عنوان

تأثیر افزودن آنتی‌اکسیدان دی آسپارتیک اسید و سرعت یخ گشایی بر فرآیند انجماد/یخ گشایی منی قوچ,‮‭Effect of antioxidant D-Aspartic acid and thawing rate on the freeze-thawing process of ram semen‬

Number

‭۱۹۷۴۴پ‬

.Language of Text, Soundtrack etc

per

Title Proper

تأثیر افزودن آنتی‌اکسیدان دی آسپارتیک اسید و سرعت یخ گشایی بر فرآیند انجماد/یخ گشایی منی قوچ

Parallel Title Proper

‮‭Effect of antioxidant D-Aspartic acid and thawing rate on the freeze-thawing process of ram semen‬

First Statement of Responsibility

/صدیقه وطن خواه

Name of Publisher, Distributor, etc.

: کشاورزی

Date of Publication, Distribution, etc.

، ‮‭۱۳۹۷‬

Name of Manufacturer

، میرزائی

Specific Material Designation and Extent of Item

‮‭۷۶‬ص‬

Text of Note

چاپی - الکترونیکی

Dissertation or thesis details and type of degree

کارشناسی ارشد

Discipline of degree

علوم دامی- گرایش فیزیولوژی دام

Date of degree

‮‭۱۳۹۷/۰۶/۱۸‬

Body granting the degree

تبریز

Text of Note

سابقه و هدف :امروزه عمل تلقیح مصنوعی از جایگاه ویژه‌صای در بهبود راندمان تولید، اصلاح و پیشرفت ژنتیکی برخوردار است .به منظور تحقق بخشیدن به بسیاری از مزایای بالقوه تلقیح مصنوعی، ذخیره‌صسازی بلند مدت منی یک امر ضروری محسوب می‌صشود .این امر توسط فرایند انجماد محقق می‌صشود .مراحل انجماد از جمله فرایند یخ‌صگشایی منجر به تغییرات مورفولوژیکی، آسیب به عملکردهای طبیعی اسپرم و در نهایت کاهش باروری می‌صشود .بنابراین، بهبود روش‌صهای انجماد /یخ-گشایی منی قوچ با شاخص‌های کیفی اسپرم ارتباط داشته و از اهمیت قابل‌توجهی برخورداراست .بنابراین هدف از تحقیق حاضر بررسی اثر دی‌صآسپارتیک اسید‮‭Asp) - (D‬بعنوان مکمل آنتی‌صاکسیدانی و اثرات دو روش یخ‌صگشایی بر فراسنجه‌صهای میکروسکوپی، فعالیت‌ص‍ آنزیم‌صهای گلوتاتیون پراکسیداز و سوپراکسیددیسموتاز و ظرفیت آنتی‌صاکسیدانی کل منی قوچ پس از فرایند انجماد-یخ‌صگشایی بود .مواد و روش :در این مطالعه، نمونه‌های منی از پنج رأس قوچ قزل ‮‭(۳‬ تا ‮‭۵‬ ساله(، در فصل تولیدصمثلی و با استفاده از مهبل مصنوعی، دوص‍ بار در هفته جمع‌صآوری شده و بلافاصله به آزمایشگاه منتقل گردیده و در حمام آب گرم ‮‭۳۷‬ درجه سانتی‌صگراد قرار داده شدند .برای از بین بردن اثرات فردی دام‌های نر، نمونه‌صهای منی در هر بار اسپرم-گیری با هم مخلوط شده و سپس مورد استفاده قرار گرفتند .قبل از افزودن آنتی‌اکسیدان، خصوصیات کمی و کیفی نمونه‌های منی از قبیل حجم منی‮‭۷۵/۰ - (۲‬میلی‌لیتر(، غلظت) بیشتر از‮‭۱۰۹‬ ‌‮‭۳)‬، حرکت پیش‌رونده) بالاتر از ‮‭۷۰‬ درصد (و اسپرم‌های با شکل غیرنرمال) کمتر از ( ‮‭۱۰‬ ارزیابی شدند .