بهینهسازی رشد و نمو بافتها و سلولهای کشت شده Alkanna orientalis (L.) Boiss جهت تولید مشتقات نفتوکینون
نام نخستين پديدآور
/سپیده مهجوری
وضعیت نشر و پخش و غیره
نام ناشر، پخش کننده و غيره
: علوم طبیعی
مشخصات ظاهری
نام خاص و کميت اثر
۸۳ ص
یادداشتهای مربوط به نشر، بخش و غیره
متن يادداشت
چاپی
یادداشتهای مربوط به پایان نامه ها
جزئيات پايان نامه و نوع درجه آن
کارشناسی ارشد
نظم درجات
زیست شناسی علوم گیاهی
زمان اعطا مدرک
۱۳۹۰/۱۱/۲۵
کسي که مدرک را اعطا کرده
تبریز
یادداشتهای مربوط به خلاصه یا چکیده
متن يادداشت
Alkanna orientalis گیاه دارویی از خانواده گلگاوزبان است که همانند تعدادی از گونهصهای متعلق به این خانواده حاوی رنگیزه قرمز رنگ شامل آلکانین و مشتقات آن در پوست ریشه خود میصباشد .در طب سنتی ریشه-های قرمز رنگ این گیاه به عنوان یک داروی گیاهی برای درمان بیماریصهایی همچون زخمصها و سوختگیصها مورد استفاده قرار میصگیرد .آلکانین و شیکونین ترکیبات دارویی بالقوه با یک طیف وسیع از فعالیتصهای زیستی همچون اثرات ضد التهابی، آنتی اکسیدانی، ضد باکتری، ضد ویروس و ضد تومور میصباشند .این دسته از ترکیبات به عنوان اجزاء فعال برخی از مواد دارویی و آرایشی میصباشند و نیز به عنوان رنگصدهنده در صنایع غذایی مورد استفاده قرار میصگیرند .در این پژوهش در مرحله اول جهت دستیابی به لاینصهای سلولی مناسب برای کشت سوسپانسیون سه ریزنمونه برگص لپهصای، هیپوکوتیل و ریشه در سطوح مختلف هورمونی شامل کینتین) در دو سطح ۱ و ۲ میلیصگرم در لیتر (و(- ۲,۴ Dدر سه سطح ۰/۲، ۱ و ۲ میلیصگرم در لیتر (در شرایط تاریکی در محیط کشت جامد B۵ مورد کشت قرار گرفت .درصد پینهصزایی، پینهصهای دارای رنگیزه، قطر و وزن تر پینه در هر واکشت اندازهصگیری گردید .بر اساس نتایج بدست آمده از تجزیه واریانس و مقایسه میانگین صفات مورد مطالعه، هر سه ریزنمونه در سطوح هورمونی مختلف درصد پینهصزایی قابل قبولی داشتند .بطور کلی پینهصهای حاصل از محیط کشتصهای حاوی تیمارهای هورمونی مختلف به لحاظ تولید رنگیزه ضعیف عمل کردند .ریزنمونهصهای برگ لپهصای و هیپوکوتیل به لحاظ وزن تر عملکرد بهتری نسبت به ریشه نشان دادند .در مرحله دوم جهت تولید رنگیزه توسط کشت سلول یک سیستم کشت دو مرحلهصای یعنی مرحله اول شامل تکثیر سلولصها در محیط کشت رشدی (B۵) و مرحله دوم شامل تولید رنگیزه در محیط کشت تولید (M۹) با استفاده از تکنیک استخراج در محل به عنوان یک سیستم کارآمد جهت برقراری یک شرایط مناسب برای القاء و استخراج رنگیزه از محیط کشت بکار گرفته شد .پینهصهای ترد و شکننده حاصل از ریزنمونه برگ لپهصای در محیط کشت حاوی ۲ میلیصگرم در لیتر کینتین و ۱ میلیصگرم در لیتر۲,۴ - Dبه دلیل رشد مناسب جهت برقراری کشت سوسپانسیون انتخاب گردید و به محیط کشت مایع B۵ حاوی همان مقادیر هورمونی انتقال یافت و در تاریکی نگهداری شد .پس از برقراری کشت سوسپانسیون، یک سیستم کشت سوسپانسیون دو فازی مایع-مایع برای القاء سنتز رنگیزه نفتوکینونی با استفاده از پارافین مایع به عنوان جاذب به کار رفت .بر اساس نتایج بدست آمده سیستم کشت سوسپانسیون مایع دو فازی بطور مؤثری باعث تولید رنگیزه شد .عصارهn -هگزان کشت سوسپانسیون با ادامه چکیده استفاده از HPLC آنالیتیکال مورد ارزیابی قرار گرفت .به دنبال آن متابولیتصهای ثانویه عمده با استفاده از HPLC پرهصپاراتیو جداسازی شد و ساختار شیمیایی ترکیبات توسط طیفصگیریUV ،NMR - ۱HوNMR -۱۳Cشناسایی گردید .دزصاکسی شیکونوفوران و استات شیکونین به عنوان ترکیبات شیمیایی اصلی رنگیزه شناسایی گردید .
متن يادداشت
Alkanna orientalis (L.) Boiss. is a medicinal plant of the family Boraginaceae. This plant, like some other members of the family, accumulates alkannin and its derivatives in the bark of root. Therefore, the roots of the plant are well-known in traditional medicine as a remedy for some complaints such as burns and wounds. Alkannin and shikonin are potent pharmaceutical substances with a wide spectrum of biological properties as anti-inflammatory, antioxidant, antibacterial, antiviral and antitumor. These groups of compounds comprise the active ingredients of several pharmaceutical and cosmetic preparations, and also are used as food colorants. In this study, at the first step to achieve appropriate cell lines for suspension culture, three types of explants from cotyledon, hypocotyl and root were incubated on B5 solified medium suppplemented with different amounts of 2,4-dicholorophenoxyacetic acid (2,4-D) (0.2, 1 and 2 mg/L) and kinetin (1 and 2 mg/L) in dark. Percentage of callus production, pigmented callus production, callus diameter and fresh weight were measured in each subculture and analyzed using factorial based completely randomized design. Statistical analysis demonstrated that calli initiation and production were suitable in all treatments. Generally, callus tissues from different treatments were weak in terms of pigment production. Moreover, hypocotyl and cotyledon explants had more fresh weight than root explants. At the second stage, to production of pigment, a two-stage culture system, i.e. (i) multiplying cells in growth medium (B5); and (ii) producing pigment in production medium (M9) by using an in situ extraction approach were used to establish an appropriate condition for induction of pigments and its extraction from the suspension culture. For initiation of the cell suspension culture, approximately 2 g of fragile callus from cotyledon explants was transferred into the liquid B5 medium supplemented with 1 mg/L 2,4-D and 2 mg/L kinetin and were incubated in the dark on a rotary shaker. Subsequently, an in vitro two-liquid-phase system suspension culture was established to elicit naphthoquinone pigments using liquid paraffin as absorbent. On the basis of our results, the two-liquid-phase system suspension culture resulted effectively in the induction of pigments. The n-hexane extract of cell suspension culture were evaluated by analytical HPLC. Afterwards, the main secondary metabolites were separated by preparative HPLC and their structures were elucidated by UV, 1H and 13C-NMR spectroscopy. Accordingly, shikonin acetate and deoxyshikonofuran were identified as two chemical compounds of the pigment
نام شخص به منزله سر شناسه - (مسئولیت معنوی درجه اول )