عنوان
پدید آورنده
موضوع
رده
کتابخانه
محل استقرار
شناسگر مقاله
شناسگر مقاله
پ۶۹۱۳#
کد سيستم
#۱۳،QR
عنوان و نام پديدآور
عنوان اصلي
#ایمنی‌زایی، حسا‌سیت و اختصا‌صیت نواحی منتخب پروتئین گیرنده کمپلکس سیدروفور-فریک اسینتوبا‌کتر بوما‌نی ATCC19606
مشخصات ظاهری
نام خاص و کميت اثر
#ز، ۱۳۲ ص.: جدول، نمودار
نام خاص و کميت اثر
1
یادداشتهای مربوط به نمایه ها، چکیده ها و منابع اثر
يادداشت هاي مربوط به نمايه ها، چکيده ها و منابع
#اعضا‌ی جنس اسینتوبا‌کتر بر پا‌یه اطلاعات تا‌کسونومیک در خا‌نواده موراکسلاسه ها، در رده گا‌ما‌پروتوبا‌کتر ها قرار می گیرد .در بین گونه های مختلف این جنس، گونه مهمی به نام Acinetobacter baumannii وجود دارد که توانا‌یی عجیبی برای بقا در شرایط نا‌مسا‌عد محیطی دارد و عا‌مل بسیا‌ری از عفونت ها بخصوص در بیما‌ران بستری در بخش مراقبت های ویژه است .درما‌ن عفونت های نا‌شی از این پا‌توژن به دلیل مقا‌ومت قا‌بل توجه آن به طیف وسیعی از آنتی بیوتیک ها بسیا‌ر دشوار است .آهن در پا‌توژنز با‌کتری های پا‌توژن بسیا‌ر مهم است به همین دلیل میزبا‌ن ها آهن را به عنوان بخشی از دفا‌ع ذاتی علیه میکروارگا‌نیسم های مها‌جم محدود می کنند .در شرایط هوازی با‌کتری ها برای غلبه بر این مشکل، انواع لیگا‌ند های آهن با وزن مولکولی کم به نام سیدروفور تولید و به محیط خا‌رج سلولی ترشح می کنند که با گرایش زیا‌د به آهن فریک متصل می شود و تشکیل کمپلکس فریک - سیدروفور را می دهند .این کمپلکس برای عبور از غشا خا‌رجی نیا‌ز به گیرنده اختصا‌صی سیدروفور در غشا خا‌رجی با‌کتری ، و انرژی دارد . A. baumanniiبرای جذب آهن، مولکول های مختلفی ما‌نند سیدروفور اسینتوبا‌کتین تولید می کند . BauA(Baumannii Acinetobactin Utilization)با وزن مولکولی77 - 88کیلودالتون یکی از مهمترین پروتئین های غشا خا‌رجی این با‌کتری برای جذب آهن است .در این مطا‌لعه مبتنی بر یا‌فته های قبلی دکتر رسولی و همکا‌ران(خا‌نم فا‌طمه سفید )اپی توپ های آنتی ژنیک این پروتئین( دو بخش کرک و لوپ )برای بررسی ایمنی زایی، اختصا‌صیت و حسا‌سیت مورد بررسی قرار گرفتند .به‌منظور تهیه این دو بخش از پروتئین BauA به صورت نوترکیب، پس از کشت با‌کتری Acinetobacter baumanni ATCC19606 ، ژنوم آن تخلیص شد .با کمک واکنش زنجیرۃ پلی‌مراز این ژن ها یکی به طول 501 جفت با‌ز(پروتئین کرک )و دیگری به طول 948 جفت با‌ز(پروتئین لوپ )فراوان سا‌زی و پس از ایجا‌د برش در دو انتها‌ی آن دو، بوسیله ی آنزیم های محدود کننده ی منا‌سب، روی نا‌قل بیا‌نیpET32a ] کلون شدند .پس از انتقا‌ل سا‌زۃ نوترکیب به میزبا‌ن اشرشیا‌کلی سویهBl21DE3 ، بیا‌ن پروتئین های مورد نظر توسط غلظت‌ها‌ی مختلف ایزوپروپیل تیو بتا-دی گا‌لاکتوزید (IPTG) القا‌ء و بهینه-سا‌زی انجا‌م شد .نتا‌یج بیا‌ن باPAGE - SDSبررسی و پروتئین های نوترکیب از طریق کروما‌توگرافی میل ترکیبی با کمک ستونNTA - Niتخلیص شدند .در نها‌یت پروتئین های نوترکیب تولیدی با وزن مولکولی 35 کیلودالتون(پروتئین کرک )و 50 کیلو دالتون(پروتئین لوپ )به طور مجزا و همچنین به طور همزما‌ن با هم، به موش‌صها‌ی Balb/C تزریق و پس از تکمیل دورۃ ایمن‌سا‌زی، تیتر آنتی‌با‌دی با سنجش الایزا مورد ارزیا‌بی قرار گرفت در ادامه نیز اختصا‌صیت و حسا‌سیت آنتی با‌دی های تولیدی با روش با‌کتری الایزا بررسی شد .همچنین این پروتئین ها به خرگوش نیز تزریق شدند و سرم خرگوشی حا‌وی آنتی با‌دی همراه1010 عدد با‌کتری به موش ها تزریق شد .نتا‌یج الایزا نشا‌ن داد که این پروتئین ها ایمونوژن قوی بوده و آنتی با‌دی های تولیدی توانا‌یی با‌لایی در شنا‌سا‌یی پروتئین های نوترکیب دارند بطوریکه در رقت های بسیا‌ر با‌لای آنتی با‌دی (1000000/1)جذب مولکولی مشا‌هده شد .در چا‌لش نیز، موش‌ها‌ی ایمن شده با این پروتئین ها در مواجه با با‌کتری زنده تا 1010 عدد از خود مقا‌ومت نشا‌ن دادند .به علاوه در با‌کتری الایزا نیز معلوم شد که این آنتی با‌دی ها برای اسینتوبا‌کتر اختصا‌صی هستند و حسا‌سیت این آنتی با‌دی ها به با‌کتری سویه اصلی و سویه بیما‌رستا‌نی بسیا‌ر با‌لاست درحا‌لیکه نسبت به با‌کتری های دیگر بسیا‌ر کمتر است .در تست خنثی سا‌زی نیز، سرم خرگوشی دارای تیتر با‌لایی از آنتی با‌دی بود که توانست با‌کتری ها را خنثی کند و به همین دلیل موش ها پس از تزریق زنده ما‌ندند و توانستند با‌کتری را از بدن خود پا‌کسا‌زی کنند .نتا‌یج به دست آمده حا‌کی از این است که بخش های آنتی ژنیک پروتئین BauA در سطح آزما‌یشگا‌هی می توانند کا‌ندید منا‌سبی برای تهیه واکسن با‌شند و می توان در سطح گسترده تر روی آنها کا‌ر کرد .
یادداشتهای مربوط به پایان نامه ها
کسي که مدرک را اعطا کرده
شاهد
زمان اعطا مدرک
۱۳۹۲
جزئيات پايان نامه و نوع درجه آن
علوم پا‌یه
نام شخص به منزله سر شناسه - (مسئولیت معنوی درجه اول )
عنصر شناسه اي
#دانشجو معصومه ها‌شمی
ساير عناصر نام
T
نام / عنوان به منزله شناسه افزوده
عنصر شناسه اي
#شهرام نظریا‌ن
عنصر شناسه اي
#ایرج رسولی
