عنوان
پدید آورنده
موضوع
رده
کتابخانه
محل استقرار
NATIONAL BIBLIOGRAPHY NUMBER
Country Code
IR
Number
۱۰۵۴ط
LANGUAGE OF THE ITEM
.Language of Text, Soundtrack etc
فارسی
COUNTRY OF PUBLICATION OR PRODUCTlON
Country of publication
IR
TITLE AND STATEMENT OF RESPONSIBILITY
Title Proper
شناسایی مولکولی ایزوله‌های فاسیولا و دیکروسلیوم در نشخوارکنندگان استان مرکزی با استفاده از تکنیک RFLP-PCR و HRM
General Material Designation
[طرح تحقیقاتی]
First Statement of Responsibility
/ محسن اربابی، حسین هوشیار
Subsequent Statement of Responsibility
؛ مهدی دلاوری، احمد حسینی صفا
.PUBLICATION, DISTRIBUTION, ETC
Place of Publication, Distribution, etc.
کاشان
Name of Publisher, Distributor, etc.
: دانشگاه علوم پزشکی کاشان
Date of Publication, Distribution, etc.
، ۱۳۹۶.
NOTES PERTAINING TO PUBLICATION, DISTRIBUTION, ETC.
Text of Note
الکترونیکی - لوح فشرده
SUMMARY OR ABSTRACT
Text of Note
سابقه و هدف :فاسیولیازیس و دیکروسلیازیس یکی از بیماری‌های مهم انگلی مشترک بین انسان و دام با گسترش جهانی است و به لحاظ پزشکی، دامپزشکی و اقتصادی دارای اهمیت فراوان است .یکی از عوامل بیماری کبدی جنس فاسیولا و دیکروسلیوم است .ایران جزء مناطق آندمیک بیماری است و از سراسر کشور آلودگی به هر دو گونه فاسیولاصهپاتیکا و فاسیولاصژیگانتیکا و دیکروسلیوم گزارش می‌صشود .دیکروسلیازیس از شایع‌ترین بیماری‌صهای انگلی مجاری صفراوی و کیسه صفرای طیف وسیعی از پستانداران ازجمله نشخوارکنندگان اهلی و گاهی انسان است .عامل ایجادکننده بیماری گونه‌صهای مختلف دیکروسلیوم است که مهم‌صترین آن در ایران وجهان دیکروسلیوم دندریتیکوم می‌صباشد .هدف از انجام این مطالعه تشخیص و شناسایی ایزوله‌های گاو، گوسفند و بز فاسیولا و دیکروسلیوم جمع‌آوری‌شده از کشتارگاه اراک طی سال‌های۱۳۹۵ - ۹۶ با استفاده از چهار روش مرفومتریک، تعیین توالی وRFLP -HRM PCRمی باشد .مواد و روش‌صها :تحقیق به روش مقطعی (CrossSectional) طراحی شد .بدین منظور در مرحله اول ۶۸۰کرم بالغ دیکروسلیوم و۱۲۰کرم بالغ فاسیولا از کبد گاو، گوسفند و بز) از هر کبد۱ کرم بالغ فاسیولا و۴ کرم بالغ دیکروسلیوم (جمع‌آوری و با استفاده از ۲۵شاخص و نسبت استاندارد مرفومتریک، گونه فاسیولا و ۲۱شاخص گونه دیکروسلیوم شناسایی و مورد آنالیز فنوتیپی قرارگرفت و نتایج با آزمون‌صهای آماریWay ANOVA - OneوTest - Tمورد تجزیه و تحلیل قرار گرفت .در مرحله دوم ۶۰ ایزوله فاسیولا و ۶۰ایزوله دیکروسلیوم که دارای اختلافات مرفومتریک بودند، انتخاب و با استفاده از کیت، استخراج DNA صورت گرفته و واکنش زنجیره‌ای پلی‌صمراز (PCR)جهت تکثیر نواحی ژنی میتوکندریائی ND۱و CO۱ فاسیولا و همچنین ناحیه ND۱دیکروسلیوم انجام گردید .از روشRFLP -PCRو با استفاده ازآنزیم‌صهای محدودالاثر HindIII و Eco۸۸۱ الگوی هضم آنزیمی نواحی ND۱و CO۱ایزوله‌صهای فاسیولا تعیین گردید .سپس DNA ۶۰نمونه فاسیولا برای آنالیز واکنش HRMمورد بررسی قرار گرفت .همچنین DNA ۶ایزوله فاسیولا و ۸ ایزوله دیکروسلیوم تعیین توالی و میزان مشابهت دوبدوی آن‌صها بایکدیگر ودرمقایسه با موارد ثبت شده در بانک ژن با استفاده ازنرم افزار Clustalw۲ محاسبه ودرنهایت درخت فیلوژنتیک ترسیم و مورد تفسیر قرارگرفت .