینی شدند .مطالعات سینتیکی نشان دادند که آنزیم در اثر برهمکنش با این ترکیبات فعالیت خود را از دست می‌صدهد و مهار آنزیم اتفاق می‌صافتد .مکانیسم مهار برای رزوراترول، از نوع نارقابتی و برای کرستین، از نوع غیررقابتی به دست آمد .مطالعات اسپکتروسکوپیک نشان دادند که هر دو ترکیب باعث تغییرات ساختاری در آنزیم می‌صشوند .فلورسانس ذاتی آنزیم در برهمکنش با این ترکیبات، با مکانیسم استاتیک خاموش می‌صشود .بررسی‌صهای ترمودینامیکی نشان دادند که فقط یک جایگاه اتصال برای این ترکیبات در ساختمان کاتالاز وجود دارد .مطالعات داکینگ مولکولی بهترین محل اتصال این ترکیبات بر روی کاتالاز را در جایگاهی دور از جایگاه فعال آنزیم نشان می‌صدهدکه نتایج مطالعات تئوری تایید کننده‌صی نتایج آزمایشگاهی بودند .بنابراین استفاده‌صی بیش از حد از آنتی اکسیدن‌صها نیز می‌صتواند تهدید کننده‌صی سلامتی باشد

متن يادداشت

Catalase (H2O2:H2O2 oxidoreductase, EC 1.11.1.6) is one of the most important components of the antioxidative defense system for protection of human and animal tissues from the toxic effects of hydrogen peroxide (H2O2) and reactive oxygen species (ROS). Catalase deficiency and oxidative stress have been detected in association with various disorders including hypertension, vitiligo, diabetes mellitus, Alzheimers disease, acatalasemia and cancer. Catalase is a tetrameric enzyme. It comprises four identical subunits with one heme per subunit. Each subunit consists of four domains: an eight-stranded -barrel, -helical domain, N-terminal threading arm and wrapping loop. Catalase binds NADPH at a cleft between the -barrel and helical domain. Resveratrol (3, 5, 4-trihydroxy-stilbene; RES) is a biologically active phytoallexin found in grapes and other food products. Quercetin (3,5,7,3,4-pentahydroxyflavone, QUE), a polyphenolic flavonoid, widely found in fruits, vegetables and it is used as an ingredient in foods and beverages. The aim of this work was to investigate the possible effects of RES and QUE on the structure and catalytic function of BLC. BLC activity was measured spectrophotometrically using the decrease in H2O2 maximum absorbance at 240 nm (A240) due to its degradation by catalase. Also, in this work, the interaction between RES and QUE with bovine liver catalase (BLC) was investigated using multi-spectroscopic methods including UV-vis absorption, fluorescence and circular dichroism (CD) spectroscopy and molecular docking studies. In vitro kinetic studies showed that QUE inhibits BLC activity through non-competitive manner and RES inhibits BLC activity through uncompetitive mechanism. Spectroscopic studies indicated that RES and QUE change BLC structure and these compounds can quench fluorescence intensity of BLC through static mechanism.

مستند نام اشخاص تاييد نشده

رشتبری خروانق، سمانه

مستند نام اشخاص تاييد نشده

دهقان، غلامرضا، استاد رهنما

مستند نام اشخاص تاييد نشده

جویبان، ابوالقاسم، استاد مشاور

يادداشت عمومي

سیاه و سفید

وضعیت فهرست نویسی

نمایه‌سازی قبلی