ژنو تایپینگ مولکولی ایزولههای استافیلوکوک ارئوس مقاوم به متی سیلین جدا شده از نمونه بالینی بیماران مراکز درمانی کاشان و بیمارستان های اصفهان با روش MLST درسال ۱۳۹۶
General Material Designation
[پایاننامه]
First Statement of Responsibility
/میترا امیدی
.PUBLICATION, DISTRIBUTION, ETC
Place of Publication, Distribution, etc.
[بی جا]
Name of Publisher, Distributor, etc.
: پزشکی
Date of Publication, Distribution, etc.
، ۱۳۹۸
PHYSICAL DESCRIPTION
Specific Material Designation and Extent of Item
۱۲۸ص.
NOTES PERTAINING TO PUBLICATION, DISTRIBUTION, ETC.
Text of Note
چاپی - لوح فشرده
DISSERTATION (THESIS) NOTE
Dissertation or thesis details and type of degree
کارشناسی ارشد
Discipline of degree
میکروب شناسی
Body granting the degree
علوم پزشکی کاشان
SUMMARY OR ABSTRACT
Text of Note
سابقه و هدف :استافیلوکوکوس ارئوس به عنوان دومین عامل عفونتهای بیمارستانی بعد از اشرشیاکلی میباشد .سویههای استافیلوکوکوس ارئوس مقاوم به متی سیلین دارای مقاومت آنتیبیوتیکی چندگانه نیز هستند .هدف از این مطالعه بررسی شیوع استافیلوکوک ارئوس مقاوم به متی سیلین تعیین الگوی حساسیت آنتی بیوتیکی و تعیین سکوئنس تایپهای (ST) بومی بیماران بستری در شهر کاشان و اصفهان میباشد .مواد و روشها :این یک مطالعه توصیفی- قطعی است .در این پژوهش تعداد ۱۴۶ ایزوله استافیلوکوک ارئوس از نمونههای بالینی که از خرداد سال ۱۳۹۶ تا بهمن سال ۱۳۹۶ از بیمارستانهای آموزشی اصفهان) الزهرا، امین، امام موسی کاظم (و شهید بهشتی کاشان جمع آوری شد که نمونههای بالینی مذکور شامل عفونت زخم سوختگی، عفونت چشم، عفونت تنفسی، عفونت ادرای، آبسه مغزی و غیره از بخشهای مختلف بیمارستان بودند .جداسازی اولیه نمونهها با استفاده از تستهای استاندارد بیوشیمیایی انجام شد و تائید تشخیص مولکولی توسط پرایمر اختصاصی ژن fem A به روش PCR انجام گرفت .تعیین سویههای استافیلوکوک ارئوس مقاوم به متی سیلین (MRSA) با استفاده از دیسک ۳۰ میکروگرمی سفوکسیتین و با توجه به استانداردهای جدول CLSI چاپ شده در سال ۲۰۱۸ تشخیص داده شد .تعیین الگوی حداقل علظت مهاری (MIC) برای آنتیبیوتیک ونکومایسین انجام شد و جهت تائید مولکولی تشخیص سویههای MRSA از تکثیر اختصاصی ژن mec A به روش تکثیر زنجیره پلیمراز (PCR) استفاده شد .