عنوان

مطالعه موتاسیون های اگزون شماره یک از ژن ‮‭p۵۳‬ درلنفوسارکوم گاو به روش واکنش زنجیره ای پلی مراز و تعیین توالی آن

شماره

‭۸۶۲۴پ‬

زبان متن نوشتاري يا گفتاري و مانند آن

per

عنوان اصلي

مطالعه موتاسیون های اگزون شماره یک از ژن ‮‭p۵۳‬ درلنفوسارکوم گاو به روش واکنش زنجیره ای پلی مراز و تعیین توالی آن

نام نخستين پديدآور

/مریم نوروزی علی‌آباد

نام ناشر، پخش کننده و غيره

: دامپزشکی

نام خاص و کميت اثر

‮‭۸۴‬ص‬

متن يادداشت

چاپی

متن يادداشت

بصورت زیرنویس

جزئيات پايان نامه و نوع درجه آن

دکترای حرفه ای دامپزشکی

نظم درجات

علوم درمانگاهی

زمان اعطا مدرک

‮‭۱۳۹۱/۰۶/۲۵‬

کسي که مدرک را اعطا کرده

تبریز

متن يادداشت

بیماری لکوز آنزوتیک گاو یک بیماری ویروسی در گاوهای بالغ است که مشخصه آن دگرگونی نئوپلاستیک لنفوسیت‌صها در بافت های لنفی بویژه عقده‌صهای لنفاوی است .شیوع عفونت در گله های گاوان بخصوص گاوهای شیری بالا است اما فقط تعداد کمی از این گاوان نشانه های ابتلاء به لنفوسارکوم را نشان می‌صدهند .موتاسیون در ژن ‮‭p۵۳‬ نقش مهمی در پاتوژنز لکوز آنزوتیک گاوان بازی می‌صکند .مطالعات قبلی حاکی از آن است درگاوصهای آلوده به این ویروس، که نشانه های ابتلاء به تومور را نشان می دادند و تکثیر غیرعادی لنفوسیت‌صهای ‮‭B‬ را داشتند، ژن ‮‭p۵۳‬ جهش یافته بود اما در خون محیطی گاوهای سالم و نیز گاوهای حامل یا به ظاهر سالم، جهش در این ژن یافت نشد .در این پایان‌صنامه برآن شدیم موتاسیون‌صهای رخ‌صداده در اگزون شماره یک از ژن ‮‭p۵۳‬ را در گاوهای مبتلا به لکوز آنزوتیک به روش زنجیره پلی‌صمراز ‮‭(PCR)‬مطالعه کرده و توالی آن را تعیین کنیم .بمنظور اجرای این پروژه تعداد ‮‭۲۶‬ نمونه بلوک پارافینه مربوط به لنفوسارکوم گاو از آرشیو بخش پاتولوژی دانشکده دامپزشکی تبریز، مورد استفاده قرار گرفت .لام‌صهای تهیه شده از بلوک‌صهای پارافینه، به وسیله میکروسکوپ نوری، به منظور تایید وجود تومور، تشخیص نوع آن، تعیین اندازه لنفوسیت‌صهای توموری شده و تعیین درجه بدخیمی آن مورد مشاهده قرار گرفتند و تصاویر مربوط به لام‌صها، بوسیله دوربین‮‭۲(Japan) -TVO.۵XC- OLYMPUS DP۱۲,U‬تهیه شد .سپس استخراج ‮‭DNA‬ این نمونه‌صها به ‮‭۲‬ روش جوشاندن و استفاده از کیت ژل سیلیکا انجام شد و پس از ارزیابی غلظت ‮‭DNA‬ موجود به وسیله الکتروفورز، تکثیر بخشی از ژن ‮‭p۵۳‬ با ‮‭PCR‬ انجام گرفت .محصول این واکنش با وزن حدود ‮‭۵۰۰‬ جفت باز به روش‮‭۲‬ طرفه سنجر تعیین توالی شد .نتایج سکانس کردن با استفاده از نرم‌صافزارهای ‮‭BLAST‬ مورد جستجوی همانندی نوکلئوتیدی قرار گرفت .در بین نمونه‌صهای مورد مطالعه، ابتلاء ‮‭۸‬ مورد از گاوان به لکوز آنزئوتیک از نظر هیستوپاتولوژیکی مورد تائید قرار گرفت .در بین لنفوسارکوم‌صهای تشخیص داده شده، ازنظر انتشار لنفوسیت های توموری، ‮‭۷‬ مورد دارای الگوی انتشار‮‭Diffuse‬ ، ‮‭۱‬ مورد فولیکولار، ازنظر اندازه لنفوسیت‌صها، ‮‭۴‬ مورد دارای لنفوسیت‌صهای بزرگ، ‮‭۱‬ مورد لنفوسیت‌صهای کوچک، ‮‭۳‬ مورد مخلوط لنفوسیت‌صهای بزرگ و کوچک، ازنظر هسته، ‮‭۴‬ مورد دارای هسته شکافته و ‮‭۴‬ مورد دارای هسته غیرشکافته و میانگین اندیس میتوز ‮‭۱۲۵/۲‬ بود .از ‮‭۸‬ مورد ذکر شده، یک مورد دارای بدخیمی پائین و هفت مورد دارای بدخیمی متوسط بودند و درنهایت نوع لنفوسارکوم ها از نظر تشخیص نهایی یک مورد‮‭diffuse large noncleaved lymphosarcoma‬ ، سه مورد.‮‭diffuse large cleaved L‬ ، سه مورد .‮‭diffuse mixed L‬ و یک مورد .‮‭follicular small cleaved L‬ بود .نتایج مطالعه مولکولی حاکی از شباهت بسیار زیاد توالی‌صهای بدست آمده با بخشی از ژن ‮‭p۵۳‬ ثبت شده در بانک جهانی ژن بود .این توالی‌صها به شکل ‮‭In Silico‬ مورد ترجمه قرار گرفت و نتایج همانندی توالی اسیدهای آمینه، توسط نرم‌صافزارهای موجود در سایت ‮‭expasy‬ مورد مقایسه قرار گرفت .در نمونه‌صهای کار شده هیچ جهشی در اگزون شماره یک از ژن ‮‭P۵۳‬ مشاهده نشد

