عنوان

بررسی اثر آنتی‌اکسیدان هدفمند میتوکندریایی Mito-TEMPO بر فراسنجه های کیفی اسپرم قوچ پس از فرآیند انجماد-یخ گشایی

Number

پ۲۵۷۵۲

.Language of Text, Soundtrack etc

per

Title Proper

بررسی اثر آنتی‌اکسیدان هدفمند میتوکندریایی Mito-TEMPO بر فراسنجه های کیفی اسپرم قوچ پس از فرآیند انجماد-یخ گشایی

First Statement of Responsibility

فاطمه زارعی

Name of Publisher, Distributor, etc.

کشاورزی

Date of Publication, Distribution, etc.

۱۴۰۰

Specific Material Designation and Extent of Item

۱۲۷ص.

Accompanying Material

سی دی

Dissertation or thesis details and type of degree

دکتری

Discipline of degree

علوم دامی گرایش فیزیولوژی دام

Date of degree

۱۴۰۰/۵/۴

Text of Note

پراکسیداسیون لیپیدهای غشا یکی از مهم‌ترین استرس‌های شیمیایی در فرآیند سرد‌سازی و انجماد اسپرم است. استفاده از آنتی‌اکسیدان‌ها در رقیق‌کننده اسپرم، از سلول در مقابل آسیب‌های اکسیداتیو محافظت می‌نماید. هدف از اجرای این پژوهش بررسی اثر آنتی‌اکسیدان هدفمند میتوکندریایی Mito-TEMPO بر فراسنجه‌های کیفی و عملکرد تولید‌مثلی اسپرم گوسفند در طول فرایند سرد‌سازی و انجماد بود. در این آزمایش از 5 راس قوچ نژاد زندی استفاده شد. پس از اسپرم‌گیری و ارزیابی اولیه، به منظور حذف اثرات فردی، نمونه‌های منی مخلوط شدند. در آزمایش اول، سطوح مختلف Mito-TEMPO (0، 5/0، 5، 50 و 500 میکرومولار) به رقیق‌کننده اسپرم افزوده شد و نمونه منی در زمان‌های 0، 24 و 48 ساعت در دمای 5 درجه سانتی‌گراد سردسازی شد. فراسنجه‌های کیفی اسپرم شامل تحرک، زنده‌مانی، مورفولوژی غیر‌طبیعی، سلامت غشا پلاسمایی، فعالیت میتوکندری و غلظت مالون‌دی‌آلدهید در سه زمان 0، 24 و 48 ساعت سردسازی ارزیابی شدند. برای سنجش فراسنجه‌های باروری اسپرم سرد‌شده، منی 24 ساعت سرد شده به روش سرویکال تلقیح مصنوعی شد. بر اساس نتایج حاصل بیشترین میزان تحرک، تحرک پیش‌رونده، سلامت غشا، زنده‌مانی و کمترین میزان غلظت مالون‌دی‌آلدهید در تیمارهای 5 و 50 میکرومولار Mito-TEMPO در دو زمان 24 و 48 ساعت سردسازی مشاهده شد (05/0>P). نرخ آبستنی، زایش و بره‌زایی در دو گروه 5 و 50 میکرومولار Mito-TEMPO در زمان 24 ساعت سردسازی نسبت به گروه کنترل بالاتر بود (1/0>P).در آزمایشدوم، نمونه منی به رقیق‌کننده حاوی سطوح مختلف Mito-TEMPO (0، 5/0، 5، 50 و 500 میکرومولار) افزوده و منجمد شد. ارزيابي میکروسکوپی اسپرم بعد از انجماد-یخ‌گشایی انجام شده و فراسنجه‌های کیفی اسپرم شامل فراسنجه‌های حرکتی، مورفولوژی غیر‌طبیعی، سلامت غشا پلاسمایی، سلامت آکروزوم، فعالیت میتوکندری، میزان شکست DNA، آپوپتوز و غلظت ROS و مالون‌دی‌آلدهید مورد ارزیابی قرار گرفتند. برای سنجش فراسنجه‌های باروری اسپرم یخ‌گشایی‌شده، تلقیح مصنوعی به روش لاپاراسکوپی انجام شد. بر اساس نتایج به دست آمده، بیشترین درصد اسپرم با تحرک و تحرک پیش‌رونده، میتوکندری سالم، سلامت غشا پلاسمایی، زنده‌مانی و کمترین غلظت مالون‌دی‌آلدهید و ROS در گروه‌های دریافت‌کننده 5 و 50 میکرو‌مولار Mito-TEMPO مشاهده شد که نسبت به سایر گروه‌ها اختلاف آن معنی‌دار بوده است (05/0>P). بنابراین افزودن آنتی‌اکسیدان Mito-TEMPO به رقیق‌کننده اسپرم روشی مناسب جهت بهبود فراسنجه‌های کیفی و باروری اسپرم سرد و منجمد‌شده گوسفند می‌باشد.