سپس جهت تعیین ژنوتایپ برخی از سویههای MRSA دارای مقاومت آنتی بیوتیکی چندگانه از روش MLST استفاده شد، به این منظور، ابتدا با کمک روش واکنش تکثیر زنجیره پلی مراز (PCR) به بررسی ۷ ژن خانهدار ( (House keeping پرداخته شد و بعد از تعیین توالی توسط شرکت بایونیر کره جنوبی با کمک نرم افزار مگا ۴با آللهای استاندارد در سایت رسمی www.pubmlst.Com هم تراز شده و نتایج حاصل از آن و پروفایل عددی به دست آمده در سایت www.mlst.net گذاشته شد و ژنوتایپ ایزولهها مشخص گردید .یافتهها :از ۱۴۶ استافیلوکوک ارئوس جدا شده از نمونههای بالینی جمعآوری شده، فراوانی سویههای استافیلوکوکوس ارئوس مقاوم به متیسیلین (۴۳/۱۶ ) ۲۴ و فراوانی سویههای استافیلوکوکوس ارئوس حساس به متی سیلین (۵۶/۸۳ ) ۱۲۲ مشاهده شد .فراوانی مقاومت آنتی بیوتیکی به این صورت است :اریترومایسین(۱/۳۰ ) ۴۴ ، کلیندامایسین(۱/۱۵ ) ۲۲ ، سفازولین(۵/۹ ) ۱۴ ، سفوکسیتین(۴/ ۱۶ ) ۲۴ ، لینزولید (۲ ) ۳ و تری متوپریم سولفومتاکسازول .(۶/۹ ) ۱۴ در این ارزیابی الگوی مقاومت آنتی بیوتیکی بیشترین مقاومت در سویههای استافیلوکوکوس ارئوس به آنتی بیوتیک اریترومایسین (۱/۳۰ ) ۴۴ و آنتی بیوتیک سفوکسیتین (۴/۱۶ ) ۲۴ نشان داده شد .همچنین بیشترین حساسیت سویههای استافیلوکوکوس ارئوس به آنتی بیوتیک لینزولید (۹۸ ) ۱۴۳ و آنتی بیوتیک سفازولین (۸۹ ) ۱۳۰ مشاهده شد(۲ ) ۳ .سویه استافیلوکوکوس ارئوس مقاوم به لینزولید نیز مشاهده شد .از ۱۴۶ استافیلوکوک ارئوس تعداد (۶/۳۵ ) ۵۲ نمونه دارای الگوی مقاومت آنتی بیوتیکی چند گانه و تعداد (۴/ ۶۴ ) ۹۴ ایزوله فاقد الگوی مقاومت آنتی بیوتیکی چندگانه بودند .سویه مقاوم به ونکومایسین مشاهده نشد .تمامی استافیلوکوکوس ارئوس مقاوم به متی سیلین دارای ژن fem A و mec A بودند .از ۲۴ نمونه استافیلوکوکوس ارئوس مقاوم به متی سیلین تعداد ۱۰ نمونه منتخب برای تعیین توالی انتخاب شد و تایپ آن با روش MLST تعیین شد .تایپهای تعیین شده عبارتند ازST ۲۲ :،ST ۲۹۱،ST ۲۳۹،ST ۸۶۱،ST ۸۸۹ ، .ST ۱۴۶۵نتیجه گیری :نتایج مطالعه حاضر نشان داد شیوع سویههای استافیلوکوکوس ارئوس مقاوم به متی سیلین (MRSA) جدا شده از نمونههای بالینی در بیمارستانهای شهر کاشان و اصفهان نسبتا بالا بوده و تهدید جدی برای درمان عفونتهای ناشی از سویههای فوق میباشد .همچنین در مطالعه حاضر برای اولین بار سویههای استافیلوکوک ارئوس مقاوم به متیسیلین دارای مقاومت به آنتیبیوتیک لینزولید (LRSA) از بیمارستانهای استان اصفهان و کاشان جدا سازی گردیده است که زنگ خطر جدی محسوب میشود .از سوی دیگر وجود سکوئنس تایپهای خطرناک گزارش شده از دیگر نقاط جهان از جملهST ۲۲ ،ST ۲۳۹، ST۲۹۱ در شهر کاشان و اصفهان نشان دهنده انتشار سریع و گسترده این سویهها در منطقه ما میباشد .کلید واژهها :استافیلوکوک ارئوس، ژنوتایپینگ،MLST ، ژنfem A، ژنmec A، استافیلوکوک ارئوس مقاوم به متیسیلین .