مطالعه ارتباط بین جهش و بیان ژن در اگزونهای شماره ۴ و ۹ ژن p۵۳ در بیماری آدنوماتوز ریوی گوسفند به روشSCCP - PCRوtime PCR- Real
نام نخستين پديدآور
/محمد شادمهری
وضعیت نشر و پخش و غیره
نام ناشر، پخش کننده و غيره
: دامپزشکی
تاریخ نشرو بخش و غیره
، ۱۳۹۵
نام توليد کننده
، راشدی
یادداشتهای مربوط به نشر، بخش و غیره
متن يادداشت
چاپی
یادداشتهای مربوط به پایان نامه ها
جزئيات پايان نامه و نوع درجه آن
کارشناسی ارشد
نظم درجات
دامپزشکی
زمان اعطا مدرک
۱۳۹۵/۰۶/۱۷
کسي که مدرک را اعطا کرده
تبریز
یادداشتهای مربوط به خلاصه یا چکیده
متن يادداشت
بیماری آدنوماتوز ریوی گوسفند که تحت عنوان بیماری جاگزیکت نیز شناخته شده است، یکی از بیماریصهای مزمن تنفسی است که با سرطانی نمودن سلولصصهای تنفسی به صورت پیشرونده، تمام ریه را درگیر میصسازد .ژن p۵۳ یک ژن سرکوبگر تومور است و فعالیت آن، از شکل گیری تومور جلوگیری میصکند .محل این ژن روی کروموزم ۱۱ گوسفند است .در حالت طبیعی P۵۳ به مولکول) MDM۲ که خود از P۵۳ تولید می شود (متصل بوده و غیر فعال می باشد به محض ایجاد آسیب DNA یا استرسصهای سلولی دو حالت اتفاق میصافتد :۱ .مهار میزان تولید P۵۳ برداشته میصشود و P۵۳ در سلول افزایش میصیابد .۲: P۵۳فعال شده به DNA متصل شده و باعث افزایش بیان چند ژن شامل WAF۱/CIP۱ میصشود که مولکول P۲۱ را کد میصکنند P۲۱ .در فاز G۱/S به CDK۲ (Cycling Depended Kinas ۲) یا پروتئین تحریک کننده تقسیم سلولی متصل میصشود و باعث مهار آن میصگردد .هنگامی که P۲۱ با CDK۲ کمپلکس میصشود سلول نمیصتواند وارد مرحله بعدی تقسیم سلولی شود .ژن p۵۳ جهش یافته) بر اثر تششعات، مواد شیمیایی، ویروسصها (نمیصتواند با DNA باند شود و در نتیجه پروتئین P۲۱ نمیصتواند برای متوقف کردن تقسیم سلولی ساخته شود و قابل دسترس باشد .بنابراین سلولصها به طور غیر قابل کنترلی تقسیم میصشوند و تومور تشکیل میصشود هدف این مطالعه تعیین موتاسیونصهای احتمالی در اگزونصهای ۹ و ۴ ژن p۵۳ در ریه گوسفندان مبتلا به آدنوماتوز ریوی بوده است .برای این منظور پس از بررسی ۹۸۶ ریه ضبطی در کشتارگاه صنعتی تبریز، تعداد ۴۰ مورد ریه درگیر که مشکوک به آدنوماتوز انتخاب گردید .مطالعه هیستوپاتولوژیک با رنگ آمیزی هماتوکسیلن و ائوزین بر روی نمونهها انجام صشد و ابتلاء ۱۰ مورد قطعی شد .هم زمان، استخراج DNA و RNA از نمونه های جمع آوری شده برای غربالگری احتمالی جهش در قطعات ژنی با تکنیکSSCP - PCRو همچنین اندازه گیری مقدار بیان ژن p۵۳ در سلولصهای ریوی مبتلا به آدنوماتوز با روشtime PCR - Realصورت گرفت .در انتها، توالی یابی ژنومی برای نمونهصهای جهش یافته انجام شد .نتایج به دست آمده از تکنیک Real Time PCR نشان داد که در تمام نمونهصهای درگیر با ویروس مذکور به جز یک مورد، بیان ژنp۵۳ در مقایسه با نمونهصهای سالم افزایش یافته است .از طرفی نتایج حاصل از تکنیکSSCP - PCRو به دنبال آن توالی یابی ژنومی بیانگر وجود جهش در اگزون شماره ۴ در همه نمونهصهای بیمار بود اما جهشی در اگزون شماره ۹ نمونههای بیمار مشاهده نشد
متن يادداشت
Ovine pulmonary adenomatous, also known as jaagsiekte, is one of the chronic respiratory diseases which involves whole of the lung by progressively making cancer in respiratory cells. P53 is a tumor suppressor gene and its activity inhibits tumor formation. The gene is located on chromosome 11 in sheep. Under normal conditions, P53 attached to the MDM2 molecule (which is produced from P53) and is passive. Upon DNA damage or cellular stress happens these two modes: 1- Inhibition of the production of P53 is removed and P53 increases in the cell. 2- The activated P53 binds to the DNA and increases the expression of several genes including the WAF1 / CIP1 that encodes P21 molecules. P21 protein reacts and binds to CDK2 (cell division stimulating protein- cycline dependent kinase 2) in G1/S of cell cycle so causes inhibition of it. When P21 makes complex with CDK2, cells cannot enter the next phase of cell division. Mutated p53 gene (due to radiation, chemicals, viruses) cannot band with DNA, thus P21 protein cannot be made and be accessible to stop cell division therefore cells undergo uncontrolled division and tumor is formed. The aim of this study was to determine the probablity mutations on the 4 and 9 exons of the p53 gene in the lung of ovine pulmonary adenomatous infected sheep. For this purpose, after observing of 986 lung sample in the Tabriz industrial slaughterhouse, 10 samples were found as invoved lung and 5 samples were selected as healthy lung or control sample. For confirmation the invoved or none invoved samples to adenomatous, the histopathologic examination with hematoxylin and eosin staining were performed on these (15) collected samples. DNA Extraction toward to mutation screening of gene segments by PCR-SSCP technique and also RNA extraction for measuring of the amount of p53 expression level in lung cells on infected samples with adenomatous by Real-time PCR method were done. Then, diagnosized mutated samples by SSCP technique were sent to gene sequencing for final detection. The results of the Real Time PCR technique showed that all of the involved cases, except one of them, having high level of p53 gene expression in compared to the healthy samples. Moreover, the results of PCR-SSCP technique and subsequent gene sequencing result revealed that there are many SNP (single nucleotide polymorphisim) mutation in the 4 exon of p53 on all of the invoved samples.. However, there was no mutation in the 9 exon of p53 gene on the involved lungs
نام شخص به منزله سر شناسه - (مسئولیت معنوی درجه اول )