NATIONAL BIBLIOGRAPHY NUMBER
Number
۱۶۶۹۶پ
LANGUAGE OF THE ITEM
.Language of Text, Soundtrack etc
per
TITLE AND STATEMENT OF RESPONSIBILITY
Title Proper
طراحی و ساخت سازه RNAi اختصاصی برای ژن پوترسینN -متیل ترانسفراز توتون
First Statement of Responsibility
/سهیلا موسی‌الرضایی
.PUBLICATION, DISTRIBUTION, ETC
Name of Publisher, Distributor, etc.
: کشاورزی
Date of Publication, Distribution, etc.
، ۱۳۹۴
Name of Manufacturer
، راشدی
NOTES PERTAINING TO PUBLICATION, DISTRIBUTION, ETC.
Text of Note
چاپی
DISSERTATION (THESIS) NOTE
Dissertation or thesis details and type of degree
کارشناسی ارشد
Discipline of degree
بیوتکنولوژی کشاورزی
Date of degree
۱۳۹۴/۱۱/۱۰
Body granting the degree
تبریز
SUMMARY OR ABSTRACT
Text of Note
توتون گیاهی چند ساله است که به منظور استعمال دخانیات کشت می‌صشود .سالیانه عده زیادی به خاطر استعمال سیگار دچار بیماری‌صهای مختلفی شده و جان خود را از دست می‌صدهند .پس از تدخین دود توتون، نیکوتین موجود در آن ظرف چند ثانیه وارد جریان خون شده و به مغز می‌صرسد و باعث ترشح دوپامین می-شود .اثر دوپامین تولید شده سریعا از بین رفته و فرد مجددا به همان احساس ناشی از ترشح دوپامین نیاز پیدا کرده و دوباره اقدام به مصرف مجدد می‌صکند که باعث به وجود آمدن اعتیاد می‌صشود .یکی از راهبردهای ایجاد لاین‌صهای غیرصتدخینی توتون، کنترل ژن‌صهاصی دخیل در تولید نیکوتین از طریق خاموشی به روش RNAi می-باشد .از جمله ژن‌صهای موثر در تولید نیکوتین ژن پوترسینN -متیل ترانسفراز (PMT) است .هدف از اجرای این پژوهش، طراحی و ساخت سازه خاموشی RNAi با استفاده از همسانه‌صسازی دو قطعه کوچک و بزرگ توالی رمز کننده‌صی ژن PMT به منظور توقف بیان این ژن می‌صباشد .بدین منظور پس از استخراجDNA ی ژنومی از گیاهچه‌صهای توتون به روشCTAB ، تکثیر اختصاصی راه‌صانداز و قطعه ژنی PMT با استفاده از آغازگرهای طراحی شده و با روش PCR انجام شد .همسانه‌صسازی قطعه‌صی سنس انجام و پلاسمید حاوی این قطعه برای توالی‌صیابی ارسال گردید .طراحی آغازگرهای اختصاصی با استفاده از نرم افزارBlast - Primerو درج مکان‌صهای برشی انتهایی برای قطعه‌صی آنتی‌صسنس با توجه به نتیجه‌صی توالی‌صیابی انجام گرفت .با توجه به مکان‌صصهای برشی انتهایی دو قطعه، اتصال وارونه دو قطعه در پلاسمیدPTG۱۹ - Tانجام شد .بطوریکه با انتقال به پلاسمید بیانی، از رونویسی سازه تولید شده امکان تشکیل مولکول‌صهای RNA سنجاق‌صسری فراهم گردد .تایید سازه‌صی RNAi با آنزیم‌صهای برشی انجام گرفت
Text of Note
Tobacco is perennial plant, which is cultured in order to produce of smoking products. Every year, many people die because of smoking. After smoking, nicotine is entered into bloodstream leading to Dopamine production in brain. The effects of Dopamine production are gradually eliminated. People is had to smoking repeatedly for sensing that sense again that eventually resulting in addict to smoking. One of strategies for the production of tobacco with low nicotine content is the regulation of genes encoded nicotine by using RNAi technology. PMT is an important gene in nicotine biosynthesis pathway. The aim of the presence study was design and constructing of silencing RNAi through cloning small and large fragment of PMT encoding region in order to block the gene expression. For this aim, genomic DNA extraction was performed using CTAB method. Then, specific proliferation of PMT was done using PCR. Sense fragments were cloned and plasmids with fragments of interest were sent for sequencing. Specific promoter design was performed using Primer-Blast software. With considering sequencing result, terminal cutting site was inserted into sense fragment. Adverse annealing of two fragment was done in pTG19-T with regarding terminal cutting site of two fragment so that hairpin structure in RNA to be formed after transferring into expression plasmid. RNAi construct evaluation was done using restriction enzymes.
PERSONAL NAME - PRIMARY RESPONSIBILITY
موسی‌الرضایی، سهیلا
PERSONAL NAME - SECONDARY RESPONSIBILITY
باغبان کهنه‌روز، بهرام، استاد راهنما
قلی‌زاده، اشرف، استاد مشاور
ELECTRONIC LOCATION AND ACCESS
Public note
سیاه و سفید
نمایه‌سازی قبلی