یافته‌صها :طول فاسیولا هپاتیکا برای ایزوله‌های گوسفند ۱/۲تا ۴/۲ سانتیمتر، گاو۹/۲ تا ۳/۳ سانتیمتر و بز ۲/۱تا ۵/۱ سانتیمتر و عرض آن برای ایزوله‌های گوسفند۷/۱تا۹/۱سانتیمتر، بز ۱/۱تا۲/۱سانتیمتر و گاو۲/۱تا۳/۱سانتیمتر تعیین شد .همچنین طول فاسیولا ژیگانتیکا برای ایزوله‌های گوسفند ۸/۴ تا ۰۳/۵ سانتیمتر، گاو۲/۴تا ۰۳/۵ سانتیمتر و بز۵/۴ تا ۹/۴ سانتیمتر و عرض آن برای ایزوله‌های گوسفند۱/۱تا۲/۱سانتیمتر، بز ۹/۰تا۰۳/۱سانتیمتر و گاو۱/۱ تا۲/۱سانتیمتر تعیین شد . طول دیکروسلیوم دندریتیکوم برای ایزوله‌صهای گوسفند۶۷/۰ تا۶۹/۰سانتیمتر، بز۶۵/۰ تا ۶۷/۰ سانتیمتر و گاو۹/۰ تا۷/۰سانتیمتر وعرض آن برای ایزوله‌های گاو۱۳/۰ تا۲/۰ سانتیمتر، بز۱۲/۰ تا۱۷/۰ سانتیمتر و گوسفند۱۳/۰ تا۱۷/۰ سانتیمتر تعیین شد .در ایزوله‌صهای گاو تمامی شاخص‌صها و نسبت‌صهای مرفومتریک به‌طور معنی‌داری بالاتر از سایر میزبانان می‌صباشد .واکنش PCRطول نواحی ND۱و CO۱فاسیولا را به ترتیب ۷۰۰bp و ۵۰۰bpو طول ناحیه ND۱دیکروسلیوم را ۲۰۰ bp نشان داد .آنالیزRFLP - PCRبا استفاده از آنزیم‌صهای محدودالاثر HindIII و Eco۸۸۱ به ترتیب :باندهای۷۳bp، ۱۲۰bp و ۵۰۷bp را برای ناحیه ND۱و باندهای ۴۷bp، ۱۵۳bp و ۳۰۰bp را برای ناحیه CO۱فاسیولا نشان داد .آنالیز HRM۶۰نمونه DNA فاسیولا نشان داد، از ۲۰ایزوله گاو، ۸ ایزوله فاسیولا ژیگانتیکا و۱۲ ایزوله فاسیولا هپاتیکا، از ۲۰ایزوله گوسفند، ۷ایزوله فاسیولا ژیگانتیکا و ۱۳ ایزوله فاسیولا هپاتیکا و از ۲۰ ایزوله بز، ۴ ایزوله فاسیولا ژیگانتیکا و ۱۶ ایزوله فاسیولا هپاتیکا بود .آنالیز دوبدوی توالی‌صهای بدست آمده میزان مشابهت ژنتیکی نواحی ژنی CO۱و ND۱ایزوله‌صهای فاسیولا را به ترتیب ۴۲ :تا۱۰۰ درصد و ۲۸/۵۱ تا۱۰۰ درصد و ناحیه ژنی ND۱دیکروسلیوم را ۹۲/۴۳ تا ۱۰۰درصد نشان داد .نتیجه‌گیری:آنالیز مرفومتریک در شناسایی اولیه دو گونه فاسیولا هپاتیکا از فاسیولا ژیگانتیکا و همچنین دیکروسلیوم دندریتیکوم از سایر گونه‌ها ابزار مناسبی است ولی برای تفکیک و شناسایی دقیق گونه‌صها باید از روشهای مولکولی نیز استفاده گردد .مارکرهای ژنتیکی میتوکندریائی CO۱و ND۱بخوبی قادر به تفکیک گونه‌صهای فاسیولا از یکدیگر و همچنین شناسائی دیکروسلیوم در دام‌صهای کشتارگاهی می‌صباشد . همچنین نشان داده شد، آنالیز HRMتکنیک حساس و قابل اعتمادی برای تفکیک گونه‌صهای جنس فاسیولا ازیکدیگر می‌صباشد .با توجه به محدودیت‌صهای روشRFLP - PCRاستفاده از روش آنالیز HRM جهت تعیین ژنوتایپ‌صهای انگلی توصیه می‌صشود .کلمات کلیدی :مرفومتریک، مولکولی،HRM ،RFLP -PCR، نشخوار کننده، فاسیولا، دیکروسلیوم
UNCONTROLLED SUBJECT TERMS
Subject Term
فاسیولا
Subject Term
دیکروسلیوم
Subject Term
تکنیک PCR-RFLP
Subject Term
تکنیک HRM
Subject Term
بیماری های انگلی
Subject Term
استاندارد مرفومتریک
Subject Term
روش مولکولی
Subject Term
نشخوارکنندگان --استان مرکزی
PERSONAL NAME - PRIMARY RESPONSIBILITY
اربابی، محسن، مجری اول طرح
PERSONAL NAME - SECONDARY RESPONSIBILITY
اربابی، محسن ، مجری دوم
هوشیار، حسین ، مجری سوم
دلاوری، مهدی ، همکار طرح
حسینی صفا، احمد ، همکار طرح
ORIGINATING SOURCE
Country
ایران
LOCATION AND CALL NUMBER
Call Number
ط۱۰۵۴،۱۳۲،۱۳۹۶
فهرستنویسی قبلی
ec
XF
1
a
Y
