عنوان
پدید آورنده
موضوع
رده
کتابخانه
محل استقرار
شماره کتابشناسی ملی
شماره
۹۳۳۳۷پ
زبان اثر
زبان متن نوشتاري يا گفتاري و مانند آن
فارسی
زبان اثر اصلي
فارسی
عنوان و نام پديدآور
عنوان اصلي
تولید سلول های ماکروفاژ مقاوم به ویروس HIV با استفاده از سلول های بنیادی القایی پرتوان
نام عام مواد
[پایان نامه]
نام نخستين پديدآور
نگین حسینی روزبهانی
وضعیت نشر و پخش و غیره
نام ناشر، پخش کننده و غيره
دانشگاه علوم پزشکی تهران، دانشکده پزشکی
تاریخ نشرو بخش و غیره
۱۳۹۷
مشخصات ظاهری
نام خاص و کميت اثر
۱۲۲ص.
ساير جزييات
جدول نمودار
مواد همراه اثر
سی دی
یادداشتهای مربوط به پایان نامه ها
جزئيات پايان نامه و نوع درجه آن
دکتری تخصصی PHD
نظم درجات
ایمنی شناسی پزشکی
یادداشتهای مربوط به خلاصه یا چکیده
متن يادداشت
مقدمه: هم اكنون بيماری ايدز به عنوان یکی از مشکلات مهم برای سلامتی بشر شناخته شده است. با وجود اينكه استفاده از داروهای ضد رتروویروسی، طول عمر و تاحدودی كيفيت زندگی بيماران را افزايش میدهد ولی عوارض زيادی را نیز به همراه دارد. درمقابل این روشهای درمان دارویی گرانقیمت ، استراتژی های درمانی نوظهوری كه بر مبنای سلول بنيادی- اصلاحات ژنتيكی می باشد در حال پيشرفت هستند. پژوهش حاضر در نظر دارد تا با بهره‌گيری از روش توليد سلول بنيادی پرتوان و تكنيک CRISPR/Cas9 بتواند تكنولوژی توليد سلولهای مقاوم به ويروس ايدز را در كشور بومی سازی كرده و در آينده نه چندان دور با وارد ساختن اين سلولها به فاز باليني گام مهمی در درمان بيماران مبتلا به ايدز در كشور بردارد. برای دستيابی به اهداف اين پژوهش از استراتژی نوپای سلولهای بنيادی القائی استفاده شد. منشا سلولهای بنیادی القائی مورد استفاده در این پژوهش، سلولهاي مزانشيمي لايه كوريون پلاسنتا هستند. برای ایجاد سلولهای مقاوم به HIV ژن CCR5 كه يكي از مهمترين واسطه های ورود ويروس HIV به درون سلول است با کمک سيستم CRISPR/Cas9 بطور كامل از ژنوم سلول حذف شد و در نهايت ماکروفاژهایی كه از تمايز يافتن اين سلولهای بنيادی اصلاح شده توليد شدند فاقد گيرنده CCR5 در سطحشان بوده و در مقابل ورود HIV مقاوم بودند.مواد و روش ها: ژن پذيرنده CCR5 در سلولهای بنيادی القايی پرتوان مشتق از سلولهای مزانشيمی لايه كوريون پلاسنتا با روش نوکلئوفکشن پلاسمید PX458 حامل gRNA - CCR5 حذف شد. برای تایید حذف ژنی از روش PCRو همچنین توالی یابی استفاده شد و برای بررسی برش ژن در نواحی غیر اختصاصی از روش PCR استفاده شد. سلولهایی که دچار ویرایش ژنی شده بودند بعد از تکثیر نمودن با استفاده از فاکتورهای رشد SCF و TPO و FLT-3 و IL-3 به پیشسازهای خونی و در نهایت به ماکروفاژ تبدیل شدند. از روش الایزا برای بررسی قابلیت تولید سیتوکائین های IL-1 , TNF ماکروفاژهای فاقد ژن CCR5 ، فلوسیتومتری برای تایید بیان مارکرهای اختصاصی ماکروفاژ و همچنین قابلیت فاگوسیتوز این سلولها و رنگامیزی رایت و لیزوزیم برای تایید شکل ظاهری و همچنین حضور لیزوزیم در سیتوپلاسم استفاده شد. درنهایت برای بررسی مقاومت به ورود HIV، این سلولها با سازه های شبه HIV مواجه شده و میزان ورود ویروس بررسی شد.