استفاده از دو پراب TaqMan اختصاصی بر روی ژن های TSPYو SRY جهت تعیین جنسیت پیش از تولد جنین در اسب با استفاده از DNA آزاد جنینی
First Statement of Responsibility
/حبیب اله رشیدزاده
.PUBLICATION, DISTRIBUTION, ETC
Name of Publisher, Distributor, etc.
: دامپزشکی
Date of Publication, Distribution, etc.
، ۱۳۹۵
NOTES PERTAINING TO PUBLICATION, DISTRIBUTION, ETC.
Text of Note
چاپی
DISSERTATION (THESIS) NOTE
Dissertation or thesis details and type of degree
کارشناسی ارشد
Discipline of degree
دامپزشکی
Date of degree
۱۳۹۱/۰۳/۳۰
Body granting the degree
دانشگاه تبریز
SUMMARY OR ABSTRACT
Text of Note
تعیین جنسیت در دامصهای اهلی دارای کاربردهای مختلف تحقیقاتی و تجاری، به خصوص در سیستمصهای صنعتی دامپروری میصباشد .تعیین جنسیت در اسب، برای پرورش دهندگان این گونه دارای اهمیت اقتصادی قابل توجهی بوده که پژوهش در این زمینه را بیش از پیش محرز می نماید .هدف کلی از مطالعه حاضر بررسی استفاده از DNA آزاد جنینی موجود در سرم خون مادیان آبستن جهت تعیین جنسیت جنین در طی دوره آبستنی توسط دو پراب TaqManاختصاصی بر روی ژنصهای TSPY وSRY با به کارگیری از روشReal Time PCR ، میصباشد .جامعه آماری، شامل ۳۰ مادیان آبستن با سن آبستنی ۲ تا ۱۱ ماه انتخاب و یک اسب نر و یک اسب ماده به عنوان کنترل مثبت و منفی انتخاب گردید .به منظور استخراج DNA از روش فنل-کلروفورم استفاده شد .پروبصهای TaqMan از طریق نرم افزار Allel ID و پرایمرصها از طریق نرم افزار Blast primer طراحی گردیدند .نتایج نشان داد که ۱۲ عدد از کرهصها با جنسیت نر و ۱۸ عدد از کرهصها با جنسیت ماده متولد شدهصاند .جنسیت جنین های بدست آمده با نتایج تست مقایسه گردید و حساسیت، ویژگی و صحت با استفاده از دو ژنSRY و TSPY به روش مولتی پلکس به ترتیب ۳۳/۸۸ و ۱۰۰ و ۳۳/۹۳ بود .باتوجه به نتایج به دست آمده از روش فوق، استفاده از روش Real Time PCR با استفاده از پرابصهای TaqMan اختصاصی ژن TSPY و SRY در تعیین جنسیت جنین پیش از تولد در گونه اسب توصیه میگردد
Text of Note
Fetal sex determination in domestic animals have different research and commercial applications, especially is in the livestock industry. This technique has important economic value for horse breeders, especially in sales programs. The purpose of this study was using circulating cell free fetal DNA (ccffDNA) for prenatal fetal sex diagnosis in mare during gestation by SRY and TSPY genes. The Real Time PCR technique was used by specific TaqMan probes. Statistical Society contained 30 Pregnant mare with 2-11 month of Pregnancy. One stallion and one mare was selected as positive and negative control. For DNA extraction, we used the Phenol-chloroform extraction method. The required primers designed by Blast primer software and TaqMan probes designed by Allel ID software. Eighteen foals were male and 12 were male after parturition. In conclusion, our predicted fetal sex had the sensitivity, specificity and accuracy of 83.33 , 100 and 93.33 . Our results showed that the SRY and TSPY genes could be used for prenatal fetal sex determination by cffDNA with high accuracy