بررسی پلیمورفیسم ژن کالپاستاتین(CAST) در گوسفندان نژاد مغانی با استفاده از روشRFLP- PCR
First Statement of Responsibility
/اعظم ترابی
.PUBLICATION, DISTRIBUTION, ETC
Name of Publisher, Distributor, etc.
دانشگاه تبریز: دانشکده کشاورزی، گروه علوم دامی
PHYSICAL DESCRIPTION
Specific Material Designation and Extent of Item
۱۲۷ص
NOTES PERTAINING TO PUBLICATION, DISTRIBUTION, ETC.
Text of Note
چاپی
CONTENTS NOTE
Text of Note
فاقداطلاعات کامل
DISSERTATION (THESIS) NOTE
Dissertation or thesis details and type of degree
کارشناسی ارشد
Discipline of degree
علوم دامی-گرایش ژنتیک و اصلاح نژاد دام
Date of degree
۱۳۸۵/۱۲/۲۵
Body granting the degree
دانشگاه تبریز: دانشکده کشاورزی، گروه علوم دامی
SUMMARY OR ABSTRACT
Text of Note
تردی گوشت اجزای مهم کیفیت گوشت می باشد .سیستم پروتئازی کالپاینکالپاستاتین جزء دسته پروتئازهای خنثی وابسته به یون کلسیم است .کالپاستاتین مهار کننده اختصاصی پروتئازهای وابسته به کلسیم از جمله و - calpainاست .سنجش های انزیمی در گوسفند و گاو نشان داده است که میزان کالپاستاتین موجود در بدن با تردی گوشت رابطه عکس دارد .در گوسفندان، ژن مربوط به کالپاستاتین بر روی کروموزوم شماره ۵ قرار داشته و نقش مهمی در رشد و یا تحلیل ماهیچه و تردی گوشت دارد .در این پژوهش تعداد ۱۷۶ نمونه خون گوسفند نژاد مغانی به طور تصادفی گرفته شد .استخراج DNA از خون کامل با روش میلر و همکاران (۱۹۸۸) انجام گرفت .جهت تعیین کیفیت و کمیت DNA از روشهای ژل آگارز و اسپکتروفتومتری استفاده گردید .واکنش زنجیرهصای پلیمراز جهت تکثیر قطعه ۶۲۲ جفت بازی از اگزون I ژن CAST انجام گرفت .برای مشاهده محصولات PCR از ژل آگارز ۲/۱ درصد با رنگ آمیزی اتیدیوم بروماید استفاده گردید .قطعه تکثیر شده بوسیله آنزیم های برشی Msp I و Nco I مورد هضم آنزیمی قرار گرفت .محصولات هضم شده بر روی ژن آگارز ۲ الکتروفورز گردید .نرم افزار PopGene ۳۲ جهت تخمین فراوانی های اللی، ژنوتیپی و همچنین تعیین تعادل هاردی-واینبرگ به کار برده شد .ژنو تیپ های MM و MN و NN با فراوانیهای۲۹/۰ و ۵/۰ و ۲۱ در این گله تشخیص داده شد .فراوانی آللی M و N نیز به ترتیب ۵۴/۰ و ۴۶/۰ برآورد گردید .نتایج حاکی از وجود تعادل هاردی- واینبرگ در جمعیت گوسفندان مغانی بود .با توجه به نقش ژن کالپاستاتین در تردی گوشت، چنین به نظر می رسد که استفاده از این ژن به عنوان نشانگر DNA می تواند دقت انتخاب ژنتیکی را برای تردی گوشت افزایش دهد.
Text of Note
.Meat tenderness is one of the important components of meat quality. The calpain-calpastatin is a neutral proteases system which is dependent in Ca۲+. Calpastatin is the specific inhibitor of the ubiquitous calcium-dependent proteases such as and ?-calpain. Enzymatic assays from sheep and cattle inversely correlates post-mortem muscle calpastatin levels with ultimate tenderness. In the ovine, the gene for calpastatin is lied on chromosome ۵ and plays a regulatory role in muscle growth, wastage and meat tenderization following slaughter. For conducting this research, ۱۷۶ blood samples were obtained from Iranian native sheep breed (Moghani) from east Azerbaijan province. Genomic DNA was extracted from blood samples according to Miller et al.'s (۱۹۸۸) procedure. Gel monitoring and spectrophotometeric methods were used for detection of DNA quality and quantity. The PCR was used to amplify a segment with ۶۲۲ bp from Exon I of CAST gene. PCR products were recognized by electrophoresis on ۱.۲ agarose gel which stained with Ethidium Bromide. MspI and NcoI enzymes were used for restriction of PCR products. Digestion products were separated by electrophoresis on ۲ agars gel. PopGen ۳۲ software was used to estimate the allelic and genotypic frequencies as well as Hardy -Weinberg equilibrium. Frequency of MM, MN, NN genotypes were ۰.۲۹, ۰.۵, ۰.۲۱ and frequency of M and N alleles were obtained ۰.۵۴, ۰.۴۶ respectively and population was in Hardy-Weinberg equilibrium. With attention to the role of calpastatin gene in meat tenderness, it seems this gene can be use as DNA marker for further meat tenderness related studied