نمونه‌صها با رقیق‌صکننده تریس حاوی ‮‭۵/۱‬ درصد لستین سویا و ‮‭۷‬ درصد گلیسرول رقیق شدند .سپس‮‭Asp - D‬در سه سطح‮‭(۵‬ ، ‮‭۱۰‬ و ‮‭۱۵‬ میلی‌صگرم/لیتر (همچنین یک تیمار شاهد که فاقد هرگونه آنتی‌اکسیدان افزودنی، مورد استفاده قرار گرفت و نمونه‌صها تا ‮‭۴‬ درجه سانتی گراد سردسازی شدند .سپس نمونهها در پایوتهای ‮‭۲۵/۰‬ میلی لیتری پر شده و پس از انجماد تا زمان ارزیابی در داخل تانک ازت نگهداری شدند .فرایند یخ-گشایی نمونه-ها درحمام آب گرم ‮‭۳۷‬ درجه سانتی گراد برای ‮‭۳۰‬ ثانیه و ‮‭۶۰‬درجه سانتی گراد برای ‮‭۶‬ ثانیه انجام شد .پس از یخگشایی پارامترهای تحرک، آسیب غشاء پلاسمایی، ناهنجاری، زنده‌صمانی، فعالیت میتوکندری، غلظت مالون‌صدی‌صآلدهید، فعالیت‌صهای آنتی اکسیدانی و ظرفیت آنتی‌صاکسیدانی کل اسپرم قوچ ارزیابی شدند .تجزیه و تحلیل داده‌ها در قالب طرح فاکتوریل کاملا تصادفی توسط برنامه آماری ‮‭SAS‬ و به کمک رویه‮‭GLM‬ انجام شد .اختلاف میانگین‌ها با استفاده از روش توکی مورد مقایسه قرار گرفتند .اختلاف معنی‌داری در سطح پنج درصد گزارش شد .نتایج :افزودن ‮‭۱۰‬ میلی‌صگرم بر لیتر از‮‭Asp - D‬توانست بطور معنی‌صداری تحرک پیش‌صرونده، میانگین سرعت در مسیر و درصد سرعت در مسیر مستقیم را پس از فرایند انجماد/یخ‌صگشایی بهبود بخشد .‮‭(۰۵/۰>P)‬ آسیب غشاء پلاسمایی، فعالیت میتوکندری، زنده‌صمانی، ظرفیت آنتی‌صاکسیدانی کل و گلوتاتیون پراکسیداز در سطح ‮‭۱۰‬ میلی‌صگرم بر لیتر از‮‭Asp - D‬نسبت به سایر گروه‌صها بالاتر بود .‮‭(۰۵/۰>P)‬ همچنین در این سطح میزان اسپرم‌صهای ناهنجار بطور قابل توجهی نسبت به سطح ‮‭۱۵‬ میلی‌صگرم بر لیتر و گروه شاهد کاهش یافت .‮‭(۰۵/۰>P)‬نتایج نشان داد که سطح مالون‌صدی‌صآلدهید در دوز ‮‭۱۰‬ میلی‌صگرم بر لیتر در مقایسه با سایر تیمارها کاهش یافت .‮‭(۰۵/۰>P)‬ علاوه بر این زنده‌صمانی و فعالیت میتوکندری در پروتکل یخ‌صگشایی ‮‭۳۷‬ درجه سانتی‌صگراد برای ‮‭۳۰‬ ثانیه بهبود قابل توجهی یافت .‮‭(۰۵/۰>P)‬ نتیجه‌صگیری :نتایج مطالعه حاضر نشان داد که افزودن‮‭Asp - D‬در سطح ‮‭۱۰‬میلی‌صگرم بر لیتر اثرات مفیدی بر کیفیت پس از یخ‌صگشایی منی قوچ طی حفاظت انجمادی دارد .بنابر این بنظر می‌صرسد افزودن این آنتی‌صاکسیدان به محیط انجمادی می‌صتواند برای حفاظت از اسپرم طی انجماد مناسب باشد .همچنین صبا توجه به نتایج بدست آمده از روش‌های یخ‌صگشایی، شاخص تحرک، بقاء و وضعیت اکسیداتیو در روش یخ‌صگشایی ‮‭۶۰‬درجه سانتی‌صگراد به مدت ‮‭۶‬ ثانیه بهبود نیافته و نتوانست جایگزین مناسبی برای روش یخ‌صگشایی ‮‭۳۷‬درجه سانتی‌صگراد به مدت ‮‭۳۰‬ ثانیه باشد

