بررسی مکانیسم مهار ژن گاماگلوبین نقش MBD2 و کمپلکس LARC
General Material Designation
[پایاننامه]
Parallel Title Proper
Investigating the mechanism of Y-globin repression: the role of MBD2 and LARC complex
.PUBLICATION, DISTRIBUTION, ETC
Name of Publisher, Distributor, etc.
علوم بهزیستی وتوانبخشی university of social welfare and rehabilitation))
Date of Publication, Distribution, etc.
، ۱۳۸۹
PHYSICAL DESCRIPTION
Specific Material Designation and Extent of Item
۱۳۷ص.
GENERAL NOTES
Text of Note
پیوست
NOTES PERTAINING TO PUBLICATION, DISTRIBUTION, ETC.
Text of Note
چاپی
DISSERTATION (THESIS) NOTE
Dissertation or thesis details and type of degree
کارشناسی ارشد
Discipline of degree
ژنتیک انسانی Human Genetics
Body granting the degree
علوم بهزیستی وتوانبخشی university of social welfare and rehabilitation))
SUMMARY OR ABSTRACT
Text of Note
MBD2به عنوان یک مهار کننده روی ژن گاماگلوبین انسانی عمل میصکند .مشخص شده که این پروتئین از طریق اتصال مستقیم به توالیصهای CpG اطراف پرومتر عمل نمیصکند .در یک مدل پیشنهاد شده که ممکن است MBD2 با اتصال غیر مستقیم به نواحی تنظیمی گاماگلوبین از طریق یک کمپلکس LARC(LCR associated remodeling complex) عمل کند .در این مطالعه احتمال تأثیر مهاری MBD2 روی بیان ژن گاماگلوبین از طریق کمپلکس LARC بررسی شد .نتایج قدیمی که در آزمایشگاه ما بدست آمده پیشنهاد میصکند که MBD2 siRNA بیان گاماگلوبین را در سلولصهای K562 القاء میصکند گرچهsiRNA هایی که پروتئین متصل شونده به DNA را در LARC هدف قرار دادند چنین تأثیری نشان ندادند .سلولصهای K562 بیان کننده C1/C2shRNA مهار رشد نشان دادند .آزمایشات (Electrophoretic mobility shift EMSA assay) با استفاده از پروتئینصهای هسته رده سلولی K562 پایدار بیان کننده MBD2shRNA نشان میصدهد که القاء گاماگلوبین ایجاد شده در نتیجه MBD2 knockdown با کاهش LARC در ارتباط نیست .رویصهم رفته این نتایج پیشنهاد می-کند که مهار ژن گاماگلوبین حاصل از MBD2 به ارتباط آن با LARC مرتبط نبوده و این مهار به دلیل مکانیسم دیگری میصباشد .واژهصهای کلیدیMBD2,hnRNPC1C2 shRNA :، گاماگلوبین
Text of Note
globin induction caused by MBD2 knockdown does not necessarily correlate with reduced LARC levels. Collectively, these results suggest that MBD2-mediated globin repression is not dependent on its association with LARC Xand that this repression involves an alternate mechanism-۳ globin induction in K562 cells. In contrast, transient knockdown of hnRNP C1/C2, the DNA binding protein of LARC, did not have the same effect. K562 cells stably expressing hnRNP C1/C2 displayed growth inhibition. However, electrophoretic mobility shift assays (EMSA) using nuclear extracts from the MBD2 shRNA stable cells demonstrated that-۳ globin regulatory regions may take place indirectly through an associating complex. To date, one such complex has been identified in K562 cells called the LCR-Associated Remodeling Complex (LARC)Xa complex that binds to the LCR as well as the globin promoter. Here we have investigated whether MBD2 repression of globin is mediated via LARC. We show that transient or stable knockdown of MBD2 leads to-۳ The Methyl-Binding Domain Protein 2 (MBD2) has been implicated in repression of the human globin gene. However evidence suggests that this protein does not act by binding directly to CpG residues in the globin promoter. In one model, MBD2 binding to
ba
PARALLEL TITLE PROPER
Parallel Title
Investigating the mechanism of Y-globin repression: the role of MBD2 and LARC complex