عنوان

بررسی فعالیت ضد سرطانی عصاره گیاه ‮‭Euphorbia gypsicola‬ از خانواده افوربیاسه بر روی رده سلول لوسمی‮‭K۵۶۲‬

Number

‭۱۹۳۰۹پ‬

.Language of Text, Soundtrack etc

per

Title Proper

بررسی فعالیت ضد سرطانی عصاره گیاه ‮‭Euphorbia gypsicola‬ از خانواده افوربیاسه بر روی رده سلول لوسمی‮‭K۵۶۲‬

First Statement of Responsibility

/سینا سلطانی

Name of Publisher, Distributor, etc.

: علوم طبیعی

Date of Publication, Distribution, etc.

، ‮‭۱۳۹۶‬

Name of Manufacturer

، راشدی

Text of Note

چاپی

Dissertation or thesis details and type of degree

کارشناسی ارشد

Discipline of degree

زیست شناسی گرایش بیوشیمی

Date of degree

‮‭۱۳۹۶/۱۱/۱۷‬

Body granting the degree

تبریز

Text of Note

لوسمی میلوئید مزمن ‮‭(CML)‬ یک اختلال در سلول‌های هماتوپویتیک چندتوان می‌باشد که باعث افزایش گلبول‌های سفید خون می‌شود .لوسمی می‌تواند بر اساس نوع سلول‌های خونی که تحت تأثیر قرار می‌گیرند و همچنین براساس شدت و سرعت پیشرفت بیماری)حاد و مزمن بودن (به چهار نوع اصلی تقسیم‌صبندی شود .در این میان می‌توان به لوسمی میلوئید مزمن ‮‭(CML)‬ که از شناخته‌ترین اشکال لوسمی است اشاره کرد .در دهه‌های گذشته اکثر روش‌های درمان لوسمی شامل شیمی درمانی و پرتو درمانی بوده است .با این وجود شیمی درمانی با مشکلاتی از جمله اثرات جانبی ترکیبات شیمیایی و مقاومت به دارو همراه است .بر این اساس ترکیبات جدید برای یافتن عواملی که دارای اثرات جانبی کمتر و پتانسیل تومورکشی بیشتری باشند مورد بررسی قرار می‌گیرند .از آنجا که تقریبا ‮‭۶۰‬ ترکیبات ضد سرطان و ‮‭۷۵‬ داروهای بیماری‌صهای عفونی از ترکیبات طبیعی و یا از مشتقاتشان حاصل می‌صشود، این امر منجر به توجه به گیاهان به عنوان منبع غنی از ترکیبات طبیعی ضد سرطان شده است، بطوریکه منبعی غنی از داروصهای ضدصسرطان جدید حاصل از ترکیبات جداصشده از گیاهان دارویی است .در سال ‮‭۱۹۶۰‬ انیستیتوی بین المللی سرطان ‮‭(USA)‬ شروع به غربال عصاره گیاهانی کرد که دارای فعالیت آنتی‌صتوموری بودند .خانواده افوربیاسه دارای ترکیبات فعال است که منجر به القای آپاپتوز و مرگ در سلول‌صهای سرطانی می‌صشود ‮‭E.gypsicola‬ متعلق به این خانواده و آندمیک ایران است .در این مطالعه اثرات سیتوتوکسیک و آپاپتوزی عصاره اتانولی ‮‭E.gypsicola‬ بر روی رده‌ی سلولی ‮‭K۵۶۲‬ به عنوان مدل آزمایشگاهی لوسمی میلوئید مزمن ‮‭(CML)‬ مورد بررسی قرار گرفت .به این منظور رده‌ی سلولی ‮‭K۵۶۲‬ انسانی پس از کشت، تحت تأثیر عصاره اتانولی‮‭E.gypsicola‬ در غلظت و زمان‌های مختلف قرار گرفت، از آزمون تغییر رنگ ‮‭MTT‬ برای بررسی اثرات زیستایی این ترکیبات استفاده شد .پس از بررسی اثرات سیتوتوکسیک غلظتی از عصاره گیاهی که منجر به مهار رشد ‮‭۵۰‬ از سلول‌صها در ‮‭۴۸‬ ساعت می‌صشد برای انجام بررسی مکانیسم مرگ سلولی انتخاب شد .جهت بررسی تغییرات مورفولوژیک و نوع مرگ سلولی از میکروسکوپ نوری معکوس و فلورسنس استفاده شد .برای تایید مرگ آپاپتوزی از آزمون قطعه قطعه شدن ‮‭DNA‬ و آزمون‮‭AnnexinV/PI‬ استفاده گردید .همچنین برای مطالعه چرخه سلولی و مکانیسم مرگ سلولی تحت تاثیر عصاره گیاهی از فلوسایتومتری استفاده شد و از آزمون ‮‭ROS‬ و ‮‭Transwell‬به ترتیب برای بررسی میزان گونه‌صهای فعال اکسیژن و بررسی مهاجرت سلولی استفاده شد .در ادامه برای بررسی ویژگی-های تمایزی از آزمون ‮‭NBT‬ و رنگ‌صآمیزی رایت- گیمسا استفاده شد .داده‌های بدست آمده با استفاده از آزمون آماری‮‭test-t- student‬،‮‭image j‬، ‮‭uvidoc‬ و نرم افزار ‮‭excel ۲۰۱۰‬ مورد ارزیابی قرار گرفت .بنابر مشاهدات صورت گرفته گیاه ‮‭E.gypsicola‬ دارای خاصیت قوی ضدصلوکمی در سلول‌صهای ‮‭K۵۶۲‬ است و منجر به مهار رشد و همچنین القای آپاپتوز یا مرگ برنامه‌صریزی شده در این سلول‌صها می‌صگردد این مشاهدات نشان از حضور ترکیبات موثر بر القای آپاپتوز دارد که منجر به فعال شدن کاسپازها و در نهایت آپاپتوز می‌صشود این مشاهدات ابتدا توسط میکروسکوپ فلورسنس مشاهده گردید و در ادامه به واسطه مشاهده اسمیر ‮‭DNA‬ در گروه‌صهای تیمار شده با عصاره گیاهی قوت گرفت و در نهایت داده‌صهای حاصل از آزمون انکسین وجود آپاپتوز را تایید کرد .ازجمله عواملی که می‌صتواند در القای مرگ و پیش‌صبرد آپاپتوز موثر باشد وجود گونه‌صهای فعال اکسیژن است که با افزایش در سلول‌صهای سرطانی منجر به القای آپاپتوز می‌صگردد و بنابر داده‌صهای آزمون ‮‭ROS‬ میزان گونه‌صهای فعال اکسیژن افزایش یافته‌صاست .این عصاره گیاهی علاوه بر القای مرگ سلولی بر روی دیگر ویژگی‌صهای سلول‌صهای سرطانی مانند متاستاز سلولی نیز تاثیر دارد، که بصورت قابل توجهی منجر به مهار مهاجرت سلولی می‌صشود و تاییدی دیگر بر خاصیت ضدصسرطانی این عصاره است .القای‌صتمایز و تمایزدرمانی از دیگر عوامل موثر بر درمان سرطان خون است و داده‌صهای حاصل از آزمون رایت- گیمسا و نیز احیای‮‭NBT‬ تاییدی بر القای-تمایز به صورت تغییر در نسبت سیتوپلاسم به هسته و نیز القای توانایی آندوسیتوز در سلول‌صهای ‮‭K۵۶۲‬ است که از جمله مطالعات ابتدایی در تایید تمایز ماکروفاژ- منوسیتی است

