عنوان

بررسی نقش مولکولی ژن ‮‭KLF۱‬ در افزایش هموگلوبین ‮‭F‬ در افراد ناقل و مبتلا به تالاسمی

Number

‭۱۶۰۴۲پ‬

.Language of Text, Soundtrack etc

per

Title Proper

بررسی نقش مولکولی ژن ‮‭KLF۱‬ در افزایش هموگلوبین ‮‭F‬ در افراد ناقل و مبتلا به تالاسمی

First Statement of Responsibility

/ساناز ارشادی اسکویی

Name of Publisher, Distributor, etc.

: علوم طبیعی

Date of Publication, Distribution, etc.

، ‮‭۱۳۹۳‬

Text of Note

چاپی

Dissertation or thesis details and type of degree

دکتری

Discipline of degree

(.‮‭(M.Sc‬در رشته‌ی ژنتیک

Date of degree

‮‭۱۳۹۳/۱۱/۱۵‬

Body granting the degree

تبریز

Text of Note

سندرم های تالاسمی یک گروه از کم خونی های ناهمگون ارثی هستند که حاصل اختلال در سنتز یک یا چند زنجیره از گلوبین می باشند . علائم بالینی این سندروم ها ناشی از کاهش یا فقدان یک یا چند زنجیره از گلوبین و از طرف دیگر عدم تعادل بین سنتز زنجیره ها است که موجب کاهش هموگلوبین، میکروسیتوز و بی رنگ شدن گلبول های قرمز می گردد .افزایش هموگلوبین جنینی به صورت جبرانی در سندروم های تالاسمی بتا، دلتا بتا ، آنمی داسی شکل و در سندرم پابرجایی هموگلوبین ‮‭F‬ با نام ‮‭HPFH‬ ، در نتیجه افزایش فعالیت تا آخر عمر ژن گاما صورت می گیرد که باعث تخفیف علائم بیماری در این دسته از بیماران می شود به این صورت که افزایش جبرانی زنجیره های گاما در همراهی با ژن معیوب بتا موجب افزایش بیشتر هموگلوبین ‮‭F‬ و در نتیجه تعادل بهتر زنجیره ها و کاهش تجمع زنجیره های آلفا می شود .توجیه مولکولی افزایش هموگلوبین جنینی را می توان به ژن هایی نسبت داد که نقش تنظیمی در بیان ژن های خوشه بتا گلوبین دارند .از جمله این ژنها می توان به ژن ‮‭KLF۱‬ اشاره کرد .ژن ‮‭KLF۱‬ ژن بیان کننده یک فاکتور نسخه برداری است که در تغییر بیان هموگلوبین جنینی به هموگلوبین بالغ نقش مستقیمی داشته باعث خاموشی ژن گاما گلوبین می شود .هدف از انجام این طرح، بررسی وجود یا عدم وجود جهش و تعیین نوع آن در توالی ژن ‮‭KLF۱‬ در بیماران بتاتالاسمی با سطح بالاتر از حد نرمال ‮‭HbF‬می باشد که در صورت مثبت بودن نتایج طرح، می توان از وجود این جهش ها در بهبود شرایط وخیم بیماری در بیماران بتا تالاسمی کمک گرفت .در تحقیق حاضر ‮‭DNA‬ بیماران مبتلا به بتا تالاسمی با سطح ‮‭HbF‬ بالاتر از ‮‭۳‬ استخراج شده ، سپس ژن ‮‭KLF۱‬ تکثیر و قطعات بدست آمده تعیین توالی گردید .توالی های مورد نظر مورد بررسی قرار گرفت و مشخص گردید که بیماران مورد مطالعه در توالی ژن ‮‭KLF۱‬ خود دارای جهش ‮‭Missense‬ در محل اسیدآمینه شماره ‮‭۱۰۲‬ می باشند .پس از انجام بررسی های آماری مشخص شد فراوانی آلل حامل جهش شناسایی شده ‮‭(S۱۰۲P)‬ در جمعت مورد مطالعه‮‭Value = ۰.۰۰۱) - (P‬و در بین بیماران بررسی شده، معنی دار است همچنین، حضور پلی مورفیسم ‮‭C/T‬ درجایگاه- ‮‭۱۵۸‬در پروموتر گاما گلوبین ‮‭G‬ هم در گروه بیمارن و هم در گروه کنترل بررسی گردید ومشخص شد که یک همراهی مثبت بین حضورجایگاه برش آنزیم ‮‭Xmn۱‬ و افزایش میزان هموگلوبین ‮‭F‬ در افراد وجود دارد، به این معنی که فراوانی آلل مثبت ‮‭Xmn۱‬در جمعیت بیمار با سطح بالای ‮‭HbF‬، نسبت به فراوانی همین آلل در جمعیت کنترل نرمال ،‮‭Value =۰.۰۰۰۱)) - P‬معنی دار است . همچنین با بررسی ومقایسه نتایج حاصل از تعیین توالی ژن ‮‭KLF۱‬ در بیماران و گروه کنترل مشخص شد، احتمالاجهش شناسایی شده توانسته روی سطح ‮‭HbF‬ در بیماران موثر باشد

Text of Note

Thalassemia syndromes is a group of inherited autosomal recessive blood disorders . Also, persistent experssion of fetal hemoglobin (HbF) or HPFH is the phenotype that can observed as a feature of many hemoglobinopathy disorders such as -thalassemia or sickle cell anemia. The importance of this phenotype is that, can ameliorate the severity and bad condition in these hemoglobiopathiese phenotype. From molecular insight increased in HbF level can be caused by deletions within the HBB (-globin) gene cluster on chromosome 11 and point mutations in the HBG1and HBG2 (-globin) genes.There are also single nucleotid polymorphisms (SNPs) or oligo nucleotide motifs within -globin gene cluster wich are associated with higher HbF levels under erythroid stress condition such as sickle cell disease or beta thalassemia. Recenty it was found that point mutations in the KLF1 gene to be associated with HPFH phenotye. This study aims to investigate whether KLF1 mutation can have association with high HbF level in -thalassemia patient in southwest of Iran, the region that has high frequency of hemoglobinopathy disorders... At first the human KLF1 gene were amplified via PCR procedure, and sequencing were used to determine the candidate gene sequence region in these patients. Also XmnI polymorphism in the position of -158 of -globin gene promoter were analysed in all patients which showed a significant positive Xmn1 polymorphism in studied group in the propportion of cohort control group (P-Value 0.0001). Analysis of sequencing results revealed a missense mutation in their KLF1 gene at the position of 102 in EKLF protein .Identified mutation, S102P, were present in 13 out of 30 cases (43 ) of studied group with HPFH phenotype where as in 2 out of 13 mutant cases this mutation site is homozygosis and in 11 other cases the mutation site is heterozygosis, but this mutation site in all cases with normal HbF was normal,also statistical analysise showed that Allel frequency of the mutation S102P (P-Value=0.001) is significant porpotion of studied group. Finally with comparsion of sequencing results in patient and also cohort control group, strongly suggest that, identifined mutation could influence HbF level in these people

ارشادی اسکویی، ساناز

بابائی، اسماعیل، استاد راهنما

حمید، محمد، استاد راهنما

بانان خجسته، سیدمهدی، استاد مشاور

Public note

سیاه و سفید

نمایه‌سازی قبلی