عنوان

بررسی اثر‮‭۳p -۱۴۲- miR‬و داروی ‮‭Docetaxel‬ در القای آپوپتوز و مهار رشد و مهاجرت سل لاین سرطان سینه,‮‭Evaluation of the effect of miR-۱۴۲-۳p and Docetaxel On induction of apoptosis and inhibition of growth and migration of breast cancer cell line‬

شماره

‭۲۱۵۹۰پ‬

زبان متن نوشتاري يا گفتاري و مانند آن

per

عنوان اصلي

بررسی اثر‮‭۳p -۱۴۲- miR‬و داروی ‮‭Docetaxel‬ در القای آپوپتوز و مهار رشد و مهاجرت سل لاین سرطان سینه

عنوان اصلي به زبان ديگر

‮‭Evaluation of the effect of miR-۱۴۲-۳p and Docetaxel On induction of apoptosis and inhibition of growth and migration of breast cancer cell line‬

نام نخستين پديدآور

/راضیه دهقان

نام ناشر، پخش کننده و غيره

: دامپزشکی

تاریخ نشرو بخش و غیره

، ‮‭۱۳۹۸‬

نام توليد کننده

، میرزائی

نام خاص و کميت اثر

‮‭۱۴۳‬ص‬

متن يادداشت

چاپی - الکترونیکی

جزئيات پايان نامه و نوع درجه آن

دکتری

نظم درجات

دامپزشکی

زمان اعطا مدرک

‮‭۱۳۹۸/۰۴/۱۲‬

کسي که مدرک را اعطا کرده

تبریز

متن يادداشت

فارسی مقدمه :سرطان پستان شایع ترین نوع سرطان در میان زنان است و با وجود پیشرفت‌های اخیر در تشخیص و درمان، هنوز هم به صورت یک چالش عمده باقی مانده است‮‭miRNA‬ .ها بیان ژن‌ها را پس از رونویسی از طریق تجزیه ‮‭mRNA‬ یا مهار ترجمه آن‌ها، کنترل می‌کنند .در سرطان‌های مختلف میزان بیان این مولکول ها دستخوش تغییر شده و موجب بروز و پیشرفت سرطان می‌شوند‮‭۳p -۱۴۲-. miR‬به عنوان یکی از ‮‭miRNA‬ های مهم در کنترل فرآیندهای فیزیولوژیک و پاتولوژیک سلولی مطرح می‌باشد .مطالعات پیشین نشان داده‌اند که میزان بیان‮‭۳p -۱۴۲- miR‬در برخی از سرطان‌ها از جمله سرطان پستان، به عنوان یک ‮‭miRNA‬ سرکوب کننده‌ی تومور، کاهش می‌یابد .بازگرداندن میزان بیان ‮‭miRNA‬ سرکوب کننده تومور به سطح طبیعی در سلول‌های سرطانی را ‮‭miRNA replacement therapy‬می‌نامند و متعاقب آن‮‭miRNA‬ مورد نظر می‌تواند بیان ژن های هدف خود را به صورت طبیعی تنظیم نماید .با توجه به اثرات جانبی و زیان باری که روش شیمی درمانی به تنهایی برجای می‌گذارد، هدف اصلی در این مطالعه، بررسی اثر ترکیبی بازگردانی‮‭۳p -۱۴۲- miR‬و داروی شیمی درمانی ‮‭Docetaxel‬ در القای آپوپتوز و مهار رشد و مهاجرت سلولی و تأثیر بر ژن‌های مورد هدف‮‭Bach۱‬ ،‮‭KLF‬- ‮‭۴‬،‮‭Oct‬- ‮‭۴‬،‮‭Myc -c‬، ‮‭Sox۲‬ و‮‭HMGA۲‬ در سل لاین سرطان پستان بدخیم می‌باشد .مواد و روش‌ها‮‭IC۵۰‬ :داروی‮‭Docetaxel‬ در رده‌ی سلولی سرطان پستان‮‭۴۶۸ -MB- MDA‬با استفاده از تست ‮‭MTT‬ به دست آمد .