Text of Note

Chronic myeloid leukemia (CML) is a disorder in multiple hematopoietic cells that increases white blood cells. It can be divided into four main types depends on the type of blood cells affected and also the severity and rate of disease progression (acute and chronic). Chronic myeloid leukemia (CML) is one of the most common forms of leukemia. In recent decades, Chemotherapy and Radiotherapy as usual treatment methods were used. However, chemotherapy involves problems such as side effects of chemical compounds and drug resistance. So, finding new compounds that have less side effects and more Anti-tumor potential are important. Since, 60 of anticancer compounds and 75 of infectious drug extracted from natural compounds or their derivatives, plants, specially medicinal plants as a source of natural anti-cancer compounds are consider. In 1960, the International Institute of Cancer (USA) began to screen the extracts of plants that had anti-tumor activity. The Euphorbia family, as medical plants, has active compounds that induce apoptosis and cell death in cancer cells. E.gypsicola is a member of this family and endemic of Iran. In this study, we investigated the cytotoxic and apoptotic effects of E.gypsicola ethanolic extract on the K562 cell line as a laboratory model of chronic myeloid leukemia (CML). The human K562 cell line was cultured with ethanolic extract of E.gypsicola at different concentrations and different times. The effect of ethanolic extract of E.gypsicola on growth and viability of cells measured by MTT assay. For evaluation of morphological changes and type of cell death, reverse optical microscopy and fluorescence microscopy were used. To confirm the apoptotic death, DNA fragmentation test and AnnexinV / PI test were used. Also, for studying cell cycle and cell death mechanism, flow cytometry was used and the ROS and Transwell tests were used to determine the amount of active oxygen species and cell migration. Further, for differentiation features, NBT test and Wright-Gimse staining were used. Data were analyzed using student-t-test, image j, uvidoc and excel 2010 software. According to the results, E.gypsicola has growth inhibition effect on K562 cells, as well as induction of apoptosis or programmed death in these cells. These results indicate the presence of effective compounds Induces apoptosis, which leads to the activation of caspases and ultimately apoptosis. These results were observed by fluorescence microscope and further enhanced by observation of DNA smear in treated groups, and finally the result of annexin V test confirmed. One of the factors that can affect the induction of death and apoptosis is the presence of active oxygen species, which leads to induction of apoptosis in cancer cells, according to ROS test data, the amount of active oxygen species Increased. In addition, this extract also has an effect on other characteristics of cancer cells, such as cellular metastases, which significantly inhibits cell migration, and also the anti-cancer properties of this extract. The induction of differentiation and differentiation treatment are other factors affecting the leukemia cells, and the data from the Writhe and Gimssa test as well as the revival of NBT confirm the induction-differentiation by changing the cytoplasmic-to-nucleus ratio and inducing endostiosis in K562 cells as one of the primary studies in confirming the differentiation of macrophage-monocyte

سلطانی، سینا

مهدوی، مجید، استاد راهنما

نوزاد، حجت اله، استاد مشاور

جعفری، سیدمحمد، استاد مشاور

Public note

سیاه و سفید

نمایه‌سازی قبلی