ساخت واکسن زنده ضعیف شده نوترکیب بروسلاو لیورتوس سوشن RB51 ترشح کننده لیستر یولایزین O و ارزیابی تحریک ایمنی سلولار ایجاد شده توسط آن در موش Balb/C در مقایسه با واکسن اولیهد
نام عام مواد
[پایان نامه]
نام نخستين پديدآور
اعظم غیبی
وضعیت نشر و پخش و غیره
نام ناشر، پخش کننده و غيره
دانشگاه علوم پزشکی تهران، دانشکده پزشکی
تاریخ نشرو بخش و غیره
۱۳۹۸
مشخصات ظاهری
نام خاص و کميت اثر
۱۳۳ص.
ساير جزييات
جدول نمودار
مواد همراه اثر
سی دی
یادداشتهای مربوط به پایان نامه ها
جزئيات پايان نامه و نوع درجه آن
دکتری تخصصی(PHD)
نظم درجات
زیست فناوری پزشکی
زمان اعطا مدرک
۱۳۹۸/۰۲/۲۱
امتياز متن
۲۰
یادداشتهای مربوط به خلاصه یا چکیده
متن يادداشت
مقدمه: بروسلوز یا تب مالت یک بیماری مشترک بین انسان و حیوان بوده که توسط گونههای بروسلا ایجاد میگردد. تا کنون تنها سه نوع واکسن زنده ضعیف شده حیوانی برای مراحل واکسیناسیون و پیشگیری مورد تائید قرار گرفته اند که این واکسنها تنها محافظت 60 درصدی ایجاد میکنند و معایب زیادی نیز دارند. بنابراین نیاز به توسعه واکسنهای کارامد که معایب واکسنهای امروزی را نداشته باشد احساس میگردد. عملکرد سیستم ایمنی در بروسلا بسيار وابسته به ايمني سلولار و پاسخ Th1 است. در این راستا در این مطالعه هدف طراحی واکسن نوتركيبي بود که با ترشح لیستریولایزین O با القاء پروسه آپوپتوز و خارج نمودن باکتری از فاگوزومهای ماکروفاژی حاوی بروسلا و عرضه انها در مسیر پروتئوزوم، با بهتر کردن دسترسی انتی ژنهای بروسلایی به MHC کلاس یک و تقویت پاسخ TCD8+ و Th1 باعث افزایش کارایی واکسن نوترکیب گردد. مواد و روشها: حامل بیانی حاوی قطعات ژنی لستریولایزین طراحی، ساخته و در سوش RB51 الکتروپوریت گردید. بیان و ترشح این پروتئین در سوش مورد نظر با بررسی فعالیت همولیتیکی لیستریولایزین و انجام وسترن بلاتینگ مورد تایید قرار گرفت. اپوپتوز، سیتوتوکسیسیتی و میزان بقا باکتری در سل لاین ماکروفاژی توسط سوشهای نوترکیب در مقایسه با سوش اولیه مورد بررسی قرار گرفت. تزریق و ایمنی زایی گروههای موشی با سوش نوترکیب، اولیه و کنترل سالین انجام شد و میزان تولید اینترفرون گاما در سرم و سوپ سلولهای حاصل از طحال گروههای موشی انالیز گردید. میزان و سرعت پاکسازی ارگانیسم از طحال گروههای موشی بررسی و نهایتا انالیزهای اماری انجام شد.نتایج : بررسی سکانس ژنی 16s روی کلونهای الکتروپوریت شده ای که مقاومت میکروبی مورد نظر را بدست اورده بودند، ایجاد سویه نوترکیب را تایید نمود. همچنین مطابق انتظار سویه نوترکیب فعالیت همولیز خون گوسفندی در محیط تریپتیکاز سوی اگار را با شدت بیشتری نسبت به سوش اولیه نشان داد که بیانکر فعالیت عملکردی لیستریولایزین بود. باند 58 کیلو دالتون برای پروتئین لیستریولایزین در انالیز وسترن بلاتینگ تایید گردید. اپوپتوز و سیتوتوکسیسیتی القاء شده توسط سوشهای نوترکیب بطور معناداری نسبت به سوش اولیه افزایش نشان داد. میزان بقا سوشهای نوترکیب در سل لاین ماکروفاژی نسبت به سوش اولیه بسیار پایین بود. پاکسازی طحال موشها از بروسلا در سوش نوترکیب نسبت به سوش اولیه بطور معنادار بهتر و سریعتر شده بود و تولید اینتر فرون گاما در سرم و سوپ سلولی حاصل از طحال موشها در سوش نوترکیب نسبت به سوش اولیه افزایش معناداری نشان داد.نتیجه گیری : به نظر میرسد تغییر رفتار داخل سلولی بروسلا توسط القاء اپوپتوز در نتیجه فعالیت پروتئین لیستریولایزین O باعث خروج باکتری از مخفیگاه فاگوزومی خود در سلولهای ماکروفاژی شده و اجزای انتی ژنی ان از طریق مسیر پروتئوزوم به MHC کلاس یک در سطح سلول عرضه شده است. همچنین در اثر اپوپتوز اجزای اپوپتوتیک توسط پدیده کراس پرایمینگ به سلولهای دندریتیک مجاور عرضه و ماحصل این فرایندها، ترشح اینترفرون گاما که بیانگر پاسخ سلولی Th1 است با قدرت بیشتری علیه سوش واکسن وارد عمل شده و پاکسازی سوش از بافت طحال به سرعت انجام گردیده است.
موضوع (اسم عام یاعبارت اسمی عام)
موضوع مستند نشده
RB51
موضوع مستند نشده
بروسلا ابورتوس سوش
موضوع مستند نشده
تحریک ایمنی سلولار
موضوع مستند نشده
لیستریولایزین O
موضوع مستند نشده
اپوپتوز
موضوع مستند نشده
پاسخ سلولی Th۱
نام شخص به منزله سر شناسه - (مسئولیت معنوی درجه اول )