عنوان

بررسی بیان ‮‭microRNA(miR)-۴۲۴-۵p‬ و ‮‭PD-L۱‬ در بافت و رده‌ی سلولی سرطان پستان و اثر جایگزینی ‮‭miR -۴۲۴-۵p‬ در مهار بیان ‮‭PD -L۱‬، رشد و مهاجرت سلولی و القاء آپوپتوز در رده‌ی سلولی سرطان پستان,‮‭Evaluation of expression of microRNA(miR)-۴۲۴-۵p and PD-L۱ in breast cancer tissue and cell line & the effect of miR-۴۲۴-۵p replacement on inhibition of PD-L۱ expression, cell growth, cell migration and induction of apoptosis in breast cancer cell line‬

Number

‭۲۳۶۱۰پ‬

.Language of Text, Soundtrack etc

per

Title Proper

بررسی بیان ‮‭microRNA(miR)-۴۲۴-۵p‬ و ‮‭PD-L۱‬ در بافت و رده‌ی سلولی سرطان پستان و اثر جایگزینی ‮‭miR -۴۲۴-۵p‬ در مهار بیان ‮‭PD -L۱‬، رشد و مهاجرت سلولی و القاء آپوپتوز در رده‌ی سلولی سرطان پستان

Parallel Title Proper

‮‭Evaluation of expression of microRNA(miR)-۴۲۴-۵p and PD-L۱ in breast cancer tissue and cell line & the effect of miR-۴۲۴-۵p replacement on inhibition of PD-L۱ expression, cell growth, cell migration and induction of apoptosis in breast cancer cell line‬

First Statement of Responsibility

/نرگس دستمالچی

Name of Publisher, Distributor, etc.

: علوم طبیعی

Date of Publication, Distribution, etc.

، ‮‭۱۳۹۹‬

Name of Manufacturer

، کبیری

Specific Material Designation and Extent of Item

‮‭۱۰۷‬ص‬

Text of Note

چاپی - الکترونیکی

Dissertation or thesis details and type of degree

دکتری

Discipline of degree

زیست شناسی گرایش ژنتیک مولکولی

Date of degree

‮‭۱۳۹۹/۰۷/۳۰‬

Body granting the degree

تبریز

Text of Note

‮‭microRNA (miR)‬ ها بعنوان تنظیم‌کنندگان کلیدی فرآیندهای سلولی مانند رشد سلولی، آپوپتوز، مهاجرت سلولی و همچنین پاسخ‌های ایمنی ضد سرطانی شناخته شده و مطرح هستند .در این پروژه، ما نقش ‮‭miR-۴۲۴-۵p‬ را بعنوان یک ‮‭miR‬ تومور ساپرسور بالقوه در سرطان پستان مطالعه نمودیم و هم‌چنین از طرفی اثرات ‮‭miR-۴۲۴-۵p‬را روی پاسخ‌های ایمنی مرتبط با سلول‌های ‮‭T‬ از طریق تنظیم بیان‮‭PD-L۱‬بررسی نمودیم .بافت‌های پستان توموری و نرمال مجاور توموری و هم‌چنین رده‌های سلولی سرطان پستان آماده و تهیه شده و بیان‮‭miR-۴۲۴-۵p‬ و‮‭PD-L۱‬و هم‌چنین مسیرهای مولکولی پایین دست آن از طریق‮‭PCR - qRT‬و وسترن بلات ارزیابی شدند .آنالیز ‮‭MTT‬ و فلوسایتومتری برای ارزیابی اثرات‮‭miR-۴۲۴-۵p‬بر روی رشد سلولی، آپوپتوز، اتوفاژی و چرخه‌ی سلولی مورد استفاده قرار گرفتند .کشت هم زمان سلول‌های ‮‭T‬ با سلول‌های سرطانی‮‭۲۳۱ -MB- MDA‬به منظور ارزیابی نقش‮‭miR-۴۲۴-۵p‬ در جلوگیری از فرسودگی سلول‌های ‮‭T‬ در مواجهه با سلول‌های سرطانی پستان انجام گردید .نتایج کاهش بیان‮‭miR-۴۲۴-۵p‬و افزایش بیان‮‭PD-L۱‬را در بافت‌های سرطان پستان نشان می‌دهد .ترنسفکشن‮‭miR-۴۲۴-۵p‬ به رده‌ی سلولی‮‭۲۳۱ -MB- MDA‬که بیان بالایی از‮‭PD-L۱‬را دارد، میزان بیان‮‭PD-L۱‬را در هر دو سطح ‮‭mRNA‬ و پروتئین کاهش می‌دهد .هم‌چنین،‮‭miR-۴۲۴-۵p‬ می‌تواند زیستایی و رشد سلول‌های‮‭۲۳۱ -MB- MDA‬را از طریق تنظیم مسیرهای آپوپتوزی و اتوفاژی کاهش دهد .بعلاوه،‮‭miR-۴۲۴-۵p‬می‌تواند توانایی تشکیل کلنی را در سلول‌های‮‭۲۳۱ -MB- MDA‬از طریق تنظیم بیان‮‭Oct‬ - ‮‭۳‬و‮‭Oct‬ - ‮‭۴‬کاهش دهد و منجر به توقف در فاز سلولی ‮‭G۲‬ بواسطه‌ی تنظیم بیان ‮‭P۲۷‬ و ‮‭Cdk۲‬ گردد .آنالیز وسترن بلات نشان داد که‮‭miR-۴۲۴-۵p‬ می‌تواند اثرات ضد تکثیری خود را از طریق تنظیم مسیر ‮‭PTEN/PI۳K/AKT/mTOR‬ انجام دهد .بعلاوه، نشان داده شد که مهار بیان‮‭L۱ - PD‬بوسیله‌ی‮‭miR-۴۲۴-۵p‬می‌تواند در تنظیم بیان سایتوکاین‌های افکتوری در سلول‌های ‮‭T‬ مشارکت داشته باشد .درنتیجه،‮‭miR-۴۲۴-۵p‬ می‌تواند بعنوان یک ‮‭miR‬ تومور ساپرسور در تنظیم رشد و آپوپتوز سلول‌های سرطانی پستان و پاسخ ایمنی مرتبط با سلول ‮‭T‬ بواسطه‌ی هدف‌گیری‮‭PD-L۱‬و واسطه‌های پایین دست آن در نظر گرفته شود .بنابراین، ما مشخص نمودیم که‮‭miR-۴۲۴-۵p‬می‌تواند بعنوان کاندید امیدوارکننده‌ای برای درمان سرطان پستان بر پایه‌ی بازگرداندن سطح ‮‭miR‬ در داخل سلول باشد