Text of Note

Abstract: Peroxidation of membrane lipids is one of the most important chemical stresse in freezing and chilling processes. Utilization of antioxidants in spermatozoa diluent, protect cells from oxidative damages. The current study was aimed to assess the influence of using Mito-TEMPO on quality parameters and reproductive performance of ram semen during freezing and cooling processes. In this experiment, 5 Zandi rams were used. After semen collection and primary evaluation, semen samples were pooled in order to eliminate individual differences. In experiment 1, diluted semen samples add to the extenders containing 0, 0/5, 5, 50 and 500 μM Mito-TEMPO. The prepared samples were stored at 5 °C up to 48 h. Chilled sperm motility, viability, abnormal morphology, mitochondrial activity, membrane functionality and malondialdehyde concentration were assessed during 0, 24 and 48 h. For evaluation of reproductive performance, cervical artificial insemination was performed via 24 h-chilled semen. In results, at time 0, no significant difference was observed among groups. Using 5 and 50 μM Mito-TEMPO resulted in higher (P ≤ 0.05) cooled sperm total motility, progressive motility, membrane functionality, viability and lower malondialdehyde concentration than the other groups during 24 and 48 h storage. Pregnancy, parturition and lambing rates were higher (P ≤ 0.1) with 24 h-chilled semen samples containing 5 and 50 μM Mito-TEMPO compared to the control groupIn experiment 2,.semen was add to the extenders containing 0, 0/5, 5, 50 and 500 μM Mito-TEMPO and were frozen. Microscopic evaluation of spermatozoa was done after freeze-thawing and quality parameters including motion parameters, abnormal morphology, membrane integrity, mitochondrial activity, acrosome integrity, DNA fragmentation, apoptosis, malondialdehyde and ROS concentration were assessed. For evaluation of reproductive performance, laparoscopic artificial insemination was performed. In results, higher (P ≤ 0.05) sperm total motility, progressive motility, mitochondrial activity, membrane functionality and viability and lower (P ≤ 0.05) malondialdehyde and ROS concentration were observed in 5 and 50 μM Mito-TEMPO groups than the other groups.Therefore, supplementation of freezing and cooling medium with Mito-TEMPO (5 and 50 μM) could be an efficient method to improve the quality and reproductive efficiency of ram's semen.

Variant Title

Effect of Mitochondria‑targeted antioxidant Mito-TEMPO on quality parameters of ram sperm after freezing-thawing process

Entry Element

‏زارعی،

Part of Name Other than Entry Element

‏فاطمه

Relator Code

تهيه کننده

Entry Element

‏دقیق کیا،‏

Entry Element

مسعودی،

Entry Element

مقدم،

Entry Element

ابراهیمی،

Part of Name Other than Entry Element

‏حسین

Part of Name Other than Entry Element

‏رضا

Part of Name Other than Entry Element

‏غلامعلی

Part of Name Other than Entry Element

‏مرضیه

Dates

استاد راهنما

Dates

استاد راهنما

Dates

استاد مشاور

Dates

استاد مشاور

Entry Element

‏ تبریز