برای بررسی میزان بیان‮‭۳p -۱۴۲- miR‬و ژن های مورد مطالعه که در فرآیندهای مهاجرت، تکثیر و تقسیم سلولی و متاستاز نقش دارند، قبل و بعد از انجام ترانسفکشن و انتقال ژن‮‭۳p -۱۴۲- miR‬به صورت ‮‭mimic‬ به همراه معرف ترانسفکت کننده‮‭jetPEI‬ در سلول‌های سرطانی، تکنیک‮‭PCR - qRT‬به کار گرفته شد .از تکنیک‌های ‮‭MTT ,Wound healing assay‬ و ‮‭Colony formation assay‬ به منظور بررسی میزان مهاجرت، تکثیر و تقسیم سلول‌های سرطانی و میزان زنده مانی آن‌ها و نیز تعداد کلونی‌های تشکیل شده بعد از ترانسفکشن‮‭۳p-۱۴۲- miR‬به تنهایی و همراه با داروی ‮‭Docetaxel‬استفاده گردید .همچنین تحقیقات فلوسایتومتری برای بررسی میزان القای آپوپتوز و نیز تجزیه و تحلیل چرخه سلولی با بهره گیری از رنگ آمیزی‌های‮‭FITC/PI- Annexin V‬و ‮‭DAPI‬ صورت گرفت .یافته‌ها :در این مطالعه نشان داده شد که بیان‮‭۳p -۱۴۲- miR‬در رده‌های سلولی سرطان پستان کاهش می‌یابد و بازگردانی‮‭۳p -۱۴۲- miR‬به همراه استفاده همزمان از داروی ‮‭Docetaxel‬ در رده‌ی سلولی‮‭۴۶۸-MB- ,MDA‬سبب کاهش معنادار زنده مانی و رشد و تکثیر سلول‌های سرطانی و نیز کاهش مهاجرت و تعداد کلونی‌های تشکیل شده از طریق کاهش سطح بیان ‮‭mRNA‬ ژن‌های هدف در مقایسه با گروه کنترل می‌شود .همچنین نتایج حاصل از روش فلوسایتومتری، افزایش القای آپوپتوز و توقف چرخه سلولی در مرحله‮‭G۱‬ و افزایش معنادار جمعیت سلولی در‮‭G۱- Sub‬را متعاقب تیمار و ترانسفکشن سلول‌های سرطانی نشان داد .علاوه بر این ‮‭IC۵۰‬ داروی ‮‭Docetaxel‬ با استفاده از تست‮‭MTT‬ در گروه تیمار شده با دارو، ‮‭nmol ۳۳/۱‬ بدست آمد و در استفاده‌ی ترکیبی از‮‭۳p-۱۴۲- miR‬و داروی‮‭Docetaxel‬ این عدد به ‮‭nmol ۱۱/۰‬ کاهش پیدا کرد که بیانگر کاهش مقدار دوز مؤثر داروی ‮‭Docetaxel‬ در این روش است .نتیجه گیری :نتایج بدست آمده نشان داد که‮‭۳p-۱۴۲- miR‬می تواند به عنوان یک سرکوب کننده‌ی تومور در سرطان پستان عمل کند و بازگرداندن بیان این‮‭miRNA‬ به سطح طبیعی در سلول های سرطانی‮‭۴۶۸-MB- MDA‬به همراه داروی ‮‭Docetaxel‬ می‌تواند به عنوان هدف درمانی بالقوه برای به حداقل رساندن رشد و تکثیر سلول‌های سرطانی، افزایش آپوپتوز و کاهش متاستاز سرطان پستان به سایر بافت‌ها از طریق کاهش بیان ژن‌های دخیل در متاستاز و مهاجرت سلول‌های سرطان پستان در نظر گرفته شود .به علاوه این ‮‭miRNA‬ با تقویت اثر داروی ‮‭Docetaxel‬ باعث کاهش دوز مؤثر دارو، کاهش هزینه و عوارض جانبی که روش شیمی درمانی به تنهایی برجای می‌گذارد، می‌شود .بنابراین می توان از آن به عنوان یک درمان مکمل به منظور افزایش حساسیت سلول‌های سرطانی به درمان و کاهش مقاومت دارویی استفاده کرد