متن يادداشت

way sanjer's method. Histopathologically, lymphosarcoma were confirmed in 8 out of 26 cases: 7 cases were diffuse and 1 was follicular lymphosarcoma and 4, 1 and 3 cases were lymphoblastic, lymphocytic and mixed lymphosarcoma, respectively. Cleaved nucleous was seen in 4 cases, and average of mitotic index was 2/125. One case had low grade and the others had intermediate grade. Finally, 1, 2, 3 and 1 cases were diagnosed as diffuse large noncleaved, diffuse large cleaved, diffuse mixed and follicular small cleaved lymphosarcomas, respectively. The result of sequencing similarity was identified by using the nucleotide BLAST software and there are no mutations in exon 1 of P53 gene-2 (Japan). The DNA sample was extracted by boiling method and using silica gel extraction kit, and the extracted DNA was studied by PCR and its sequence was determined. The samples were found to positive with a 500bp amplicon by using two-TVO.5XC-CH30 , Japan) for diagnosis of size and distribution of lymphocytes, grade and malignancy, and the images were digitally made by Olympus DP12, U-lymphocytes having the p53 mutation, however the mentioned mutation was not observed in the peripheral blood of healthy and carrier ones. In this study, a mutation in exon 1of the p53 gene in cattle with Enzootic leukosis was studied by polymerase chain method (PCR) and its sequence was determined. For this purpose, twenty six samples of paraffin tissue blocks of infected cows were obtained from Archive of Pathology section Faculty of Veterinary Medicine University of Tabriz. The slides were prepared from paraffin blocks, and were studied by the light microscope (Olympus-infected cow in the tumor stage had abnormally proliferating monoclonal B-Enzootic bovine leukosis is a viral disease in adult cattle that is characterized by neoplastic transformation of lymphocytes in lymph nodes. It is well known that the prevalence of infection in dairy cattle is high, but in only a few of the cattles develop lymphosarcoma. Mutations in the p53 gene play an important role in the pathogenesis of enzootic bovine leukosis. Previous researches suggest that the BLV

مستند نام اشخاص تاييد نشده

نوروزی علی‌آباد، مریم

مستند نام اشخاص تاييد نشده

جعفری جوزانی، رضی‌اله، استاد راهنما

مستند نام اشخاص تاييد نشده

اشرفی هلان، جواد، استاد راهنما

يادداشت عمومي

سیاه و سفید

وضعیت فهرست نویسی

نمایه‌سازی قبلی