Text of Note

Background and objectives: Now a days, artificial insemination has a special place in improving production efficiency and improving genetic progress. In order to realize many of the potential benefits of artificial insemination, semen storage for a long-term is considered a necessary step by freezing process The freezing process, including the thawing process, leads to morphological changes, damage to the natural functions of the sperm and ultimately reduced fertility. Therefore, improving the freeze-thawing method of ram semen is related to the sperm quality indicators and is of considerable importance. The purpose of this study was conducted to determine the influence of D-aspartic Aacid (D-Asp) as antioxidant supplement and thawing rates on ram sperm motility, membrane integrity, abnormality, viability, mitochondria activity, malondialdehyde and antioxidant activities, and total antioxidant capacity after freezingthawing process. Materials and methods: Semen samples from five mature rams (3 and 5 years of age) were diluted with extenders (1.5 soybean lecithin, 7 glycerol) containing no supplements (control) and D-Asp (5, 10, and 15 mg/ L) and then, cryopreserved. Frozen straws were thawed at water bath temperatures at 37C for 30s and at 60C for 6s. Following the freeze-thawing process, the effects of time exposure and thawing temperature on the kinematic features (CASA), viability, plasma membrane integrity, morphological abnormalities, malondialdehyde concentration, antioxidant activity and total antioxidant capacity were evaluated.The experiment was conducted as a completely randomized factorial design and analyzed with GLM of SAS Software program. The data were analyzed by the general linear model (GLM) procedure of SAS software and statistical differences between the various group means were determined by Tukey-Keramer test. Significant differences were reported at the level of P<0.05. Results: Addition of 10 mg/L of D-Asp can improve significantly progressive motility, average path velocity, and straight-line velocity percentages after freezethawing (P < 0.05). Plasma membrane integrity, mitochondrial activity, viability, total antioxidant capacity, and glutathione peroxidase were higher in group receiving 10 mg/L in comparison with other treatments (P < 0.05). Meanwhile, total abnormality significantly decreased at the level of 10 mg/L D-Asp in comparison with the level of 15 mg/L and control group (P < 0.05). Our results revealed that malondialdehyde level was lower in group receiving 10 mg/L D-Asp compared to other treatments (P < 0.05). There were no significant interactions between concentrations of D-Asp and thawing protocols for any semen samples. Also, significant improvement in sperm viability and mitochondria activity were observed at 37C to 30s thawing method (P < 0.05). In overall, results of the present study demonstrate that addition of D-Aspat level of 10 mg/L have beneficial effect on quality of post-thawed of ram semen cryopreserved in an extender. Conclusion: Therefore, this antioxidant in the suitable dose can be recommended as an additional component of ram freezing extender. Also, 60C for 6s thawing procedure is not an appropriate replacement for 37C for 30 s

Parallel Title

‮‭Effect of antioxidant D-Aspartic acid and thawing rate on the freeze-thawing process of ram semen‬

وطن خواه، صدیقه

Vatankhah, Sedigheh

دقیق‌کیا، حسین، استاد راهنما

مقدم، غلامعلی، استاد مشاور

ابراهیمی، مرضیه، استاد مشاور

Public note

سیاه و سفید

نمایه‌سازی قبلی