بررسی امکان ایجاد اختلال در بیان برخی ژنهای شبپرهی مینوز گوجهفرنگی،Tuta absoluta (Meyrick)( Lep: Gelechiidae) ، با استفاده از فناوریRNAi
Parallel Title Proper
Exploring the possibility of disruption of gene experition in Tuta absoluta (Meyrick) (Lep: Gelechiidae) using RNA interference
First Statement of Responsibility
/سیما مجیدیانی
.PUBLICATION, DISTRIBUTION, ETC
Name of Publisher, Distributor, etc.
: کشاورزی
Date of Publication, Distribution, etc.
، ۱۳۹۸
Name of Manufacturer
، میرزائی
PHYSICAL DESCRIPTION
Specific Material Designation and Extent of Item
۱۳۱ص
NOTES PERTAINING TO PUBLICATION, DISTRIBUTION, ETC.
Text of Note
چاپی - الکترونیکی
DISSERTATION (THESIS) NOTE
Dissertation or thesis details and type of degree
دکتری
Discipline of degree
حشره شناسی کشاورزی - سم شناسی و قیزیولوژی
Date of degree
۱۳۹۸/۰۹/۲۰
Body granting the degree
تبریز
SUMMARY OR ABSTRACT
Text of Note
شب پره مینوز گوجهفرنگی از جمله مهمترین آفات گوجهفرنگی و سایر گیاهان خانواده Solanaceae در دنیا محسوب می شود که از نظر اقتصادی اهمیت زیادی دارد .خسارت این حشره روی محصول گوجهفرنگی بین ۵۰ تا ۱۰۰ درصد گزارش شده است .این آفت در مراحل مختلف رشدی گیاه، به گل، برگ، ساقه و در مرحله میوه دهی به میوه میزبان خسارت میزند .کنترل مینوز گوجهفرنگی وابسته به کاربرد حشره کشهای شیمیایی است .به دلیل توسعهی مقاومت لاروها به آفتکشهای شیمیایی و خطرات سوء آنها روی محیط زیست و سلامت انسانها، جایگزین کردن روشهای کنترل جدید ضروری به نظر میرسد RNA .مداخلهگر به عنوان جدیدترین و کارآمدترین ابزار خاموش کردن اختصاصی بیان ژنها در سطح پس از نسخه برداری شناخته شده است .در این مطالعه، RNA دو رشتهای سه ژن بیانکنندهی استیل کولین استراز(AChE) (>KU۹۸۵۱۶۷.۱) ، گیرندههای نیکوتینی استیل کولین زیرواحد آلفا (nAChRs) (>KP۷۷۱۸۵۹.۱) ۶ و گیرندههای ریانودینی (RyRs) (>KX۵۱۹۷۶۲.۱) سنتز و و از طریق تزریق و انتقال ریشهای dsRNA در گیاهان گوجهفرنگی و تغذیه لاروهای سن سوم مینوز برگ گوجهفرنگی از آن، مورد بررسی قرار گرفتند .در روش تزریق، در غلظت پایینتر (۲ میکروگرم (سطح رونوشت به میزان ۶۰/۲۷ در ژنAChE ، ۵۰/۳۴ در ژن nAChRs و ۸۰/۴۸ در ژن RyRs کاهش یافت در حالیکه کاهش میزان بیان ژن در غلظت ۵ میکروگرم برای ژنهایAChE ، nAChRs و RyRs به ترتیب ۷۳/۶۳ ، ۳۶/۶۵ و ۴۲/۷۵ به دست آمد .در بالاترین میزان، ۵۹/۹۲ درصد مرگومیر ایجاد نمود .در این مرحله از زندگی لاروهای تیمارشده، در تزریق مربوط بهRyRs - dsRNAوAChE - dsRNAاختلاف معنیداری بین دو غلظت مورد استفاده وجود داشت در حالیکه در تزریقnAChRs - dsRNAاختلاف معنیداری بین دو غلظت مورد استفاده مشاهده نشد .( (۰۵/۰>P نتایج بدست آمده از روش تغذیه لاروها از dsRNA جذب شده توسط ریشه در غلظت ۵ میکروگرم، توانایی این سامانه، انتقال و تاثیر آن در بیان ژن و مرگ ومیر لاروهای تیمار شده را ثابت کرد .نتایج این بررسی نشان داد که میزان بیان نسبی ژن RyRs، AChE و nACHRs در لاروهای سن سوم که از برگهای تیمارشدهی گوجهفرنگی تغذیه کرده بودند، به ترتیب ۴۷ درصد، ۵۴ درصد و ۶۹ درصد کاهش یافت .میزان مرگومیر نسبی در گیاهان تیمار شده باRyRs- dsRNA،AChE - dsRNAوnAChRs - dsRNAبه ترتیب برابر با۶۷.۱۵ ، ۷۴.۲۸ و ۸۰.۴۷ درصد بود .تیمارهای مورد بررسی با یکدیگر اختلاف معنیدار نداشتند اما با شاهد اختلاف معنیداری را نشان دادند dsRNA .به کار برده شده در هردو روش، به صورت معنیداری، موجب کاهش وزن پیششفیره و شفیرههای لاروهای تیمار شدهی پروانهی مینوز برگ گوجهفرنگی در مقایسه یا لاروهای شاهد شدند .کاهش بیان ژن به روش انتقال dsRNA از راه جذب ریشهای که در این مطالعه برای اولین بار روی حشرات مورد بررسی قرار گرفت، میتواند به عنوان یک روش کنترلی در کاربردهای مزرعهای و کشتهای هیدروپونیک مورد بررسی قرار بگیرد .از یافتهها و نتایج حاصل میتوان از تکنیک RNAi برای یافتن روشهای جدید مدیریت آفات در IPM استفاده نمود
Text of Note
The tomato leaf miner Tuta absoluta (Meyrick, 1917) (Lepidoptera: Gelechiidae) is considered worldwide as one of the most important tomato pests. This pest will result in 50 to 100 crop damage, if it is not controlled. The larvae feed and develop inside the tomato leaves, stems and fruits throughout the entire growing cycle. Insecticide resistance has been reported on the moth and the awareness about the negative impact of agrochemicals on the environment and human health have raised the demand for new and alternative control tools. The post-transcriptional gene silencing mechanism, RNAi has been known as the novel and most effective means of specific gene silencing. In this study, dsRNAs targeting acetylcholinesterase (AChE), nicotinic acetylcholine alpha 6 (nAChRs), ryanodine (RyRs) receptors of the 3rd instar larvae were knocked down, using injection and root delivery methods. In the injection procedure, the transcript level of AChE, nAChRs and RyRs was reduced to 27.60, 34.50 and 48.80 in the lower concentration (2g/ml), respectively. While, it was reduced to 63.73, 65.36, 75.42 were reduced in the 5 g/ml consentration, respectively, Inducing a maximum mortality rate of 92.59. At the treated larvae, there was a significant difference in the dsRNA-RyRs and dsRNA-AChE injection between the two concentrations (2 and 5 g/ml), while there was no significant difference in the dsRNA
PARALLEL TITLE PROPER
Parallel Title
Exploring the possibility of disruption of gene experition in Tuta absoluta (Meyrick) (Lep: Gelechiidae) using RNA interference