Text of Note

MicroRNAs (miRs) are key modulators of cellular processes such as proliferation, apoptosis, as well as anti-cancer immune responses. Here, we evaluated the role of miR-424-5p in breast cancer (BC) and investigated its effects on T cell-related immune response. BC tissues and cell lines were prepared and the expression of miR-424-5p and PD-L1, as well as the underlying molecular pathways, were assessed via qRT-PCR and western blotting. The MTT assay and flow cytometry were used to assess the effect of miR-424-5p on proliferation, apoptosis, autophagy, and cell cycle progression. The co-culture of T cells with MDA-MB-231 was performed for evaluating the role of miR-424-5p in rescuing T cell exhaustion. The results indicated the down-regulation of miR-424-5p and up-regulation of PD-L1 expression in BC tissue specimens. MiR-424-5p transfection into PD-L1 overexpressing MDA-MB-231 cells decreased the expression of PD-L1. Also, miR-424-5p could reduce MDA-MB-231 cell viability through modulating apoptosis and autophagy pathways. Furthermore, miR-424-5p transfection leads to decreased colony formation and increased cell number at the G2/M phase. Western blot analysis illustrated that miR-424-5p could exert its anti-proliferative effect via modulating PTEN/PI3K/AKT/mTOR pathway. Moreover, it was demonstrated that suppression of PD-L1 by miR-424-5p could participate in regulating the expression of effector cytokines in T cells. MiR-424-5p could be considered as a potential tumor-suppressor miR in regulating BC cellular growth, apoptosis, and T cell-related immune response through targeting PD-L1, and its downstream mediators. Therefore, we recognized miR-424-5p as a promising candidate for miR restoration therapy in BC patients

Parallel Title

‮‭Evaluation of expression of microRNA(miR)-۴۲۴-۵p and PD-L۱ in breast cancer tissue and cell line & the effect of miR-۴۲۴-۵p replacement on inhibition of PD-L۱ expression, cell growth, cell migration and induction of apoptosis in breast cancer cell line‬

دستمالچی، نرگس

Dastmalchi, Narges

رضا صفرعلیزاده، استاد راهنما

محمدعلی حسین‌پورفیضی، استاد راهنما

بهزاد برادران، استاد مشاور

سید مهدی بانان خجسته، استاد مشاور

Public note

سیاه و سفید

نمایه‌سازی قبلی