بررسی اثر جایگزینی۱۴۳ - miRدر مهار متاستاز در رده سلولیMB۴۶۸ - MDA
نام نخستين پديدآور
/فاطمه توانافر
وضعیت نشر و پخش و غیره
نام ناشر، پخش کننده و غيره
: علوم طبیعی
تاریخ نشرو بخش و غیره
، ۱۳۹۵
نام توليد کننده
، افشاری
یادداشتهای مربوط به نشر، بخش و غیره
متن يادداشت
چاپی
یادداشتهای مربوط به مندرجات
متن يادداشت
Breast cancer is the most common cancer among women and the second most common cause of death from cancer. miRNAs are small ۱۸-۲۵ nucleotide, single-stranded noncoding RNA molecules that negatively regulate gene expression by binding to the (۳-UTR) of target mRNA molecules, which results in either degradation of the transcript or inhibition of translational. miR-۱۴۳ is down regulated in breast cancer and expression of E-cadherin.MMP-۹ CXCR۴, vimentin, is change. These genes are involved in migration and metastasis. One of the therapeutic targets in breast cancer is miRNA expression levels of tumor suppressor return to normal levels in breast cancer cells. That is done by miRNA replacement therapy techniques. The aim of this study was to investigate the effect of miR-۱۴۳ replacement on the viability and migration in the MDA-MB-۴۶۸ cell line. Material and methods:MDA-MB-۴۶۸ were cultured in RPMI with FCS ۱۰. were cultured at a temperature of ۳۷ C and CO۲ ۵
یادداشتهای مربوط به پایان نامه ها
جزئيات پايان نامه و نوع درجه آن
کارشناسی ارشد
نظم درجات
علوم جانوری
زمان اعطا مدرک
۱۳۹۵/۱۱/۳۰
کسي که مدرک را اعطا کرده
تبریز
یادداشتهای مربوط به خلاصه یا چکیده
متن يادداشت
سرطان پستان رایجترین سرطان در میان زنان و دومین علت رایج مرگ ناشی از سرطان در بین زنان است .عوامل ژنتیکی، عفونی، محیطی، اپیژنتیک وmiRNA ها در ایجاد این سرطان دخیل هستندmiRNA .ها مولکولهایRNA کوچک۱۸ - ۲۵نوکلئوتیدی هستند که با اتصال به mRNA هدف در تنظیم بیان ژن نقش اساسی دارند .این میکروRNA ها به دو دسته انکوساپرسور و انکوژن دستهبندی شدهاند .ازmiRNA های تومورساپرسور که در سرطان پستان دچار کاهش بیان میشود۱۴۳ -mirمیباشد .در نتیجه کاهش بیان این miRNA بیان ژنهایcadherin- E ،MMP- ۹، CXCR۴و Vimentin دچار تغییر میگردد . این ژنها در مهاجرت و متاستاز نقش کلیدی دارند .یکی از اهداف درمانی در سرطان پستان بازگرداندن میزان بیانmiRNA های تومورساپرسور به سطح طبیعی در سلولهای سرطانی پستان میباشد که توسط تکنیک miRNA replacement therapy انجام میگیرد .مواد و روشها : برای این منظور ابتدا سلولهای سرطانی پستان در محیط کشت RPMI حاوی FBS ۱۰ در دمای ۳۷ C و CO۲ ۵ کشت داده شد .سپس ژن۱۴۳ - miRهمراه وکتور وjetPEIض in vitro DNA TransfectionReagent به محیط کشت اضافه گردید .انکوباسیون انجام گرفته، بعد از گذشت زمان لازم استخراج RNA صورت گرفته و پس از سنتز cDNA میزان بیان۱۴۳ - miRو ژنهایCXCR۴ -cadherin ,MMP- ,E ۹و VimentinبوسیلهPCR - qRTاندازه گیری شد .میزان اثر سایتوتوکسیک۱۴۳ - miRNAاز طریق آزمایش MTT مورد بررسی قرار گرفت .میزان مهاجرت و متاستاز سلولهای سرطانی بعد از ترانسفکت۱۴۳ - miRبوسیله آزمایش Wound healing assay بررسی گردید .نتایج : نتایج ما درRT PCR - qنشان داد که با جایگزینی۱۴۳ - miRتوسط وکتور، میزان بیان ژن۱۴۳ - miRNAو ژنcadherin- E، افزایش یافته و بیان ژنهای۹- MMP،CXCR۴ و Vimentinبعد از ترانسفکت کاهش می یابد .همچنین نتایج تست MTT حاکی از کاهشviability بعد از ترانسفکت۱۴۳- miRبود.نتیجه آزمایش Wound healing assayکاهش مهاجرت سلولهای رده سلولی۴۶۸ -MB- MDAرا بعد از جایگزینی۱۴۳ - miRنشان داد .نتیجه گیری :نتایج این مطالعه نشان داد که۱۴۳ -miRNAدر متاستاز سرطان پستان نقش مهمی در رشد و مهاجرت سلولی دارد .مولکول۱۴۳ - miRNAو تکنیک جایگزینی آن میتواند کاندید مناسبی برای اهداف درمانی در آدنو کاسینومای پستان باشد .
متن يادداشت
in vitro DNA Transfection Reagent. After passing the required time the expression of miR-۱۴۳ and E-cadherin,MMP-۹,CXCR۴ and vimentin were measured by q-RT PCR. The growth and proliferation of cancer cells was evaluated by MTT technique. The migration and invasion of cancer cells after transfected miR-۱۴۳ was evaluated by testing Wound healing assay. Results: Our results in qRT-PCR present increasing the expression of miR-۱۴۳ and E-cadherin and decreased expression of MMP-۹, CXCR۴ and vimentin after transfection. MTT results after transfection with miR-۱۴۳, showed a significant increase death rate .The results of Wound healing assay test shows that miR-۱۴۳ suppresses the migration and invasion of Breast cancer cell lines in vitro. Conclusion: The results showed that miRNA۱۴۳ play an important role in cell growth and migration during breast cancer development and metastasis, and it can be a candidate as a therapeutic molecule in microRNA replacement therapy of breast adenocarcinoma ضBreast cancer is the most common cancer among women and the second most common cause of death from cancer. miRNAs are small ۱۸-۲۵ nucleotide, single-stranded noncoding RNA molecules that negatively regulate gene expression by binding to the (۳-UTR) of target mRNA molecules, which results in either degradation of the transcript or inhibition of translational. miR-۱۴۳ is down regulated in breast cancer and expression of E-cadherin.MMP-۹ CXCR۴, vimentin, is change. These genes are involved in migration and metastasis. One of the therapeutic targets in breast cancer is miRNA expression levels of tumor suppressor return to normal levels in breast cancer cells. That is done by miRNA replacement therapy techniques. The aim of this study was to investigate the effect of miR-۱۴۳ replacement on the viability and migration in the MDA-MB-۴۶۸ cell line. Material and methods:MDA-MB-۴۶۸ were cultured in RPMI with FCS ۱۰ were cultured at a temperature of ۳۷ C and CO۲ ۵ .Then miR-۱۴۳ gene transfected with vectors and jetPEI
نام شخص به منزله سر شناسه - (مسئولیت معنوی درجه اول )