عنوان

جداسازی راه‌اندازهای اختصاصی ژن های زئین بذر ذرت

Number

‭۳۳۳پ‬

.Language of Text, Soundtrack etc

per

Title Proper

جداسازی راه‌اندازهای اختصاصی ژن های زئین بذر ذرت

First Statement of Responsibility

/فرزاد بصیری کلوجه

Name of Publisher, Distributor, etc.

: کشاورزی

Specific Material Designation and Extent of Item

‮‭۸۶‬ ص‬

Text of Note

جدول، نمودار، عکس

Text of Note

چاپی

Text of Note

واژه نامه بصورت زیرنویس

Text of Note

کتابنامه ص.: ‮‭۸۲-۸۶‬

Dissertation or thesis details and type of degree

کارشناسی ارشد

Discipline of degree

مهندسی کشاورزی- بیوتکنولوژی

Date of degree

‮‭۱۳۸۹/۱۱/۲۵‬

Body granting the degree

تبریز

Text of Note

علیرغم اینکه همه سلول‌های یک موجود زنده دارای ژنوم یکسانی هستند، تمایز سلول‌ها، تشکیل بافتهای مختلف و تداوم عمل آنها نیازمند بیان اختصاصی برخی ژن‌ها در بافتها و شرایط مختلف است راه‌اندازهای ژنی یکی از اصلی‌ترین وظایف را در این مورد برعهده دارند .با توجه به اهمیت ذرت به عنوان یک گیاه زراعی و یک گونه مدل مهم در مطالعات ژنتیکی، جداسازی بخش راه‌اندازی ژن‌های آلفا-زئین به عنوان راه‌اندازهای اختصاصی بذر، در این تحقیق هدف‌گیری شد .این راه‌اندازها چه در تولید پروتئین‌های نوترکیب و چه در تغییر کیفیت و خصوصیات بذر/دانه ذرت می‌توانند حائز اهمیت باشند .به منظور جداسازی این راه‌اندازهای اختصاصی ، ابتدا اطلاعات موجود در پایگاه داده‌های نوکلئوتیدی، جمع‌آوری شده، سپس اقدام به طراحی آغازگرهای اختصاصی از توالی‌های مرتبط گردید و از آنها برای تکثیر راه‌اندازها توسط واکنش زنجیره‌ای پلیمراز استفاده شد .برای تهیه ماده آزمایشی گیاهی، بذور دو رقم ‮‭۷۰۴‬ و ذرت شیرین در شرایط گلخانه‌ای کشت شده و با استفاده از روش ‮‭CTAB‬ از گیاهان دو برگی ‮‭DNA‬ کل استخراج شد .پس از ارزیابی محصولات تکثیری و استخراج آنها از ژل، اقدام به همسانه‌سازی آنها در ناقل‮‭Easy Vector - pGEM‬ ‮‭T‬گردید .سپس باکتری‌های سویه ‮‭DH۵‬ با استفاده از روش ‮‭TSS‬ مستعد شده و با محصول واکنش اتصال تراریخت شدند .برای گزینش کلنی‌های موردنظر از آمپی سیلین و تست آبی- سفید در حضور‮‭gal - X‬و ‮‭IPTG‬ استفاده شد .حضور قطعه مورد نظر در پلاسمید نیز توسط واکنش زنجیره‌ای پلیمراز کلنی‌ها و برش آنزیمی تأیید شد .پس از توالی‌یابی، نتایج بدست آمده با اطلاعات موجود در شبکه مقایسه شده و تفاوت‌ها و شباهت‌های آنها مشخص گردید.

Text of Note

Althuogh every cell in a living organism has the same genome, but cellular differentiation, develpment to different tissues and normal performance need the specific gene expression in differenrt tissues and environmental conditions. In this context gene promoters have got vital role. Due to the importance of genetic studies on maize as a model species, and high value seed-specific characters, the isolation of ?-zein promoters was targeted in this research, which could be used in recombinant protein production and seed/grain related features. To reach this aim, first of all nucleotide sequences of ?-zeins were collected, specific primers were designed by bioinformatic tools and ordered for synthesis. Two varieties of maize (704 and sweet corn) were used. In practice, Genomic DNA was extracted by CTAB method and quantified for proper use in PCR. Amplified fragments were extracted from agarose gel and cloned in pGEM-T Easy Vector. Transformant colonies were screened by ?-complementation test and presence of amplified fragments in plasmids was confirmed by colony PCR and restriction enzymes. Finally plasmids were sequenced and obtained results were used for comparative studies with previously reported data on the data bases.

Promoter

Seed-specific Promoters

a-zein

Zea mays L.

بصیری کلوجه، فرزاد

باغبان، بهرام، استاد راهنما

قلیزاده، اشرف، استاد مشاور

Public note

سیاه و سفید

نمایه‌سازی قبلی