نتایج: در این مطالعه با روش PCR و تعیین توالی مشخص شد که می توان با کمترین آسیب ناخواسته ژنی، ژن پذيرنده CCR5 را با روش نوکلئوفکشن پلاسمید PX458 به درون سلولهاي بنيادی القايی حذف کرد. در مقایسه با گروه کنترل هیچ تغییری در توانایی این سلولها در تمایز به رده های خونی و ماکروفاژ ایجاد نشد. نتایج فلوسیتومتری حضور سه مارکرCD68 وCD14 و HLA-DRو عدم حضور CCR5 را در سلولهای گروه تست تایید کرد. قابلیت فاگوسیتوز ماکروفاژها نیز تایید شد و همچنین آزمون الایزا نشان داد که ماکروفاژهای تولیدی بعد از تحریک شدن قابلیت تولید IL-1β وTNF را دارا می باشند. بعلاوه بعد از تیمار با سازه های شبه ویروسی مشخص شد که ماکروفاژهای فاقد ژن CCR5 مقاوم به HIVهستند.بحث و نتیجه گیری: نتایج این مطالعه نشان می دهد که: سلولهاي بنيادي القايي پرتوان مشتق از سلولهای مزانشيمی لايه كوريون پلاسنتا قابلیت تبدیل شدن به ماکروفاژ را داشته و حذف ژن CCR5 نیز تاثیری در این پتانسیل نخواهد داشت. این پژوهش در واقع یک مدل است و نشان می دهد که از این منبع سلولی می توان انواع سلولهای خونی را ایجاد کرد. با این استراتژی می توان یک منبع پایدار از سلولهای بنیادی فاقد ژن CCR5 از افراد مبتلا به HIV/AIDS تهیه کرد و مغز استخوان و سیستم خونی این افراد را بعد از حذف کامل با سیستم خونی جدید که مقاوم به HIV است جایگذین کرد.
موضوع (اسم عام یاعبارت اسمی عام)
عنصر شناسه ای
عفونت‌های اچ. آی. وی.
عنصر شناسه ای
HIV Infections
داده رابط بین فیلدها
a10
داده رابط بین فیلدها
a10
موضوع مستند نشده
HIV
موضوع مستند نشده
CCR5
موضوع مستند نشده
CRISPR/Cas9
موضوع مستند نشده
ماکروفاژ
موضوع مستند نشده
نوکلئوفکشن
موضوع مستند نشده
سلول های بنیادی القایی پرتوان
موضوع مستند نشده
induced pluripotent stem cell
موضوع مستند نشده
Macrophage
نام شخص به منزله سر شناسه - (مسئولیت معنوی درجه اول )
کد نقش
، پدیدآور
مستند نام اشخاص تاييد نشده
حسینی روزبهانی، نگین
نام شخص - ( مسئولیت معنوی درجه دوم )
کد نقش
، استاد راهنما
کد نقش
، استاد راهنما
مستند نام اشخاص تاييد نشده
نیکنام، محمدحسین
مستند نام اشخاص تاييد نشده
واسعی، محمد
شناسه افزوده (تنالگان)
عنصر شناسه اي
دانشگاه علوم پزشکی تهران، دانشکده پزشکی
مبدا اصلی
کشور
ایران
تاريخ عمليات
20230227
شماره دستیابی
شماره بازیابی
۱۷۴۳ف
داده هایی که از فرمت مبدا برگردانیده نشده است
شماره فيلد فرمت مبدا
دانشگاه علوم پزشکی تهران، کتابخانه دانشکده پزشکی
وضعیت انتشار
فرمت انتشار
p
اطلاعات رکورد کتابشناسی
نوع ماده
TF
کد کاربرگه
92029
اطلاعات دسترسی رکورد
سطح دسترسي
a
تكميل شده
Y
