بررسی اثر ال کارنیتین بر پیری سلولهای بنیادی خونساز +CD117 مغز استخوان از طریق مسیر سیگنالینگ Akt
First Statement of Responsibility
سیده پریا فربود
.PUBLICATION, DISTRIBUTION, ETC
Name of Publisher, Distributor, etc.
دامپزشکی
Date of Publication, Distribution, etc.
۱۴۰۱
PHYSICAL DESCRIPTION
Specific Material Designation and Extent of Item
۸۱ص.
Accompanying Material
سی دی
DISSERTATION (THESIS) NOTE
Dissertation or thesis details and type of degree
کارشناسی ارشد
Discipline of degree
بیوشیمی بالینی
Date of degree
۱۴۰۱/۱۱/۱۲
SUMMARY OR ABSTRACT
Text of Note
استفاده از سلولهای بنیادی در روشهای سلول درمانی و پزشکی بازساختی، این روزها بسیار مورد توجه قرار گرفته است. از مشکلات این روش درمانی، پیری و کاهش سرعت رشد و بقاء سلولها در محیط کشت است. تولید رادیکالهای آزاد از جمله عوامل ایجاد کننده پیری و سرطان میباشد. آنتی اکسیدانها با جلوگیری از تولید رادیکالهای آزاد میتوانند از کاهش بازده و عملکرد سلولهای بنیادی در درمان جلوگیری کنند. ال کارنیتین به عنوان یک آنتی اکسیدان در فرایندهای مهم سلولی مثل مهار استرس اکسیداتیو و جلوگیری از پیری، متابولیسم اسیدهای چرب، تولید ATP، سم زدایی سلولی و پایداری غشاء سلول نقش دارد. هدف از این مطالعه بررسی اثر ال کارنیتین بر پیری سلولهای بنیادی خونساز +CD117 مغز استخوان از طریق مسیر پیام رسانی AKt است. نشانگر CD117 تقریبا در 4 درصد سلولهای تک هستهای مغز استخوان بیان میشود. در این مطالعه سلولهای تک هستهای از استخوان فمور و تیبیای رت جداسازی شدند و سپس با تکنیک MACS سلولهای +CD117 از جمعیت سلولهای تک هستهای مغز استخوان جداسازی گردید. درصد خلوص سلولهای +CD117 نیز با روش فلوسایتومتری محاسبه شد. سپس سلولها به دو گروه کنترل و آزمایش تقسیم شدند که گروه آزمایش به مدت 14 روز تحت تیمار با غلظت 2/0 میلی مولار ال کارنیتین قرار گرفت و سپس میزان بیان پروتئینهای TERT و AKT به روش وسترن بلاتینگ اندازه گیری شد. به طور خلاصه این مطالعه نشان میدهد که تیمار سلولهای بنیادی + CD117 با 2/0 میلی مولار ال کارنیتین به طور معنی داری باعث افزایش بیان پروتئین TERT گشته است اما میزان بیان پروتئین AKT درگروه آزمایش که تیمار با ال کارنیتین صورت گرفته است نسبت به گروه کنترل کاهش یافته است که این اختلاف مشاهده شده معنی دار نمیباشد ( 05/0˂P ). با توجه به نتایج حاصله میتوان از ال کارنیتین در محیط کشت سلولهای بنیادی خونساز در جهت بهینه کردن شرایط کشت استفاده کرد که میتواند در زمینهی سلول درمانی کمک کننده باشد.
Text of Note
AbstractThe use of stem cells in cell therapy and regenerative medicine methods has received much attention these days. One of the problems of this treatment method is aging and decreasing the rate of growth and survival of cells in the culture medium. The production of free radicals is one of the causes of aging and cancer. Antioxidants prevent the production of free radicals, thus enhance the efficiency and function of stem cells in treatment. L-carnitine as an antioxidant, plays important role in cellular processes such as inhibiting oxidative stress and preventing aging, fatty acid metabolism, ATP production, cellular detoxification, and cell membrane stability. The aim of this study was to evaluate the effect of L-carnitine on the aging of bone marrow CD117 hematopoietic stem cells through the AKt signaling pathway. CD117 marker is expressed in approximately 4% of bone marrow mononuclear cells. In this study, mononuclear cells were isolated from the femur and tibia of rats, and then CD117+ cells were isolated from the population of bone marrow mononuclear cells using the MACS technique. The purity percentage of CD117+ cells was also calculated by flow cytometry. The cells were divided into control and experimental groups, and the experimental group was treated with a concentration of 0.2 mM L-carnitine for 14 days. The expression levels of TERT and AKT proteins were measured by western blotting. This study shows that the treatment of CD117+ stem cells with 0.2 mM L-carnitine significantly increased the expression of TERT protein, but the level of AKT protein expression in the experimental group treated with L-carnitine decreased compared to the control group (P<0.05). According to the obtained results, L-carnitine could be used in the culture medium of hematopoietic stem cells in order to optimize the culture conditions which can help in the field of cell therapy.
OTHER VARIANT TITLES
Variant Title
Investigation of L-carnitine on aging of CD117+ bone marrow hematopoietic stem cells via Akt signaling pathway