متن يادداشت

‮‭transfection Reagent in cancer cells. Wound healing assay, MTT and Colony formation assay were used to evaluate the migration rate, cancer cell viability and proliferation and the number of colonies formed after transfection with miR-۱۴۲-۳p alone or in combination with Docetaxel. Flow cytometric studies were also used to determine the rate of induction of apoptosis and cell cycle analysis using Annexin V-FITC/PI and DAPI staining. Results: In present study, it was shown that, the expression of miR-۱۴۲-۳p in breast cancer cell lines reduced and restoration of miR-۱۴۲-۳p along with application of Docetaxel in MDA-MB-۴۶۸ cell line, results in significant suppression of the cancer cell viability and proliferation and decrease in the migration and the number of colonies formed via reducing the mRNA levels of the target genes compared to the control group. Also, the results of flow cytometry showed increased induction of apoptosis and cell cycle arrest in G۱ stage and a significant increase in cell population in Sub-G۱ following treatment and transfection of cancer cells. Additionally, the IC۵۰ of docetaxel was obtained by using the MTT test in the treated group which was ۱.۳۳ nmol, whereas in co-administration of Docetaxel and miR-۱۴۲-۳p, this number plunged to ۰.۱۱ nmol which indicates the reduction of effective dose of Docetaxel in this method. Conclusion: The results showed that miR-۱۴۲-۳p could act as tumor suppressor in breast cancer. Restoring the expression level of this miRNA to normal level in MDA-MB-۴۶۸ cancer cells along with Docetaxel application can be a potential therapeutic goal to minimize growth and proliferation, increase apoptosis and reduce metastasis of breast cancer to other tissues by reducing the expression of genes involved in the metastasis and migration of breast cancer cells, in addition to reduction of the effective dose of the drug, the cost and side effects that the chemotherapy alone provides. Having that in mind, it can be used as an additional and supportive therapy to increase the sensitivity of cancer cells to chemotherapy and preventing drug resistance‬ ض‍‮‭Introduction: Breast cancer is the most common type of cancer among women, and despite the recent advances in diagnosis and treatment, it remains a major challenge. miRNAs regulate the expression of target genes post-transcriptionally by degrading mRNA target or by inhibiting their translation. In different cancers, the expression of these molecules undergoes a change and results in the occurrence and development of cancer. miR-۱۴۲-۳p is one of the most important miRNAs that plays a key role in many physiological processes and pathological conditions. Previous studies have shown that level of miR-۱۴۲-۳p in some cancers, such as breast cancer, decreases as a tumor suppressor miRNA. Restoring expression level of tumor suppressor miRNA to the normal level, is called miRNA replacement therapy; Subsequently, the desired miRNA can regulate the expression of its target genes naturally. Considering the side effects and damage that the chemotherapy alone causes, the main goal of this study was to investigate the combined effect of miR-۱۴۲-۳p restoration and docetaxel chemotherapy drug on induction of apoptosis, inhibition of cell proliferation and migration and its effect on the target genes; KLF-۴, Oct-۴, c-Myc, Sox۲, Bach۱ and HMGA۲ in the malignant breast cancer cell line. Materials and methods: IC۵۰ of Docetaxel was obtained in MDA-MB-۴۶۸ breast cancer cell line using MTT test. qRT-PCR technique was used to detect the expression of miR-۱۴۲-۳p and the genes involved in the processes of migration, proliferation and metastasis, before and after miR۱۴۲-۳p mimic transfection with jetPEI‬

عنوان اصلي به زبان ديگر

‮‭Evaluation of the effect of miR-۱۴۲-۳p and Docetaxel On induction of apoptosis and inhibition of growth and migration of breast cancer cell line‬

مستند نام اشخاص تاييد نشده

دهقان، راضیه

مستند نام اشخاص تاييد نشده

Dehghan, Razieh

مستند نام اشخاص تاييد نشده

مرادی، معصومه، استاد راهنما

مستند نام اشخاص تاييد نشده

فیروزامندی، معصومه، استاد راهنما

مستند نام اشخاص تاييد نشده

برادران، بهزاد، استاد مشاور

يادداشت عمومي

سیاه و سفید

وضعیت فهرست نویسی

نمایه‌سازی قبلی