بررسی فعالیت و پایداری حرارتی سه فرم آنزیم نوترکیب کوتاه شده کندروئیتیاز ABCI در مقایسه با نوع طبیعی
نام عام مواد
[پایان نامه]
نام نخستين پديدآور
حسین امیدی
وضعیت نشر و پخش و غیره
نام ناشر، پخش کننده و غيره
دانشگاه علوم پزشکی تهران، دانشکده پزشکی
تاریخ نشرو بخش و غیره
۱۳۹۶
مشخصات ظاهری
نام خاص و کميت اثر
59ص.
ساير جزييات
جدول نمودار
مواد همراه اثر
سی دی
یادداشتهای مربوط به پایان نامه ها
جزئيات پايان نامه و نوع درجه آن
کارشناسی ارشد
نظم درجات
بیوشیمی بالینی
یادداشتهای مربوط به خلاصه یا چکیده
متن يادداشت
ناپایداری فیزیولوژیک آنزیم و بروز پاسخ ایمنی در اثر تزریق آنزیم کندروئیتیناز ABC I با منشأ باکتریایی، موجب محدود شدن استفاده از آن در درمان بیماری های مختلف شده است. در اين مطالعه فعالیت و پایداری حرارتي سه فرم آنزيم نوترکیب کوتاه شده كندروئيتيناز ABC I بررسي گردید. هدف از اين مطالعه بیان سه آنزیم cABC I نوترکیب کوتاه شده با توالی اسیدآمینه 1021-90، 747-90 و 747-1 از توالی طبیعی آنزیم به منظور مطالعه فعاليت و پايداري آن ها در مقایسه با نوع طبیعی مي-باشد كه مي تواند براي توسعه دامنه راهكار هاي استفاده بالینی از آنزیم مورد توجه قرار گیرد.روش کار: مطالعات بیوانفورماتیکی به منظور طراحی واریانت های کوتاه شده آنزیم ها، بر مبنای نوع طبیعی انجام شد. پس از سنتز ژن، آنزیم های کوتاه شده در میزبان باکتریایی بیان و با تکنیک وسترن بلات وجود آنها تایید گردید. سپس فعالیت آنزیم ها به کمک تکنیک¬های زایموگرافی و اسپکتروفوتومتری بررسی شد. مطالعه ساختارهای ثانویه و سوم با تکنیک¬های فلورسانس و دورنگ¬نمایی دورانی و هضم با تریپسین به منظور بررسی انعطاف¬پذیری آنزیم¬ها برای مقایسه با نوع طبیعی انجام گردید.یافته¬ها: تعداد اپی¬توپ¬های بالقوه تحریک کننده سیستم ایمنی، حساسیت به هضم با تریپسین، طیف فلورسانس خارجی، میزان خاموش شدگی با KI و آکریل¬آمید برای آنزیم¬های کوتاه شده N∆89 و C∆274 کاهش یافت. شدت فلورسانس ذاتی واریانت¬های N∆89 و C∆274 نسبت به نوع طبیعی طبق انتظار افزایش یافت. پروتئین¬های N∆89، C∆274 و N∆89C∆274 به ترتیب فعالیتی به میزان 164/0، 195/ ، و0/0 نسبت به نوع طبیعی با روش زایموگرافی نشان دادند اما فعالیت آنزیم¬های کوتاه¬شده به روش اسپکرتوفوتومتری قابل سنجش نبود.نتیجه¬گیری: یافته¬ها حاکی از ثبات نسبی ریزمحیط¬های اطراف اجزای ساختاری آنزیم¬های N∆89 و C∆274 بود. اگرچه میزانی از فعالیت در آنزیم¬های کوتاه¬ شده N∆89 و C∆274 به روش زایموگرافی مشاهده شد ولی به نظر می¬رسد حذف اسید¬های آمینه انتخابی تأثیر بسزایی در کاهش فعالیت بوجود آمده در آنها نسبت به نوع طبیعی آنزیم داشته است.
موضوع (اسم عام یاعبارت اسمی عام)
موضوع مستند نشده
فرم های کوتاه شده کندروئیتیناز ABC I
موضوع مستند نشده
زایموگرافی
موضوع مستند نشده
خاموشی فلورسانس
موضوع مستند نشده
اجزای ساختاری پروتئین
نام شخص به منزله سر شناسه - (مسئولیت معنوی درجه اول )