عنوان

اثرات مهار ژن نوکلئوستمین بر روی رشد و مرگ رده سلولی‮‭NB۴‬ به عنوان مدل آزمایشگاهی لوسمی پرومیلوسیتیک حاد انسانی

Number

‭۸۴۹۰پ‬

.Language of Text, Soundtrack etc

per

Title Proper

اثرات مهار ژن نوکلئوستمین بر روی رشد و مرگ رده سلولی‮‭NB۴‬ به عنوان مدل آزمایشگاهی لوسمی پرومیلوسیتیک حاد انسانی

First Statement of Responsibility

/نازیلا مقترن بناب

Name of Publisher, Distributor, etc.

تبریز:دانشگاه تبریز،دانشکده علوم طبیعی ،گروه زیست شناسی جانوری

Specific Material Designation and Extent of Item

‮‭۱۲۱‬ص.‬

Text of Note

چاپی

Dissertation or thesis details and type of degree

کارشناسی‌ارشد

Discipline of degree

بیوشیمی

Date of degree

‮‭۱۳۹۰/۰۶/۲۰‬

Body granting the degree

تبریز:دانشگاه تبریز،دانشکده علوم طبیعی ،گروه زیست شناسی جانوری

Text of Note

لوسمی پرومیلوسیتیکی حاد ‮‭(APL)‬نوعی بیماری خونی بدخیم می باشد که در اثر تکثیر بی رویه و عدم تمایز سلول های بنیادی خون ساز ایجاد می شود .از جمله راهکارهای اخیر در درمان لوسمی شناسایی مسیرهای سیگنالی درگیر در سلول‌های بنیادی سرطانی می باشد .در این محتوا، نوکلئوستمین‮‭(NS)‬ ، یک پروتئین هستکی متصل شونده به ‮‭GTP‬ می‌باشد که درای نقش عمده‌ای در کنترل رشد وآپوپتوز سلول های بنیادی و سرطانی است .در این مطالعه، اثرات خاموشی ژن ‮‭NS‬ بر روی رده سلولی ‮‭NB۴‬ به عنوان مدل ‮‭APL‬ برای اولین بار بررسی شده است .سلول های ‮‭NB۴‬ در حضورغلظت ‮‭nM۲۰۰‬ از‮‭siRNA - NS‬کشت داده شدند .سطوح بیان ژن ‮‭NS‬ توسط‮‭PCR - RT‬بررسی گردید .به منظور بررسی مهار رشد و مرگ سلولی به ترتیب آزمون دفع رنگ تریپان بلوو میکروسکوپ فلورسنت به کار گرفته شد .تمایز ازنظر ریخت شناسی و بیولوژیکی به ترتیب با استفاده از رنگ آمیزی رایت-گیمسا و فعالیت فاگوسیتیکی ذرات لاتکس بررسی شد .نتایج نشان دادند که ژن ‮‭NS‬ دارای بیان بالایی در سلول های ‮‭NB۴‬ می باشد ‮‭۴۸‬ .ساعت پس از تیمار با‮‭siRNA- NS‬، سطح ‮‭mRNA‬ ژن ‮‭NS‬ در مقایسه با سلول های کنترل به میزان ‮‭۳۶‬ کاهش یافت .در فاصله‌ی زمانی‮‭۱۲ - ۷۲‬ساعت پس از تیمار رشد سلول ها به میزان‮‭۱۵ - ۱/۳۵‬درصد کاهش یافت .بعد از زمان تیمار طولانی ویژگی‌های تمایز نظیر کاهش نسبت هسته به سیتوپلاسم و هضم ذرات لاتکس مشاهده شد که تمایز به سمت رده مونوسیت -ماکروفاژی را تائید کردند .با توجه به اثرات مهار رشدی و تمایزی مهار ‮‭NS‬ در سلول های ‮‭NB۴‬ توسط‮‭siRNA- NS‬، ‮‭NS‬ می تواند به عنوان یک هدف جدید در درمان بیماران ‮‭APL‬پیشنهاد شود.

Text of Note

bcute promyelocytic leukemia (APL) is a malignant hematopoietic disorder that causes by indefinite proliferation and lack of differentiation of leukemia stem cells. Elucidation of signaling pathways involved in cancer stem cells are current strategies in treatment of cancers. In this content, nucleostemin (NS), a nucleolar GTP binding protein, showed critical role in proliferation and apoptosis of cancer stem cells. In the peresent study, effects of NS gene silencing in NB4 cell line as an APL model has been studied for the first time. NB4 cell line was cultured in the presence of 200 nM NS-siRNA. NS gene expression levels were determined by semi-quantitative reverse transcription polymerase chain reaction (RT-PCR). Trypan blue exclusion test and Fluorescent microscopy were used to evaluate growth inhibition and apoptosis of NB4 cells, respectively. Differentiation was studied morphologically and biologically using Wright-Giemsa staining and latex particle phagocytic activity, respectively. The results showed that NS gene was highly expressed in NB4 cells. NS-siRNA transfection in to NB4 cells at 200nM inhibited NS-mRNA level up to 36 after 48 h when compared to corresponding control cells. After 12-72 h of treatment with 200 nM siRNA, growth was inhibited up to 15-35.1 , respectively. After longer treatment times differentiation characteristics such as decrease in nuclear cytoplasm ratio and ingestion of latex particles were observed, confirmed that differentiation toward monocyte/macrophage. Based on differentiating and growth inhibitory effects of NS-siRNA, NS can be proposed as a new target for treatment of APL patients.

Differentiation

Acute promyelocitic leukemia

NB4 cell line

Nucleostemin

مقترن بناب، نازیلا

موسوی،محمدامین، استادراهنما

حسینپور فیضی،محمدعلی، استادراهنما

Public note

سیاه و سفید

نمایه‌سازی قبلی