عنوان

اثر ویتامین D بر تکثیر و تمایز سلول های سرطانی روده با خصوصیات سلول های بنیادی و بیان مارکرهای های تمایزی موسین2، سایتوکراتین20 و CD133

Number

پ۲۷۵۳۰

.Language of Text, Soundtrack etc

per

Title Proper

اثر ویتامین D بر تکثیر و تمایز سلول های سرطانی روده با خصوصیات سلول های بنیادی و بیان مارکرهای های تمایزی موسین2، سایتوکراتین20 و CD133

First Statement of Responsibility

بهنوش تیمورزاده

Name of Publisher, Distributor, etc.

علوم طبیعی

Date of Publication, Distribution, etc.

۱۴۰۱

Specific Material Designation and Extent of Item

۷۲ص.

Accompanying Material

سی دی

Dissertation or thesis details and type of degree

کارشناسی ارشد

Discipline of degree

ژنتیک

Date of degree

۱۴۰۱/۰۶/۳۰

Text of Note

سرطان کلورکتال اغلب به درمان مقاوم است. سرطان کلورکتال از جمله بیماری های شایع در دنیا محسوب می شود. اثر بخشی داروهای شیمی درمانی در درمان سرطان کلورکتال ممکن است با کسب مقاومت دارویی مختل شود. هم چنین این روش عوارض جانبی فراوانی بر روی سلول ها و بافت های سالم دارد. به نظر می رسد سلول های بنیادی سرطانی نقش مهمی در ایجاد مقاومت دارویی دارند. بنابراین هدف قرار دادن این سلول ها جهت درمان سرطان روده حائز اهمیت است. از جمله روش های نمونه امروزی تمایز درمانی سلول های سرطانی با استفاده از ترکیبات طبیعی است. در این مطالعه ما به بررسی اثر ویتامین D بر تکثیر و تمایز سلول های روده با خصوصیات سلول های بنیادی و بیان مارکرهای تمایزی پرداختیم.مواد و روش ها: سلول های Caco2 با غلظت های 0.1، 0.5، 1 نانو مول از ویتامین D3 و به مدت 48-24 ساعت تیمار شدند. سپس پاسخ سلولی به دوز های به کار رفته از نقطه نظر تعداد سلولی، رشد، بیان ژن های CD133، Muc2، CK20 با استفاده از روش های MTT و روش real time RT-PCR و کلنی زایی سلولی و نیز آزاد شدن LDH از سلول ها بررسی شد.یافته ها: پس از 24 تا 48 ساعت تیمار با غلظت های 0.1 ، 0.5 و 1 نانومول ویتامین D3 میزان تکثیر سلولی Caco2 به ترتیپ در 24 ساعت بعد ازتیمار 68.06و65.12 و 48 ساعت بعد 40.87و 23.68در صد تعیین شد. تیمار 48 ساعته با غلظت های مشخص شده ویتامین D3 تعداد سلول ها و زنده مانی سلولی را کاهش داد. تیمار با 0.5 و 1 نانومول ویتامین D3 به مدت 48 ساعت منجر به کاهش میزان بیان CD133 به ترتیب 27% و 65% شد. همزمان مقادیر ویتامین D3 ذکر شده میزان بیان Muc2 را 1.41و 2.6 برابر کرد، هم چنین بیان CK20 نیز 1.4و 2.85 برابر شد. تعداد کلنی های تشکیل شده بعد از تیمار با مقادیر ذکر شده ویتامین D3 به طور قابل توجهی بعد از دو هفته کاهش یافت. هم چنین میزان آنزیم LDH آزاد شده به محیط کشت پس از 48 ساعت تیمار با ویتامین D3 با افزایش غلظت ویتامین D3 افزایش یافت.نتیجه گیری: بر اساس نتایج مطالعه ما، CK20، Muc2،CD133 ممکن است اهداف مولکولی ویتامین D3 باشد. هم چنین بر اساس این مطالعه، ویتامین D3 با خاصیت ضد تکثیری، کاندید مناسبی برای هدف قرار دادن سلولهای سرطانی کلورکتال با خصوصیات سلول های بنیادی محسوب می شود.

Text of Note

AbstractIntroduction: Colorectal cancer is one of the most common diseases in the world which has been often reported as resistant to treatments. The effectiveness of chemotherapy drugs in the treatment of colorectal cancer may be impaired by the acquisition of drug resistance. Furthermore, this method has many side effects on healthy cells and tissues. Taking into consideration that cancer stem cells seem to play an important role in drug resistance, targeting these cells is important for colon cancer treatment. Among today's exemplary methods is the therapeutic differentiation of cancer cells using natural compounds. In this study, we investigated the effect of vitamin D on the proliferation and differentiation of stem-like cells and the expression of differentiation markers.Material and methods: Caco2 cells as a model of CRC stem-like cells were treated with 0.1, 0.5,1 nmol vitamin D3 after which cell number, viability, cell proliferation-rates, number of colonies, genes expression of CD133, Muc2 and CK20 and LDH enzyme were evaluated using neobaur lam, MTT assay, colony forming assay, Real time RT-PCR assay and LDH assay kit respectively. Results:After 24-48 h treatments of Caco-2 cells with 0.1, 0.5. 1 nmol vitamin D3, proliferation-rates were measured to be 68.06% to 65.12% and 40.87% to 23.68 respectively. Treatments for 48 h with indicated vitamin D3 concentrations decreased cell numbers and viabilities.Treatment with 0.1, 0.5, 1 nmol vitamin D3 for 48 h decreased the expression level of CD133 ranged 27% to 65%. We also found that, 48 h treatment with 0.1-1 nmol vitamin D3 resulted in 1.41- to 2.6 and 1.4- to 2.85 fold increases in expression level of Muc2 and Ck20 respectively. Furthermore, after treatment of cells with Vitamin D3 the number of colonies showed sharp decreases with increasing the concentrations of vitamin D3 over 2 weeks. We also found that, the level of LDH enzyme in cell culture medium increased with increasing Vitamin D3 concentration.Conclusion:Based on our data, CD133, Muc2 and CK20 may provide molecular targets of Vitamin D3. Vitamin D3 with the anti-proliferative activity represents an attractive candidate and adjuvant compound to target CRC cells with the stem-like cells properties.

Variant Title

The effect of vitamin D on the cell proliferation and differentiation markers Muc 2, Cytokeratin 20 and CD133 in colorectal cancer stem-like cells

Entry Element

‏تیمورزاده،

Part of Name Other than Entry Element

‏بهنوش

Relator Code

تهيه کننده

Entry Element

‏صفر علی زاده،

Entry Element

سام،

Part of Name Other than Entry Element

‏رضا

Part of Name Other than Entry Element

‏محمدرضا

Dates

استاد راهنما

Dates

استاد راهنما

Entry Element

‏تبریز