بررسی اثر سدیممتابیسولفیت به عنوان نگهدارنده مواد غذایی بر روی باکتریهای سالمونلا تیفیموریوم و لیستریا منوسیتوژنز و سلولهایHFFF۲
Parallel Title Proper
The Evaluation of Sodium Metabisulfite effect as a food preservative on Listeria monocytogenes, Salmonella typhimurium and the HFFF۲ cells
First Statement of Responsibility
/افشین علی محمدی شاملو
.PUBLICATION, DISTRIBUTION, ETC
Name of Publisher, Distributor, etc.
: دامپزشکی(پردیس)
Date of Publication, Distribution, etc.
، ۱۳۹۸
Name of Manufacturer
، میرزائی
PHYSICAL DESCRIPTION
Specific Material Designation and Extent of Item
۸۳ص
NOTES PERTAINING TO PUBLICATION, DISTRIBUTION, ETC.
Text of Note
چاپی - الکترونیکی
DISSERTATION (THESIS) NOTE
Dissertation or thesis details and type of degree
کارشناسی ارشد
Discipline of degree
بهداشت و کنترل کیفی موادغذایی
Date of degree
۱۳۹۸/۰۶/۳۰
Body granting the degree
تبریز
SUMMARY OR ABSTRACT
Text of Note
سالانه میلیونها نفر از مردم سراسر جهان در اثر بیماریهای ناشی از غذا و آب جان خود را از دست میدهند .افزایش بیماریهای ناشی از غذا، نشانگر شیوع و گسترش مشکلات بهداشت عمومی، در کشورهای توسعه یافته و در حال توسعه است، که علاوه بر تهدید سلامت مصرف کننده میتواند در اقتصاد کشورها دخیل باشد. کاربرد ترکیبات شیمیایی و حضور میکروارگانیسمها در مواد غذایی میتواند نقش مهمی در ایجاد بیماریهای ناشی از مواد غذایی داشته باشد .یکی از شایعترین بیماریهای مرتبط با کاربرد ترکیبات شیمیایی، سرطانها هستند، که رتبه دوم مرگومیر را در کشورهای توسعه یافته و رتبه سوم را در کشورهای در حال توسعه به خود اختصاص دادهاند .اخیرا ترکیبات شیمیایی از جمله افزودنیهای غذایی به عنوان یکی از عوامل تاثیرگذار در ایجاد این بیماریها معرفی شدهاند .بر این اساس هدف این مطالعه تعیین سمیت سلولی ماده متابیسولفیتسدیم به عنوان افزودنی غذایی بر رده سلولی HFFF۲ و همچنین تعیین خاصیت انتیباکتریایی این ماده میباشد .بررسی انجام آزمونهای سمیت سلولی، سلولهای HFFF۲ با غلظتهای مختلف متابیسولفیتسدیم در مدت زمان ۲۴ ساعت تیمار شدند .جهت تعیین سمیت سلولی از تست MTT و بررسی میزان آپوپتوز به روش فلوسایتومتری، بررسی شکستگیDNA ، القاء اتوفاژی، بررسی تولید گونههای واکنشپذیر اکسیژن و بررسی بیان برخی ژنها به روش Real Time PCR استفاده شد .همچنین جهت تعیین خاصیت آنتیباکتریایی این ماده افزودنی، از تستهای ایجاد چاهک و دیسکگذاری استفاده گردید .نتایج تست MTT برای تعیین زندهمانی سلولی نگهدارنده متابیسولفیتسدیم بعد از ۲۴ ساعت نشان داد، که غلظت مهاری رشد این ماده در غلظت ۲۵ میکرومولار است .رخداد مرحله آپوپتوزیس سلولی در سلولهای تیمار شده با متابیسولفیتسدیم و رنگآمیزی شده باAnnexine - Vبا استفاده از دستگاه فلوسایتومتری ارزیابی شد .بر اساس تکنیکهای DNA Lader و رنگآمیزی DAPI بعد از ۲۴ ساعت در سلولهای تیمار شده با متابیسولفیتسدیم شکستگی DNA و کروماتین مشهود بود .نتایج حاصل از القاء اتوفاژی و تولید گونههای واکنشپذیر اکسیژن نشان دهنده ایجاد حالت اتوفاژی در سلول و تولید ROS در غلظتهای تیمار شده از سلول بود .همچنین بررسی نتایج حاصل از ارزیابی سمیت ژنتیکی سلولهای تیمار شده با متابیسولفیتسدیم با استفاده از Real Time PCR نشان داد، که این ماده افزودنی با افزایش بیان ژنهایCaspase۸ ،Caspase۹ ، Bax و P۵۳ و کاهش بیان ژن آنتیآپوپتوتیک Bcl۲ باعث وقوع آپوپتوز میشود .همچنین نتایج حاصل از تستهای باکتریایی نشان داد این ماده در غلظتهای۲۰۰ ، ۲۵۰و ۳۷۵ میکرومول دارای خاصیت باکتریکشی است .نتایج حاکی از این بود که دوزهای بالای این ماده اثر سمی بر سلول دارد بنابراین بهتر است تدابیر لازم برای کاهش مقدار مصرف این ماده در صنایع غذایی بهکار رود و از نگهدارندههای طبیعی در کنار این ماده برای جایگزینی بخشی از آن استفاده شود
