بررسی سرکوب بیان ژن Nanog و حساس سازی سلول های سرطانی کبد به داروی Cisplatin
First Statement of Responsibility
هاجر آل محمد
.PUBLICATION, DISTRIBUTION, ETC
Name of Publisher, Distributor, etc.
علوم طبیعی
Date of Publication, Distribution, etc.
۱۴۰۰
PHYSICAL DESCRIPTION
Specific Material Designation and Extent of Item
۱۱۳ص.
Accompanying Material
سی دی
DISSERTATION (THESIS) NOTE
Dissertation or thesis details and type of degree
کارشناسی ارشد
Discipline of degree
زیست شناسی سلولی و مولکولی
Date of degree
۱۴۰۰/۰۶/۲۸
SUMMARY OR ABSTRACT
Text of Note
سرطان کبد یکی از شایع ترین سرطان¬ها ست و دومین علت مرگ و میر بر اثر سرطان در سرتاسر جهان است و کمی از بیماران از درمان های رایج بهره مند می¬شوند و تعداد زیادی به دلیل عود مجدد و مقاومت به شیمی درمانی طول عمر بسیار کوتاهی دارند. پیشرفت¬های اخیر موجب شناسایی گروهی از جمعیت سلولی در سلول های سرطانی به نام سلول های بنیادی سرطانی شد.Nanog نقش مهمی در تنظیم خود تجدید شوندگی و پر توانی سلول های بنیادی جنینی دارد. مطالعات اخیر نشان میدهد بیان Nanog به طور غیرعادی در چندین نوع تومور نشان دهنده ارتباط بیان Nanog با توسعه تومور است. در این طرح از RNA مداخله گر برای سرکوب بیان Nanog در سل لاین HepG2 در سرطان کبد استفاده شد. به منظور تعیین اثر ترکیبی siRNAاختصاصی Nanog و داروی Cisplatinبر قابلیت زنده ماندن سلول های HepG2 تست MTTانجام شد. در ادامه برای تعیین اثر این درمان ترکیبی بر سطح بیان ژن Nanog از روش qRT-PCR استفاده شد. ¬میزان¬ مهاجرت سلول¬ها به روش، Wound healing assay و ویژگی خود تجدیدشوندگی سلول ها از طریق تست های Colony formation و وضعیت آپوپتوز توسط رنگ آمیزی Annexin V-FITC/PI و DAPI و توقف چرخه سلولی به روش فلوسیتومتری بررسی شد. در نهایت میزان بیان ژن های مرتبط با آپوپتوز و ژن های مرتبط با Stemnessبا استفاده qRT-PCR از اندازه گیری شد. در سلول¬های سرطانی HepG2به دنبال استفاده ترکیبی از siRNA اختصاصی Nanog و داروی Cisplatin بیان ژن Nanogکاهش یافت. همچنین استفاده ترکیبی از siRNAاختصاصی Nanog و دارویCisplatin منجر به افزایش میزان حساسیت سلول های HepG2به دارو، مهار مهاجرت و توقف چرخه سلولی در فاز G2-S شد. علاوه بر این، استفاده از siRNA اختصاصی Nanogدر ترکیب با داروی Cisplstinباعث تغییر بیان ژن¬های مرتبط با آپوپتوز و Stemnessشد. در این مطالعه مشخص شد که استفاده ترکیبی از siRNA اختصاصی Nanog و داروی Cisplatinبصورت معنی داری باعث القای آپوپتوز می¬شود.بنابرین سرکوب Nanog در ترکیب با داروی Cisplatinمی تواند یک رویكرد درمانی مناسب در درمان سرطان کبد باشد.
Text of Note
Abstract:Liver cancer is one of the most lethal cancers having worldwide prevalence. The Nanog transcription factor is known as a Cancer Stem Cell (CSC) marker that can maintain stemness properties and have a role in developing tumors. Thus, this research was conducted to evaluate the impact of combination therapy of Nanog siRNA/Cisplatin on cell proliferation, migration, apoptosis, and cell cycle in the HepG2 cell line. To assess the impact of Nanog siRNA and Cisplatin individually and in combination, we used MTT, wound healing, colony formation flow cytometry in the HepG2 cell line. In addition, real-time PCR (qRT-PCR) was used to check the expression of stemness and apoptosis-related genes after combination therapy. Analysis of our data indicated that Nanog siRNA significantly reduced the level of Nanog expression. In addition, combination therapy of Nanog siRNA/Cisplatin decreased cell proliferation, migration, and stemness characteristics, increased apoptosis, and the sensitivity of HepG2 cells compared to chemotherapy and monotherapy. Hence, it can be suggested that Nanog inhibition in combination with Cisplatin is a potential therapeutic strategy for developing new therapeutic approaches for HCC.
OTHER VARIANT TITLES
Variant Title
Evaluation of NANOG gene suppression and sensitization of liver cancer cells to Cisplatin