NATIONAL BIBLIOGRAPHY NUMBER
Number
۲۰۴۶پ
LANGUAGE OF THE ITEM
.Language of Text, Soundtrack etc
per
TITLE AND STATEMENT OF RESPONSIBILITY
Title Proper
بررسی کارآیی برخی آنزیم های برشی در تهیه مخزن ژنومی کلروپلاست سیب Malus domestica.Borkh))
First Statement of Responsibility
/نورعلی قیاسی
.PUBLICATION, DISTRIBUTION, ETC
Name of Publisher, Distributor, etc.
تبریز: دانشگاه تبریز،دانشکده کشاورزی ، گروه زراعت واصلاح نباتات
NOTES PERTAINING TO PUBLICATION, DISTRIBUTION, ETC.
Text of Note
چاپی
INTERNAL BIBLIOGRAPHIES/INDEXES NOTE
Text of Note
واژه نامه بصورت زیرنویس
Text of Note
کتابنامه ص.: ۹۶-۹۹
DISSERTATION (THESIS) NOTE
Dissertation or thesis details and type of degree
کارشناسی ارشد
Discipline of degree
مهندسی کشاورزی- بیوتکنولوژی
Date of degree
۱۳۸۸/۰۷/۰۵
Body granting the degree
تبریز: دانشگاه تبریز،دانشکده کشاورزی ، گروه زراعت واصلاح نباتات
SUMMARY OR ABSTRACT
Text of Note
سیب یکی از میوه هایی است که به خاطر داشتن ارزش غذایی بالا و ترکیبات آنتی اکسیدانتی رنگیزه های مفید از جمله کارتنوئیدها و آنتوسیانین ها در بین درختان میوه از جایگاه ویژه ای برخوردار می باشد بنابراین هرگونه بهبود در کیفیت ویا کمیت مواد موثره این گیاه ضرورت مطالعه روی آنرا آشکار می سازد .از آنجا که کلروپلاست اندامک مهمی برای متابولیسم مرتبط با این موضوع می باشد دستورزی ژنتیکی آن با ارزش بوده و اولین گام در تحقق هدف فوق دسترسی به ژنوم کلروپلاست در این گیاه می باشد تا بتوان از آن بعنوان مرجع تغییرات بیوشیمیایی مورد انتظار استفاده نمود .در این پژوهش روشهای مختلف جداسازی و خالص سازی کلروپلاست از بافتهای برگی ودسترسی به کلروپلاست با کیفیت وکمیت مطلوب و همچنین روشهای مختلف لیز کردن کلروپلاستهای بدست آمده برای دستیابی به DNA مطلوب بررسی شده است .پس از دستیابی به DNA کلروپلاست با کیفیت مناسب اقدام به تیمار آن با تعدادی از آنزیم های برشی به منظور تهیه مخزن ژنومی گردید .در این فرایند ابتدا هضم ناقصDNA ی کلروپلاستی انجام گرفته و قطعات برش یافته ناقص آنزیمی بر روی ناقل پلاسمیدی pUC۱۹ همسانه سازی شدند.پس از تراریخته سازی باکتریایی کلنی های تراریخته بوسیله تست آبی-سفید در محیط حاوی القاگر IPTG وپیش مادهgal X - و آنتی بیوتیک، شناسایی و پس از شمارش کلنی های مثبت تعدادی از آنها بطور تصادفی انتخاب و در محیط LB تلقیح شده و پلاسمید استخراج شده از آنها برای حضور قطعات DNA درجی کلروپلاست تجزیه و تحلیل شدند .در این کار تحقیقاتی برای اولین بار دستورالعمل جداسازی کلروپلاست و DNA کلروپلاستی در درخت سیب گزارش گردیده است وکارآیی کلیه آنزیم های بکار رفته برای تهیه مخزن ژنومی کلروپلاست مورد مقایسه قرار گرفتند.در نهایت با توجه به تعداد کلونی های مثبت اخذ شده از آنزیم های مختلف ،آنزیم EcoRI به عنوان آنزیم برشی مناسب معرفی گردید.
Text of Note
Apple is one of the fruits that has got special importance due to containing high nutrient value, anti oxidant compounds and useful pigments such as carotenoids and antocianes. Therefore any improvement in quality and quantity of efficient ingredients discloses the essentiality of research on this fruit. Since the chloroplast is an important organelle for relevant metabolism in this case, it's genetic manipulation is valuable and the first step to achieve for this goal is access to chloroplast genome in this plant so that it could be used as a source of biochemical improvement. In this research different methods were investigated for isolation and purification of chloroplast from leaf tissues and access to high quality and quantity of desired chloroplast as well as different methods for chloroplast lysis to obtain good quality ctDNA. After isolation of high quality ctDNA, it was treated by some restriction enzymes for preparing genomic library. In this process, at first partial digestion of ctDNA was performed and partial restricted fragments was cloned in pUC19 vector. Transformed clones was identified by white-blue test using medium containing IPTG inducer, X-gal precursor and antibiotic, and after counting of positive clones some of them was randomly elected and inoculated in LB medium and plasmid extraction carried out from this colonies and analyzed for inserted ctDNA fragments. In this research ctDNA isolation protocol from apple was reported for first time and the efficiency of restriction enzymes used for preparing chloroplast genomic library was compared, and with considering the number of positive colonies obtained from enzymes, the EcoRI could be introduced as an appropriate one.
TOPICAL NAME USED AS SUBJECT
Malus domestica
Borkh
Apple
Restriction enzymes
PERSONAL NAME - PRIMARY RESPONSIBILITY
قیاسی، نورعلی
PERSONAL NAME - SECONDARY RESPONSIBILITY
باغبان کهنه روز، بهرام، استاد راهنما
قلیزاده، اشرف، استاد مشاور
ولیزاده، مصطفی، استاد مشاور همکار
ELECTRONIC LOCATION AND ACCESS
Public note
سیاه و سفید
نمایه‌سازی قبلی