Text of Note
Background and objective: Annually millions of people in the around world suffer from food borne diseases though consumption of contaminated food and water. Increasing outbreaks of transmitted diseases through foodstuff indicate the increasing of public health problems in low- and middle-income countries and as well as effect consumers health can be involved in the economies of the countries. Therefore, the use of chemical compounds and the presence of microorganisms in food can play as important role in the development of food borne disease. Cancers one of the most common diseases associated with the consumption of chemical compounds witch the second rating mortality in the developed and third rating in developing countries. Recently, chemical compounds (food additives) have been introduced as one of the most important factors in the development of these diseases. Therefore, the aim of this study was to determine the cytotoxicity and genotoxicity of metabisulfite as a food additive on the HFFF2 cell line and also to determine the antibacterial properties of this substance. For genotoxicity and cytotoxicity tests, HFFF2 cells were treated with different concentrations of sodium metabisulfite for 24 hours. MTT assay was used to determine cytotoxicity and for determination of apoptosis. DNA fragmentation, chromatin fragmentation (DAPI), autophagy induction, production of reactive oxygen species (ROS) and expression of some genes assayes were used. In addition, well diffusion method and disk diffusion method were used to determine the antibacterial properties of this additive. MTT assay results to determine cell viability of sodium metabisulfite after 24 h showed that the inhibitory concentration of this substance was 25mol. The occurrence of cell apoptosis in cells treated with sodium metabisulfite and stained with Annexine-V was evaluated by flow cytometry. Based on DNA Lader techniques and DAPI staining, fragmentation of DNA and chromatin were evident after 24 hours in cells treated with sodium metabisulfite. The results of induction of autophagy and production of reactive oxygen species showed the formation of autophagy in the cell and production of ROS at the treated cells. Also, the results of the evaluation of genotoxicity of cells treated with sodium metabisulfite using Real Time PCR showed that this additive causes apoptosis by increasing expression of Caspase8, Caspase9, Bax, P53 genes and decreasing expression of Bcl2 genes. Finally, the results of bacterial tests showed that sodium metabisulfite has bactericidal activity at the concentrations used. Because high doses of this substance have a toxic effect on the cells, it is advisable to consider the necessary measures to reduce the amount of its use in foods and use natural preservatives with it to replace some of it
PARALLEL TITLE PROPER
Parallel Title
The Evaluation of Sodium Metabisulfite effect as a food preservative on Listeria monocytogenes, Salmonella typhimurium and the HFFF۲ cells